一种胺苯吡唑酮残留量的GC-EI-MS测定方法技术

本发明专利技术公开了一种胺苯吡唑酮残留量的GC‑EI‑MS测定方法，该方法主要用于测定粮谷、动物源性食品等复杂基质食品农产品中残留的胺苯吡唑酮含量的方法。用乙腈或含1%乙酸的乙腈溶液均质提取样品中残留的胺苯吡唑酮，C18/PSA固相萃取柱净化浓缩后，气相色谱‑电子轰击离子源‑质谱（GC‑EI‑MS）检测，采用不含待测农药的空白基质溶液建立校正的标准工作曲线，外标法定量。本方法平均回收率为90.5%～94.7%，平均相对标准偏差（RSD）为5.9%～8.9%，检出限低于2.14 μg/kg，具有操作简便、快速、去杂效果好、灵敏度高、特征性强、重复性好、定性定量准确的优点。能满足美国、欧盟、日本等国家对相应产品安全检测的技术要求，为保障我国人民食品安全及对外出口贸易健康发展提供有力的技术支撑。

A method for the determination of GC-EI-MS residue in the determination of n

The invention discloses a benzene amine pyrazolone residue GC EI MS determination method, the main method for the determination method of residual grain, animal food and other food and agricultural products in the complex matrix of benzene amine pyrazolone content. Homogenized with acetonitrile or acetonitrile containing 1% acetic acid extraction of benzene amine pyrazolone remaining in the sample, purified and concentrated C18/PSA SPE column, gas chromatography electron ionization mass spectrometry (GC EI MS) detection, by excluding the measured blank matrix solution of pesticides to establish the calibration of the standard working curve, external standard method. The average recovery rate was 90.5% ~ 94.7%, the average relative standard deviation (RSD) ranged from 5.9% to 8.9%, the detection limit of less than 2.14 mu g/kg, has the advantages of convenient operation, rapid, high sensitivity, good purification effect, strong characteristics, good repeatability, accurate qualitative and quantitative. To meet the United States, the European Union, Japan and other countries on the corresponding product safety testing technical requirements, in order to protect the people's food safety and the healthy development of foreign trade exports to provide strong technical support.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种胺苯吡唑酮残留量的GC-EI-MS测定方法，更具体地说是采用气相色谱-电子轰击离子源-质谱(GC-EI-MS)定性定量测定粮谷、猪肉、牛肉、羊肉、鸡肉等动物肌肉及制品等复杂基质的动植物源性食品中残留的胺苯吡唑酮含量的方法，属于农药残留量的测定

技术介绍
胺苯吡唑酮(Fenpyrazamine)是日本住友化学株式会社研究开发的基于吡啶的杂环类杀真菌剂，通过抑制麦角甾醇生物合成途径的作用机制的病原体，显示出对菌丝生长和孢子萌发和花粉管生长的抑制作用。CAS号为：473798-59-3，分子式为C17H21N3O2S，分子量为331.43，胺苯吡唑酮的化学结构式如下：胺苯吡菌酮是住友化学独立开发的新杀菌剂，具有新颖化学结构，能迅速渗入作物体内，对感染的真菌能快速发挥药效，主要用于控制葡萄、石果、蔬菜作物中的灰霉病、菌核病和链核盘菌。另外，胺苯吡菌酮对哺乳类动物高度安全，在环境中能迅速降解，可在多种作物采收前应用。胺苯吡菌酮最初在韩国推出，在胺苯吡菌酮原药获得第一个全球登记后，住友化学又在韩国推出其含胺苯吡菌酮原药的杀菌剂新品，并以Botrycide商标名进行销售，该产品为30％的悬浮剂型，用于水果和蔬菜作物。2009年，住友化学于申请欧盟登记用于温室栽培的西红柿、茄子、辣椒和葫芦等蔬菜作物，还有葡萄的田间应用，但当时仅在波兰获得为期三年的临时登记，商品名为Prolectu。2012年6月，欧盟食品与动物健康常务委员会已投票通过了其登记申请，胺苯吡菌酮已经获得欧盟批准登记，将于2013年1月1日起正式列入欧盟农药1107/2009法规下的已登记有效成分名单，有效期为十年。胺苯吡菌酮在欧盟取得登记后，将用于葡萄和一些温室作物，如番茄、茄子、辣椒和葫芦等。胺苯吡菌酮对葡萄孢菌具有优异防控能力，住友化学将进一步于2012/13年度向意大利和智利市场推广该产品，其全球商品名为Prolectus。现已在美国和很多亚洲国家进行了登记，具有很广阔的应用前景。随着胺苯吡唑酮的登记、推广和使用，作为我国主要出口市场的欧盟、美国、加拿大等国家制定了其在蔬菜、水果、粮谷和畜产品等食品农产品中的最大允许残留量(MRL)，欧盟制定杀菌剂胺苯吡菌酮在多种作物上的最大残留限量标准。该标准已于2012年5月7日生效。胺苯吡菌酮在马铃薯、辣椒、茄子中的最大残留限量为3mg/kg；在葫芦、黄瓜、小黄瓜、绿皮南瓜中的最大残留限量为0.7mg/kg；在柑橘、葡萄柚、柠檬等水果及各种干果中的残留限量最为严格，为0.01mg/kg。美国规定胺苯吡唑酮在杏仁中的最大残留限量为0.02mg/kg；在杏仁外壳中的最大残留限量为1.5mg/kg；在开心果中的最大残留限量为0.02mg/kg；在莴苣头中的最大残留限量为1.5mg/kg；在莴苣叶中的最大残留限量为2mg/kg；在蔓越莓亚组13-07A中的最大残留限量为5mg/kg；在灌木浆果类亚组13-07B中的最大残留限量为5mg/kg；在小型蔓生水果13-07F亚组中(除猕猴桃外)的最大残留限量为3mg/kg；在葡萄汁中的最大残留限量为4mg/kg；在矮生浆果类亚组13-07G中的最大残留限量为3mg/kg；在人参中的最大残留限量为0.7mg/kg。加拿大规定胺苯吡唑酮在葡萄汁、生菜、莴苣、人参根、杏仁坚果、开心果中的MRL分别为4.0mg/kg、2.0mg/kg、1.5mg/kg、0.7mg/kg和0.02mg/kg；欧盟、日本等国家规定没有制定相应农药的残留限量标准时，出口至其国家的食品农产品包括畜禽肉等动物源性食品中残留限量均实行0.01mg/L的“一律标准”。现阶段，对胺苯吡唑酮残留量测定方法的研究较少，报道的检测方法主要为蔬菜和水果中胺苯吡唑酮残留检测方法，这些检测方法均采用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)测定蔬菜和水果中胺苯吡唑酮残留量的检测方法，使用LC-MS/MS测定食品农产品中农药残留具有快速、简便、灵敏度高等优点，但由于其价格较昂贵，很多检测机构、企业或科研院所未配置该仪器或配置台数较少，由于不同的化合物采用LC-MS/MS检测时，需使用不同的流动相或色谱柱，这样需要不断更换色谱柱、流动相并耗费比较长的时间对系统进行平衡，这一定程度上制约了LC-MS/MS的应用。配备电子轰击电离源的气相色谱质谱(GC-EI-MS)分析食品农产品中农药残留具有很大优势，由于电子轰击电离源质谱为通用性检测器，可实现几百种农药的多残留分析，可同时定性和定量，价格适中，因此现各种检测机构和企业均配备气相色谱-电子轰击离子源-质谱仪(GC-EI-MS)对食品农产品中的农药残留进行检测，但迄今为止未见食品农产品中胺苯吡唑酮残留量的GC-EI-MS检测方法的报道，胺苯吡唑酮属电负性化合物，由于粮谷、动物源性食品等食品农产品基质比较复杂，须建立净化效果良好的样品前处理方法和仪器分析条件才能满足检测要求，因此，建立气相色谱-电子轰击离子源-质谱(GC-EI-MS)定性和定量分析粮谷和动物源性食品中胺苯吡唑酮残留量的检测方法具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种胺苯吡唑酮残留量的GC-EI-MS测定方法，主要用于测定粮谷、动物源性食品等复杂基质食品农产品中胺苯吡唑酮残留量。为实现以上目的，本专利技术所采用的技术方案是：一种胺苯吡唑酮残留量的GC-EI-MS测定方法，包括如下步骤：(1)提取称取混匀样品于具塞离心管中，加入适量水复苏后，定量加入乙腈或含1％乙酸的乙腈溶液均质或振荡超声提取，然后加入氯化钠或乙酸钠中的一种和无水硫酸镁，剧烈涡旋1min后离心。(2)净化移取一定体积样品提取液，浓缩至1mL左右，经C18/PSA固相萃取柱净化，乙腈洗脱，收集洗脱液，浓缩至干后，用体积比为1/1的丙酮/正己烷混合溶剂溶解定容，过膜后，待气相色谱-电子轰击离子源-质谱(GC-EI-MS)检测。(3)标准工作溶液的配制将不含胺苯吡唑酮的同种类基质空白样品按上述步骤(1)、(2)处理时，得样品提取净化残渣，加入适量溶剂和标准溶液，涡旋混匀，配制成至少3个浓度的胺苯吡唑酮系列标准工作液。(4)气相色谱-电子轰击离子源-质谱法(GC-EI-MS)测定将步骤(3)中的各浓度梯度的标准工作液进行GC-EI-MS测定，以标准工作液的色谱峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到标准工作曲线；在相同条件下将步骤(2)中净化后的样品液注入GC-EI-MS进行测定，测本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种胺苯吡唑酮残留量的GC‑EI‑MS测定方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)提取称取混匀样品于具塞离心管中，加适量水后，加入乙腈或含1％乙酸的乙腈溶液均质或振荡超声提取后，加入氯化钠或乙酸钠中的一种和无水硫酸镁，剧烈涡旋1min后离心；(2)净化移取一定体积样品提取液，浓缩至1mL左右，经C18/PSA固相萃取柱净化，乙腈洗脱，收集洗脱液，浓缩至干后，用体积比为1/1的丙酮/正己烷混合溶剂溶解定容，过膜后，待气相色谱‑电子轰击离子源‑质谱(GC‑EI‑MS)检测；(3)标准工作溶液的配制将不含胺苯吡唑酮的同种类基质空白样品按上述步骤(1)、(2)处理，得样品提取净化残渣，加入适量溶剂和标准溶液，涡旋混匀，配制成至少3个浓度的胺苯吡唑酮系列标准工作液；(4)测定和结果计算将步骤(3)中的各浓度梯度的标准工作液进行GC‑EI‑MS测定，以标准工作液的色谱峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到基质标准工作曲线；在相同条件下将步骤(2)中净化后的样品液注入GC‑EI‑MS进行测定，测得样品液中胺苯吡唑酮的色谱峰面积，代入基质标准工作曲线，得到样品液中胺苯吡唑酮含量，然后根据样品液所代表试样的质量计算得到样品中胺苯吡唑酮残留量；若上机溶液中胺苯吡唑酮残留量超过线性范围上限，需用定容溶剂将上机溶液浓度稀释至线性范围之内。...

【技术特征摘要】
1.一种胺苯吡唑酮残留量的GC-EI-MS测定方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
(1)提取
称取混匀样品于具塞离心管中，加适量水后，加入乙腈或含1％乙酸的乙腈溶液均质或振
荡超声提取后，加入氯化钠或乙酸钠中的一种和无水硫酸镁，剧烈涡旋1min后离心；
(2)净化
移取一定体积样品提取液，浓缩至1mL左右，经C18/PSA固相萃取柱净化，乙腈洗脱，收
集洗脱液，浓缩至干后，用体积比为1/1的丙酮/正己烷混合溶剂溶解定容，过膜后，待气相色
谱-电子轰击离子源-质谱(GC-EI-MS)检测；
(3)标准工作溶液的配制
将不含胺苯吡唑酮的同种类基质空白样品按上述步骤(1)、(2)处理，得样品提取净
化残渣，加入适量溶剂和标准溶液，涡旋混匀，配制成至少3个浓度的胺苯吡唑酮系列标准工
作液；
(4)测定和结果计算
将步骤(3)中的各浓度梯度的标准工作液进行GC-EI-MS测定，以标准工作液的色谱峰
面积对其相应浓度进行回归分析，得到基质标准工作曲线；在相同条件下将步骤(2)中净化
后的样品液注入GC-EI-MS进行测定，测得样品液中胺苯吡唑酮的色谱峰面积，代入基质标准
工作曲线，得到样品液中胺苯吡唑酮含量，然后根据样品液所代表试样的质量计算得到样品
中胺苯吡唑酮残留量；若上机溶液中胺苯吡唑酮残留量超过线性范围上限，需用定容溶剂将
上机溶液浓度稀释至线性范围...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭庆龙，
申请(专利权)人：郭庆龙，
类型：发明
国别省市：山东;37