一种同时检测四种念珠菌的引物探针组合和试剂盒制造技术

本发明专利技术提供了本发明专利技术提供了一种检测四种念珠菌的引物探针组合，属于微生物检测技术领域，包括引物和探针，所述引物为上游引物和下游引物；所述上游引物的序列如SEQ ID No.1所示；所示下游引物的序列如SEQ ID No.2所示；所述探针为标记有报告荧光基团和淬灭荧光基团的如SEQ ID No.3所示的序列。本发明专利技术提供的一对引物一条探针特异性地同时检测白色念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌及近平滑念珠菌四种念珠菌。

A primer probe combination and kit for simultaneous detection of four Candida species

The invention provides a combination of primer probes for detecting four species of Candida, which belongs to the field of microbiological detection, including primers and probes, the primers are upstream primers and downstream primers; the sequence of the upstream primers, as shown by SEQ ID No.1, is shown by the sequence of the primers, such as SEQ ID No.2. The probe is a sequence showing the reported fluorescent groups and quenched fluorescent groups, such as SEQ ID No.3. The present invention provides one pair of primers and one probe specifically for the simultaneous detection of four Candida albicans, Candida tropicalis, Candida glossy and Candida albicans.

【技术实现步骤摘要】
一种同时检测四种念珠菌的引物探针组合和试剂盒
本专利技术涉及微生物检测
，具体涉及一种同时检测四种念珠菌的引物探针组合和试剂盒。
技术介绍
念珠菌包括大约150种不产生芽孢的酵母菌，是真菌中最常见的条件致病菌，其中对人有致病作用的有白色念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌、近平滑念珠菌、星形念珠菌和克柔念珠菌。其中白色念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌和近平滑念珠菌占临床医学样本中的80％以上。念珠菌常寄生于人的皮肤、口腔、阴道和肠粘膜等处，当机体免疫机能低下或正常寄居部位的微生态环境失调，容易引起念珠菌病。念珠菌可引起皮肤粘膜浅层或深部感染，浅层感染主要包括：口腔炎、阴道炎、龟头炎、膀胱炎等；深部感染时可感染包括心、肝、脾、肺、肾、脑、血液、胃肠、骨骼等。念珠菌深部感染的预后差，死亡率高。广谱抗生素、免疫抑制剂、导管插管、腹膜透析、放射治疗和HIV等均可使深部念珠菌感染病例增多。目前常规采用荧光探针法(TaqMan法)检测念珠菌，用一对引物加一条探针，决定了其特异性非常高，基本上不存在非特异性扩增，解决了交叉反应的难题，但是一对引物加一条探针只能够检测一种念珠菌。专利
技术实现思路
有鉴于此，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种同时检测四种念珠菌的引物探针组合，包括引物和探针，所述引物为上游引物和下游引物；所述上游引物的序列如SEQ ID No.1所示；所述下游引物的序列如SEQ ID No.2所示；所述探针为标记有报告荧光基团和淬灭荧光基团的如SEQ ID No.3所示的序列。

【技术特征摘要】
1.一种同时检测四种念珠菌的引物探针组合，包括引物和探针，所述引物为上游引物和下游引物；所述上游引物的序列如SEQIDNo.1所示；所述下游引物的序列如SEQIDNo.2所示；所述探针为标记有报告荧光基团和淬灭荧光基团的如SEQIDNo.3所示的序列。2.一种试剂盒，包括权利要求1所述的引物探针组合、阴性对照品、阳性对照品和PCR反应液。3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中包括：浓度为8～12μM的上游引物15～25μL，浓度为8～12μM的下游引物15～25μL，浓度为8～12μM的探针8～15μL，浓度为800～1200ng/mL的阴性对照品10～20μL，质粒总浓度为15～25ng/mL的阳性对照品10～20μL，PCR反应液的量为200～250μL。4.根据权利要求2或3所述的试剂盒，其特征在于，所述阴性对照品为含有拟南芥DNA片段的质粒，所述拟南芥DNA片段的序列如SEQIDNo.4所示。5.根据权利要求2或3所述的试剂盒，其特征在于，所述阳性对照品包括含有白色念珠菌DNA序列的质粒、含有热带念珠菌DNA序列的质粒、含有近平滑念珠菌DNA序列的质粒和含有光滑念珠菌DNA序列的质粒，所述含有白色念珠菌DNA序列的质粒与含有热带念珠菌DNA序列的质粒、含有近平滑念珠菌DNA序列的...

【专利技术属性】
技术研发人员：方园，任云，欧阳云，冯莹，
申请(专利权)人：杭州缔蓝生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33