taqman探针法进行TP53易感基因筛查的方法及使用的探针和引物技术

本发明专利技术提供了一种taqman探针法进行TP53易感基因筛查的方法，包括如下步骤：本发明专利技术所述的检测方法包括以下步骤：(1)正常人群口腔拭子基因组提取；(2)设计TP53引物及探针；(3)使用TP53的引物和探针对基因组进行PCR反应；(4)PCR结束后进行荧光读取，并进行基因分型；(5)综合4个探针检测的结果，对个体的肿瘤易感性进行综合评估。本发明专利技术的taqman引物及探针具有良好的分型效果，能非常准确的确定个体的基因型。

TaqMan probe method for TP53 susceptibility gene screening and probes and primers used

The present invention provides a method of TaqMan probe method for TP53 susceptible gene screening, including the following steps: the detection method of the present invention includes the following steps: (1) a normal population of oral swab genome extraction; (2) designing TP53 primers and probes; (3) using TP53 primers and probes for PCR reaction to the genome; (4) PCR junction Fluorescence detection was performed after the beam and genotyping was performed. (5) the results of 4 probe tests were combined to evaluate the susceptibility of individual tumors. The TaqMan primers and probes of the invention have good typing effect and can determine the genotype of individuals very accurately.

【技术实现步骤摘要】
taqman探针法进行TP53易感基因筛查的方法及使用的探针和引物
本专利技术涉及肿瘤易感基因筛查与荧光定量PCR的方法，尤其涉及一种taqman探针法进行TP53易感基因筛查的方法。
技术介绍
癌症是二十一世纪人类健康最大的威胁，虽然环境与生活习惯对癌症的发生有重要影响，但从本质上讲癌症是一种基因病，遗传因素增加了我们对癌症的易感性。通俗讲就是单核苷酸多态性(singlenucleotidepolymorphism,SNP)，其主要指在基因组水平上，由单个核苷酸变异引起的DNA序列多态性。是一种十分理想、有效的分子标记。TP53基因翻译的P53蛋白是细胞生长、增殖和损伤修复的重要调节因子。TP53基因是一种抑癌基因，在正常细胞中低表达，在恶性肿瘤中高表达，其定位于人类第17号染色体的短臂上，编码和表达TP53蛋白，是细胞生长周期中的调节因子，与细胞周期的调控、DNA修复、细胞分化、细胞凋亡等重要的生物学功能相关联。野生型TP53蛋白可抑制带有DNA损伤和染色体畸变的细胞发生分裂，从而阻止畸变传递给子细胞，具有广谱的肿瘤抑制作用。相反TP53基因的突变(缺失)则与肿瘤的发生、发展有密本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种taqman探针法进行TP53易感基因筛查的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)口腔拭子基因组提取；(2)确定TP53引物及探针；(3)使用TP53的引物和探针对步骤(1)的基因组进行PCR反应；(4)PCR结束后进行荧光读取，并进行基因分型；(5)综合探针检测的结果，对个体的肿瘤易感性进行综合评估。

【技术特征摘要】
1.一种taqman探针法进行TP53易感基因筛查的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)口腔拭子基因组提取；(2)确定TP53引物及探针；(3)使用TP53的引物和探针对步骤(1)的基因组进行PCR反应；(4)PCR结束后进行荧光读取，并进行基因分型；(5)综合探针检测的结果，对个体的肿瘤易感性进行综合评估。2.根据权利要求1所述的taqman探针法进行TP53易感基因筛查的方法，其特征在于，所述步骤(1)中的提取方法为使用口腔拭子刮取口腔黏膜细胞，使用100ul口腔拭子保存液保存，经400ml细胞裂解液与40ul、20ug/ul蛋白酶k裂解细胞释放出基因组DNA，后选择性沉淀去除蛋白，纯净的基因组DNA溶解于50ulTEbuffer中备用；所述。3.根据权利要求1所述的taqman探针法进行TP53易感基因筛查的方法，其特征在于，所述步骤(2)中的引物包括TP53基因上的rs78378222、rs12951053、rs2287498、rs2078486SNP位点的引物。4.根据权利要求3所述的taqman...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭新雨，肖哲，焦少灼，戚珠云，郑乃中，陈增辉，王琦童，温稳，
申请(专利权)人：美因健康科技北京有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11