ＨＰＶ融合蛋白、基因、载体、菌株、制备方法及用途技术

本发明专利技术涉及一种在大肠杆菌中高效表达的人乳头瘤病毒１６型Ｌ２Ｅ７重组蛋白的密码子优化基因，将其插入原核表达载体ｐＥＴ９ａ，优化基因获得高效表达，表达水平占全菌的５０％，表达蛋白经纯化后免疫小鼠，实验结果表明该蛋白与未经优化基因表达的蛋白具有相同的免疫原性，可诱发特异性的γ－ＩＮＦ的释放，肿瘤生长抑制动物实验表明蛋白免疫对肿瘤的生长有明显抑制作用，其中９０％小鼠肿瘤细胞生长完全抑制。该优化基因建立的Ｌ２Ｅ７重组蛋白原核高效表达系统能用于ＨＰＶ１６感染和相关宫颈癌的预防和治疗疫苗的中试生产及新药研发。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物工程
具体地，本专利技术涉及一种人乳头瘤病毒(HPV) 16 型L2E7融合蛋白、其编码基因、质粒载体、表达菌株、制备方法及其免疫预防和治疗用途。
技术介绍
世界卫生组织统计资料表明，子宫颈癌在全球妇女癌症死亡率中排列第二，在一 些发展中国家甚至居首位。每年大约有50万新发宫颈癌病例，约20万人死于宫颈癌[1—3]， 其中80%在发展中国家。我国是宫颈癌高发国之一，据不完全统计我国宫颈癌年发病率约 13.8万人，每年死于宫颈癌的患者约5万人。已有研究资料证明高危人乳头瘤病毒(HPV) 感染和子宫颈癌发生密切相关，90%以上的宫颈癌以及癌前病变，鳞状上皮病变组织中可 检测到HPV DNA，是宫颈癌的重要致病因子。由于刚在美国上市的HPV预防性疫苗价格昂贵 及伦理问题，目前临床仍无广泛预防HPV感染的措施，而现行的早期宫颈粘膜涂片筛查可 实现宫颈癌的早期发现，能降低癌症死亡率，但并不能消除HPV感染，且费用高，在不发达 国家难以普及。此外，目前对中晚期宫颈癌的化疗和手术治疗效果仍不理想，复发率较高且 花费较大。因此，研制特异性的免疫治疗方法即疫苗接种的办法预防本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）１６型Ｌ２Ｅ７融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白的氨基酸序列为ＳＱＥ　ＩＤ　ＮＯ．２所示的序列。

【技术特征摘要】
一种人乳头瘤病毒(HPV)16型L2E7融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白的氨基酸序列为SQE ID NO.2所示的序列。2. —种用于编码权利要求l所述的人乳头瘤病毒(HPV)16型L2E7融合蛋白的DNA序 列，其特征在于，所述DNA序列的核苷酸序列为SQE ID NO. l所示的序列。3. —种大肠杆菌表达质粒载体，其特征在于，所述的质粒载体是由权利要求2所述的 HPV16L2E7基因片段插入至质粒pET9a的Ndel和BamHI位点之间来构建的。4. 根据权利要求3所述的大肠杆菌表达质粒载体，其特征在于，所述的大肠杆菌是 BL21(DE3)。5. —种用于生产权利要求1所述的人乳头瘤病毒(HPV) 16型L2E7融合蛋白的大肠杆 菌菌株，其特征在于，所述大肠杆菌菌株含有权利要求3所述的质粒载体。6. 根据权利要求5所述的大肠杆菌菌株，其特征在于，所述的大肠杆菌为BL21 (DE3)。7. —种制备权利要求l所述的人乳头瘤病毒(HPV)16型L2E7融合蛋白的方法，其特征 在于，所述方法包括以下步骤1) 将权利要求2所述的HPV16L2E7基因片段插入大肠杆菌表达载体p...

【专利技术属性】
技术研发人员：田厚文，高见，赵莉，任皎，张卉，阮力，
申请(专利权)人：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]