N`‑取代甲基亚基‑4‑(((取代苯基)嘧啶‑2‑基)氨基)苯甲酰肼衍生物及制备制造技术

N'‑取代甲基亚基‑4‑(((取代苯基)嘧啶‑2‑基)氨基)苯甲酰肼衍生物及制备，涉及恶性肿瘤药物，所述N'‑取代甲基亚基‑4‑(((取代苯基)嘧啶‑2‑基)氨基)苯甲酰肼衍生物结构如式(I)所示，还提供了上述N'‑取代甲基亚基‑4‑(((取代苯基)嘧啶‑2‑基)氨基)苯甲酰肼衍生物的制备方法和用途，特别是在制备治疗抗肿瘤疾病方面的应用。对提供的化合物进行了调控Nur77和RxRα信号通路的活性测试，发现其抗肿瘤活性与其抑制Nur77或RxRα信号通路活性呈正相关。

【技术实现步骤摘要】
N′-取代甲基亚基-4-(((取代苯基)嘧啶-2-基)氨基)苯甲酰肼衍生物及制备
本专利技术涉及恶性肿瘤药物，尤其是涉及N'-取代甲基亚基-4-(((取代苯基)嘧啶-2-基)氨基)苯甲酰肼衍生物及其制备方法和医药用途。
技术介绍
核受体超家族(nuclearreceptorsuperfamily,NR)是细胞的一类转录因子，这类转录因子一般需要脂溶性的配体与之结合来发挥功能。当体内发生病变时，核受体的表达或其他受其调控的蛋白表达出现紊乱的时候，外源的配体就可以通过与核受体结合来调控蛋白的表达，从而达到治疗的目的。Nur77和RxRα是核受体超家族的成员。Nur77作为促生长因子可以介导促分裂原活化蛋白激(Mitogen-ActivatedProteinKinase,MAPK)、蛋白激酶C(ProteinKinaseC，PKC)、蛋白激酶A(ProteinKinaseA，PKA)和核转录因子κB(NuclearTranscriptionFactorκB，NF-κB)等多条促进生长的信号通路，具有促进增殖的功能。研究表明，Nur77在很多肿瘤细胞中都有明显的高表达现象。如肠癌、肺癌、前列腺癌等癌组织中均能检测到Nur77的表达量高于癌旁组织。Nur77促进肿瘤细胞增殖主要是通过与DNA相互作用行使其转录激活的作用来影响多条促增殖的信号通路实现的([1]王维嘉，王渊，吴乔，等.受体TR3/Nur77与肿瘤治疗[J].中国细胞生物学学报，2015，37(5)：604-615)。因此，设计抗肿瘤活性好、生物利用度高和毒性小的Nur77调节剂成为当前的研究热点。另外，与正常组织及良性病相比，恶性肿瘤组织中也常伴随RxR的表达上调，而用9-cisRA处理相应的肿瘤细胞时，产生细胞的生长抑制和诱导凋亡作用([2]Gao,W.,Liu,J.,Hu,M.,Huang,M.,Cai,S.,Zeng,Z.,Lin,B.,Cao,X.,Chen,J.,Zeng,J.Z.,Zhou,H.,andZhang,X.K.(2013)RegulationofproteolyticcleavageofretinoidXreceptor-alphabyGSK-3beta,Carcinogenesis34,1208-1215)。因此，设计抗肿瘤活性好、生物利用度高和毒性小的RxRα调节剂也是当前抗癌药物研究的热点之一。
技术实现思路
本专利技术的第一目的在于提供具有新结构的一类N'-取代甲基亚基-4-(((取代苯基)嘧啶-2-基)氨基)苯甲酰肼衍生物。本专利技术的第二目的在于提供N'-取代甲基亚基-4-(((取代苯基)嘧啶-2-基)氨基)苯甲酰肼衍生物的制备方法。本专利技术的第三目的在于提供一类N'-取代甲基亚基-4-(((取代苯基)嘧啶-2-基)氨基)苯甲酰肼衍生物在制备抗肿瘤药物方面的应用。本专利技术的第四目的在于提供一类新颖的同时且具有调控Nur77或RxRα信号通路活性的衍生物，可以通过调控Nur77或RxRα相关信号通路活性，阻断肿瘤细胞增殖，诱导细胞凋亡，从而可以用于其相关疾病的治疗和预防。N'-取代甲基亚基-4-(((取代苯基)嘧啶-2-基)氨基)苯甲酰肼衍生物的结构式(I)为：其中，R1代表H、卤素；优选H,Cl；其中，R2代表C1～C6的脂肪烃基，取代或未取代的芳基；优选丙基、丁基团、苯基、萘基、吡啶基、呋喃-2-基、2-甲氧基-苯基、3-甲氧基-苯基、4-甲氧基-苯基、2,3-二甲氧基-苯基、2,4-二甲氧基-苯基、2,5-二甲氧基-苯基、2,3,4-三甲氧基-苯基、2,4,5-三甲氧基-苯基、3,4,5-三甲氧基-苯基、2-氟基-苯基、3-氟基-苯基、4-氟基-苯基、2-三氟甲基-苯基、3-三氟甲基-苯基、4-三氟甲基-苯基、2-氟-4-三氟甲基-苯基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基等。所述N'-取代甲基亚基-4-(((取代苯基)嘧啶-2-基)氨基)苯甲酰肼衍生物的制备方法包括以下步骤：1)以对氨基苯甲酸乙酯(1)和氰胺为原料，无水乙醇为溶剂，在搅拌状态下加入盐酸，再升温至回流反应，降温至0℃加入硝酸铵的水溶液，过滤得对苯甲酸乙酯胍盐(2)；2)以苯乙酮(3)为原料，在N,N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛中反应得到中间体(E)-3-(二甲氨基)-1-取代苯基-2-丙烯-1-酮(4)；3)将中间体(E)-3-(二甲氨基)-1-取代苯基-2-丙烯-1-酮(4)与对苯甲酸乙酯胍盐(2)在乙醇中以氢氧化钠为催化剂回流反应，得到4-((4-(取代苯基)嘧啶-2-基)氨基)苯甲酸乙酯(5)，再与水合肼在乙醇溶剂中回流反应，得到中间体N'-取代甲基亚基-4-((4-(取代苯基)嘧啶-2-基)氨基)苯甲酰肼(6)；4)将中间体N'-取代甲基亚基-4-((4-(取代苯基)嘧啶-2-基)氨基)苯甲酰肼(6)与不同的胺缩合得到目标化合物N'-取代甲基亚基-4-(((取代苯基)嘧啶-2-基)氨基)苯甲酰肼衍生物(7)，其反应路线为：其中，R1代表H、卤素；优选H、Cl。其中，R2代表C1～C6的脂肪烃基，取代或未取代的芳基；优选丙基、丁基团、苯基、萘基、吡啶基、呋喃-2-基、2-甲氧基-苯基、3-甲氧基-苯基、4-甲氧基-苯基、2,3-二甲氧基-苯基、2,4-二甲氧基-苯基、2,5-二甲氧基-苯基、2,3,4-三甲氧基-苯基、2,4,5-三甲氧基-苯基、3,4,5-三甲氧基-苯基、2-氟基-苯基、3-氟基-苯基、4-氟基-苯基、2-三氟甲基-苯基、3-三氟甲基-苯基、4-三氟甲基-苯基、2-氟-4-三氟甲基-苯基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基等。所述N'-取代甲基亚基-4-(((取代苯基)嘧啶-2-基))苯甲酰肼衍生物具有较好的肿瘤抑制活性，可用于制备抗癌药物。对上述化合物进行了抑制Nur77和RxRα信号通路的活性测试，发现其抗肿瘤活性与其调控Nur77或RxR信号通路活性呈相关性。因此，所述N'-取代甲基亚基-4-(((取代苯基)嘧啶-2-基))苯甲酰肼衍生物可用于预防和治疗与Nur77和RxRα信号通路受扰有关的疾病，如肿瘤等。所述N'-取代甲基亚基-4-(((取代苯基)嘧啶-2-基)氨基)苯甲酰肼衍生物在结构上具有较高的创新性。本专利技术涉及的N'-取代甲基亚基-4-(((取代苯基)嘧啶-2-基)氨基)苯甲酰肼衍生物制备方法，反应成本低，产率高，反应过程简单易控制，适用于工业化生产。附图说明图1为HepG2细胞经过M2，M17，M22等化合物在不同浓度(0.5,1.0和1.5μM)处理24h后，Bcl-2，Nur77和RxRα的免疫印迹分析结果。具体实施方式为了便于理解本专利技术，现结合具体实施方式对本专利技术作进一步说明，以进一步诠释本专利技术，但不构成对本专利技术的任何方式的限制。以下给出体外抗肿瘤增殖活性测试试验：首先，测定所述N'-取代甲基亚基-4-(((取代苯基)嘧啶-2-基)氨基)苯甲酰肼衍生物在40μmol/L浓度下对不同肿瘤细胞的生长抑制率，确定敏感细胞，结果显示，提供的化合物都具有一定的肿瘤细胞生长抑制活性，并且除6个化合物外其他化合物在40μmol/L浓度下对肿瘤细胞的抑制率均超过50％，所述化合物对肿瘤细胞生长的抑制呈浓度依赖性；然后测试6本文档来自技高网...

【技术保护点】
N'‑取代甲基亚基‑4‑(((取代苯基)嘧啶‑2‑基)氨基)苯甲酰肼衍生物，其特征在于其结构式(I)为：

【技术特征摘要】
1.N'-取代甲基亚基-4-(((取代苯基)嘧啶-2-基)氨基)苯甲酰肼衍生物，其特征在于其结构式(I)为：其中，R1代表H、卤素；其中，R2代表C1～C6的脂肪烃基，取代或未取代的芳基。2.如权利要求1所述N'-取代甲基亚基-4-(((取代苯基)嘧啶-2-基)氨基)苯甲酰肼衍生物，其特征在于所述R1代表H、Cl。3.如权利要求1所述N'-取代甲基亚基-4-(((取代苯基)嘧啶-2-基)氨基)苯甲酰肼衍生物，其特征在于所述R2代表丙基、丁基团、苯基、萘基、吡啶基、呋喃-2-基、2-甲氧基-苯基、3-甲氧基-苯基、4-甲氧基-苯基、2,3-二甲氧基-苯基、2,4-二甲氧基-苯基、2,5-二甲氧基-苯基、2,3,4-三甲氧基-苯基、2,4,5-三甲氧基-苯基、3,4,5-三甲氧基-苯基、2-氟基-苯基、3-氟基-苯基、4-氟基-苯基、2-三氟甲基-苯基、3-三氟甲基-苯基、4-三氟甲基-苯基、2-氟-4-三氟甲基-苯基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基。4.如权利要求1～3所述N'-取代甲基亚基-4-(((取代苯基)嘧啶-2-基)氨基)苯甲酰肼衍生物的制备方法，其特征在于包括以下步骤：1)以对氨基苯甲酸乙酯(1)和氰胺为原料，无水乙醇为溶剂，在搅拌状态下加入盐酸，再升温至回流反应，降温至0℃加入硝酸铵的水溶液，过滤得对苯甲酸乙酯胍盐(2)；2)以苯乙酮(3)为原料，在N,N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛中反应得到中间体(E)-3-(二甲氨基)-1-取代苯基-2-丙烯-1-酮(4)；3)将中间体(E)-3-(二甲氨基)-1-取代苯基-2-丙烯-1-酮(4)与对苯甲酸乙酯胍盐(2)在乙醇中以氢氧化钠为催化剂回流反应，得到4-((4-(取代苯基)嘧啶-2-基)氨基)苯甲酸乙酯(5)，再与水合肼在乙醇溶剂中回流反应，得到中间体N'-取代甲基...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴振，方美娟，曾锦章，赵俊明，周彤彤，徐剑文，钱宇卿，
申请(专利权)人：厦门大学，
类型：发明
国别省市：福建,35