带有过滤结构的抗原—抗体反应型检测试纸制造技术

本实用新型专利技术涉及的是一种带有过滤结构的抗原－抗体反应型检测试纸。在沿长度方向延伸的片状支承结构体的一侧表面经连接材料设置有可用于包被检测用生物大分子的检测反应膜，在其长度方向的一端表面处设置有包被有化学偶合物的垫片材料结构层。至少在检测反应膜长度方向的另一端表面处以能与其保持液体渗透接触方式设置有至少一层疏水性的血液细胞过滤结构层。（*该技术在2011年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本技术涉及的是一种医疗诊断检验中使用的基于抗原—抗体反应原理的检测试纸，特别是在对多种病原抗体或抗原进行快速定性和/或定量检测时，可以以采集的全血为被测标本，使对全血的分离和检测能一步完成的检测试纸。
技术介绍
利用硝基纤维素膜、聚苯乙烯膜、聚乙烯膜、尼龙膜、纤维素膜、醋酸纤维素膜、玻璃纤维膜等固相载体作为检测反应膜，将检测所用的抗原、抗体或其它蛋白质、糖类、脂质、核酸等生物大分子物质包被于其表面部位，用于对生物标本中的待检物，如肿瘤抗原、人体激素、病原微生物等相关因子的检测，已见于各种快速血清检测试纸。如，用于人免疫缺陷病毒抗体(HIV)、人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、巨细胞病毒(CMV)、前列腺癌相关抗原(PSA)、下丘脑促甲状腺激素(TSH)等诊断的试纸条，以及本专利技术人此前已在ZL 00245278.2专利中所提出的可用于对多种病原抗体或抗原进行快速定性和/或定量检测用的试纸。但这些检测试纸在使用中的一个局限是，均要求以血浆或血清作为检测所用的被检测标本。这就需要对所采集的全血标本先经特殊的设备进行分离处理后，所得到血浆或血清后再用于检测。这种对全血的分离处理至少要耗时1小时，因此在满足快速检测，以及在简陋或恶劣条件下检测的广泛适应性方面尚存在有进一步改进和完善的需要。此外，Oudhensden和Roesink(Primecare BV)曾报到过一种用单层全血过滤膜与检测反应膜结合而用于血浆胆固醇检测的方法，避免了离心分离血浆的操作。但该方法要求在分离血浆后将反应膜与全血过滤膜分离，并转移至另一个测定容器中完成检测，不能实现和达到一步完成的快速检测诊断目的。
技术实现思路
针对上述情况，本技术将提供一种能一步完成对血浆和/或血清的过滤及进行抗原——抗体反应的检测过程，从而实现能以全血为被测标本，快速完成所需的定性和/或定量生物学检测的带有过滤结构的检测试纸。本技术的带有过滤结构的抗原—抗体反应型检测试纸，是在沿长度方向延伸的片状支承结构体的一侧表面经连接材料设置有可用于包被检测用生物大分子的检测反应膜。在其长度方向的一端表面处设置有包被有化学偶合物的垫片材料结构层，并至少在检测反应膜长度方向的另一端表面处以能与其保持液体渗透接触方式设置有至少一层疏水性的血液细胞过滤结构层。此处所称的血液细胞，是根据检测需要希望从所采集的被检全血标本中滤除的各种血液细胞。一般情况下，检测使用的标本多为不含红细胞的血浆和/或血清，因此上述的血液细胞过滤结构大多数情况下可以是指滤除红细胞的过滤结构。由于红细胞的直径一般均≥6微米，因此使所说的血液细胞过滤结构层的过滤孔径＜6微米，即可以达到使红细胞不能通过而被滤除的目的。例如，经试验证明，采用加拿大Spectral Diagnostic生产的S/G全血分离膜是具有能满意滤除红细胞的推荐方式之一。由于此类分离用的滤膜材料多具有高疏水性，因此血浆和/或血清等水性或水溶性液体成分可以以损失量极低的方式顺利和迅速地通过。在上述检测试纸结构中所说的包被有化学偶合物的垫片材料结构层中的化学偶合物，根据检测的需要，可以采用DNP(邻苯二甲酸二壬酯)等能以肉眼进行观察和判别，或者是不能由肉眼直接观察而需借助相应仪器配合进行分析判读的各类示踪标记物质或显色性物质。这些示踪标记物质或显色性物质可以包括如胶体金颗粒、银颗粒、有机分子、脂质体或有机聚合物胶体颗粒等多种形式颗粒显色剂，还可以为发光标记物、比色标记物、荧光标记物、化学标记物、酶、放射性标记物、或射频标记物、金属胶体、化学发光标记物等多种类型。本技术上述结构形式检测试纸的使用方法与本专利技术人此前曾在ZL00245278.2专利中提出的检测试纸相同。将被检测的抗凝或非抗凝的全血标本按检测需要量滴加在该血液细胞过滤结构层处，标本中的红细胞或其它希望被滤除的血液细胞即可被过滤结构截留，而标本中的血浆和/或血清则通过过滤结构渗透至包被有检测用生物大分子的检测反应膜表面，进而在毛细作用和液体水平侧流作用下在该检测反应膜表面进行正向和逆向的两次扩散和迁移运动，进行并完成所需的检测。分别用100微升抗凝全血和100微升非抗凝血，按此方式进行了检测操作全过程的试验结果表明，在检测试纸的观察部位处除显示出有正常的对照和检测标记外，均未显示出有红细胞滤过及溶血现象，表明了本技术上述结构的检测试纸对血液细胞过滤的有效性是符合检测需要的。上述结构中所说的使血液细胞过滤结构层与检测反应膜间能保持液体渗透的接触方式，既可以采取使所说的血液细胞过滤结构层与检测反应膜以直接接触的被覆结合方式设置，也可以采取在所说的血液细胞过滤结构层与检测反应膜之间还设置有亲水性的液体吸收渗透材料结构，即，使所说的血液细胞过滤结构层被覆结合在与检测反应膜直接接触的该液体吸收渗透材料结构的设置形式。同样以100微升抗凝全血进行了上述检测操作的试验结果同样显示，采用使血液细胞过滤结构层经该液体吸收渗透材料结构与检测反应膜接触的结构形式，其血浆的过滤时间、浸润扩散速度与使血液细胞过滤结构层被覆于检测反应膜的直接接触形式间无显著差异，也未出现红细胞滤过及溶血现象。上述结构中所说的血液细胞过滤结构层，根据使用需要可以采用为一层滤膜的结构形式，也可以为由两层甚至更多层滤膜共同组成的形式。试验结果显示，增加滤膜的层数，会对血浆和/或血清的过滤及浸润扩散速度造成影响。如，采用两层红细胞滤膜时，其血浆和/或血清的过滤及浸润扩散速度比单层滤膜时可降低50％。当采用两层或多层过滤结构时，根据检测需要，其各层过滤结构可以为相同的或是不同种类的滤膜材料。进一步的试验结果显示，上述检测试纸中血液细胞过滤结构层面积大小的改变，可引起血浆和/或血清过滤时间相应改变。即，有效过滤面积增大，过滤时间则可相应缩短。因此，一般以使该血液细胞过滤结构层面积大小与其所在的检测试纸部位面积相适应即可。同时进行的试验还显示，分别以肝素、枸橼酸三钠和EDTA等不同的抗凝剂对所说的血液细胞过滤结构层进行预处理后，同样加入100微升不抗凝的全血标本后，在检测试纸的观察部位处会表现出有红细胞膜的滤过现象，表明所使用的血液细胞过滤结构层以不作抗凝处理为宜。进一步，与上述结构方式类似，在所说的包被有化学偶合物的垫片材料层表面处也可以采取以能与其保持液体渗透接触方式设置有至少一层疏水性的第二血液细胞过滤结构。采用此结构后，可以使检测操作的适用范围进一步扩大，即在该处使用的既可以使用化学缓冲液，也可以是血液中滤除了适当血液细胞后的剩余液体成分。例如，当使所说的第二血液细胞过滤结构的过滤孔径＜6微米时，在该包被有化学偶合物的垫片材料层部位除可使用缓冲液对化学偶合物进行溶解和进行逆向的扩散和迁移外，还可以根据需要也采用全血并经该第二血液细胞过滤结构滤除红细胞后的血浆和/或血清。分别用100微升抗凝全血和100微升非抗凝，按同样方式进行的检测操作全过程试验结果表明，以全血并经该第二血液细胞过滤结构过滤后的血浆和/或血清代替缓冲液后，在检测试纸的观察部位处除显示出有正常的对照和检测标记外，也均未显示出有红细胞滤过及溶血现象。此外，在采用此种结构形式的检测试纸时，除可单独使用缓冲液或全血外，也可以将其联合使用，即，本文档来自技高网...

【技术保护点】
带有过滤结构的抗原－抗体反应型检测试纸，在沿长度方向延伸的片状支承结构体（１）的一侧表面经连接材料（９）设置有可用于包被检测用生物大分子的检测反应膜（５），在其长度方向的一端表面处设置有包被有化学偶合物的垫片材料结构层（２），其特征在于至少在检测反应膜（５）长度方向的另一端表面处以能与其保持液体渗透接触方式设置有至少一层疏水性的血液细胞过滤结构层（７）。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：周思亮，
申请(专利权)人：周思亮，
类型：实用新型
国别省市：90[中国|成都]