酶免疫测定用的条状固相物及特制反应凹槽制造技术

酶免疫测定用的条状固相物及特制反应凹槽，是以硝酸纤维素滤膜（ＮＣ）为载体，可在反应凹槽内进行各种抗原抗体的快速检测。其特征是将ＮＣ制成条状，粘附于反应凹槽内，在靠近反应凹槽下方的条状ＮＣ顶端上面包覆有微量的供检测样本用的已知抗原或抗体。本品可同时用于多种抗原抗体的检测，且检测诸步骤均可在此凹槽内进行，操作简便快速，试剂用量少，灵敏度高，对检测结果可目测，也可用酶标仪读数，可开发成商品化试剂盒，社会经济效益好。（*该技术在2003年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本技术涉及免疫学
，属化验检测用的仪器配件类。目前，国内外采用酶联免疫吸附技术进行抗原，抗体检测时，大多以表面密排着若干小孔的聚苯乙烯塑料板作为固相载体，并制成各种商品化试剂盒出售，使用这种载体的塑料板因载体吸附能力差，反应表面积较大，尚存在难以微量化，且操作费时，检测速度慢等缺点。近年，在实验室建立了采用硝酸纤维素滤膜(NC)为固相载体的斑点酶免疫吸附测定法(DOt－ELISA)后，目前在国内虽也出现1－2种将NC加工处理的专供抗原、抗体进行DOt－ELISA检测的商品化NC试剂盒，但这类试剂盒仍存在以下缺点1、试剂用量大；2、操作仍较繁琐；3、不便于同时进行多份样本的检测；4、检测的结果只适用于采用斑点法进行目测，难以在液态下显色后，再用酶标仪以数字显示光密度(OD)值。本技术的目的是在于克服上述目前国内相近技术所存在的缺点和问题，提供一种用以进行酶免疫测定用的条状固相物及特制的反应凹槽，使之能同时进行多样本的抗原抗体检测，操作简便快速，试剂用量少，检测结果不仅可采用斑点法进行目测，而且也可以在液态下显色后，用酶标仪以数字显示其光密度值。实现本技术目的的技术方案是一种用于酶免疫测定用的条状固相物及特制的反应凹槽，其特征在于(1)条状固相物是由硝酸纤维素滤膜(NC)加工制成有固定长度与宽度，粘附在特制的反应凹槽里，其长度与凹槽长度相当，宽度略小于凹槽宽度，在靠近反应凹槽下方的条状NC的顶端上面包被有微量的供检测样本用的已知抗原或抗体；(2)特制的反应凹槽是由多个呈上高下低以一定倾斜度并行整齐排列着，下端各有一相当于半个凹槽壁高度的开口，每个凹槽的长度、宽度相同，凹槽与凹槽之间都有横隔隔开，凹槽上、下端开口处各与有一定宽度的上、下长槽相通，下长槽两端中的一边开有一个出水口，通向槽外。附图说明图1为条状固相物及特制的反应凹槽立体示意图其中1－条状固相物(NC) 2－包被抗原或抗体3－上长槽 4－下长槽 5－下长槽出水口6－反应凹槽 7－反应凹槽开口8－凹槽横隔 9－塑料板现结合附图通过实施例进一步说明本技术的结构和使用原理；实施例本技术采用模具压制出塑料(9)的特制反应凹槽(如图1)，将硝酸纤维素滤膜(NC)切割成条状(1)其长度与宽度，按反应凹槽的长、宽尺寸预先设计好，然后将切割成条状的NC粘附在反应凹槽里，在下方条状NC的顶端上面包被上微量的专供检测某种样本用的已知抗原或抗体，检测时可在微量的情况下使抗原抗体在凹槽中进行反应，由于反应凹槽是多个并行整齐排列着的，因而可同时进行多种抗原抗体检测，由于反应凹槽彼此间有横隔(8)隔开，可避免样本在检测时的相互混淆，每一个反应凹槽从上到下呈一定倾斜度，下方有一缺口(7)，这样结构使得检测时试剂和被检样本都能集中于凹槽下方，与条状NC顶端的已知抗原或抗体(2)进行反应，使试剂用量大为节省，并为用流水冲洗创造了极方便的洗涤条件，在反应凹槽的上、下两端均与一长槽相通，下长槽一边开有一个出水口，通向槽外，以供洗涤时的进水和出水。根据检测者的不同要求，对检测结果也可选以不同方法，使用不同的显色底物，如选用斑点目测，则使用二氨基联苯胺(DAB)或氨基乙基咔唑(AEC)作为底物(其显色产物为不溶性沉淀物)，如选用酶标仪测定光密度(OD)值，则使用四甲基联苯胺(TMB)或邻苯二胺(OPD)作为底物(其显色产物为可溶性)待显色后，将有色液体从凹槽中吸出移注于通用的塑料板中，置酶标仪下测定读数。应用本技术检测的一个实例例如要知道某甲和某乙是否受到乙型肝炎病毒的感染，可利用本技术所制成之乙肝实验诊断试剂盒，快速检测待测人血清中有无乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的存在，具体检测操作如下在两个特制的反应凹槽中的条状NC上分别加入待测对象甲和乙的血清和酶标单克隆抗－HBs各10ul，同时在另外两个凹槽中分别作已知阳性和阴性的血清对照，让它们在37℃预热的湿盒中作用反应30分钟，取出在自来水下冲洗半分钟，然后以相应底物显色观察结果，即可判定待测样本为阳性或是阴性(阳性者显色，表示血清中有HBsAg，阴性者不显色，表示血清中未测到HBsAg)。本技术与现有技术相比的优点是1、本技术可同时检测多份样本；2、检测时间快速(仅30分钟)；3、灵敏度高(如对乙肝病毒表面抗原可检出0.5－1ug／ml的抗原)；4、操作方便又能避免样本彼此之间的相互混淆；5、材料节省(1－10ul)，试剂用量少；6、便于免疫学快速检测法的建立；7、有开发低成本商品化试剂盒的前景，社会经济效益好。权利要求1.一种用于酶免疫测定的条状固相物及特制的反应凹槽，其特征在于(1)条状固相物是由硝酯纤维素滤膜(NC)加工制成有固定长度与宽度，粘附在特制的反应凹槽里，其长度与凹槽长度相当，宽度略小于凹槽宽度，在靠近反应凹槽下方的条状NC的顶端上面包被有微量的供检测样本用的已知抗原或抗体；(2)特制的反应凹槽是由多个呈上高下低以一定倾斜并行整齐排列着，下端各有一相当于半个凹槽壁高度的开口，每个凹槽的长度、宽度相同，凹槽与凹槽之间都有横隔隔开，凹槽上、下端开口处各与有一定宽度的上、下长槽相通，下长槽两端中的一边开有一个出水口，通向槽外。专利摘要酶免疫测定用的条状固相物及特制反应凹槽，是以硝酸纤维素滤膜(NC)为载体，可在反应凹槽内进行各种抗原抗体的快速检测。其特征是将NC制成条状，粘附于反应凹槽内，在靠近反应凹槽下方的条状NC顶端上面包覆有微量的供检测样本用的已知抗原或抗体。本品可同时用于多种抗原抗体的检测，且检测诸步骤均可在此凹槽内进行，操作简便快速，试剂用量少，灵敏度高，对检测结果可目测，也可用酶标仪读数，可开发成商品化试剂盒，社会经济效益好。文档编号G01N33/53GK2156511SQ9321178公开日1994年2月16日 申请日期1993年5月3日 优先权日1993年5月3日专利技术者戴金 申请人:戴金本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于酶免疫测定的条状固相物及特制的反应凹槽，其特征在于：（１）条状固相物是由硝酯纤维素滤膜（ＮＣ）加工制成有固定长度与宽度，粘附在特制的反应凹槽里，其长度与凹槽长度相当，宽度略小于凹槽宽度，在靠近反应凹槽下方的条状ＮＣ的顶端上面包被有微量的供检测样本用的已知抗原或抗体；（２）特制的反应凹槽是由多个呈上高下低以一定倾斜并行整齐排列着，下端各有一相当于半个凹槽壁高度的开口，每个凹槽的长度、宽度相同，凹槽与凹槽之间都有横隔隔开，凹槽上、下端开口处各与有一定宽度的上、下长槽相通，下长槽两端中的一边开有一个出水口，通向槽外。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：戴金，
申请(专利权)人：戴金，
类型：实用新型
国别省市：35[中国|福建]