一种蛋黄特异性IgY及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种蛋黄特异性IgY及其制备方法和应用，包括以下步骤：制备单表位多聚抗原肽；用单表位多聚抗原肽对产蛋禽类进行免疫注射，获取免疫禽蛋；提取免疫禽蛋中蛋黄特异性IgY，获取蛋黄特异性IgY的粗提物；制备免疫磁珠；抗体纯化，获取蛋黄特异性IgY。本发明专利技术的有益效果是获得的蛋黄特异性IgY特异性更强，更具有亲和力，免疫效果更佳，获取的蛋黄特异性IgY可用于制备细菌感染制剂、抗病毒感染制剂以及肿瘤辅助治疗制剂，不仅可以用于预防和辅助治疗细菌感染、病毒感染以及肿瘤，还可以可用于心脑血管疾病的预防与治疗。

Egg yolk specific IgY and its preparation method and Application

The invention relates to a specific egg yolk IgY and preparation method and application thereof, which comprises the following steps: preparing a single epitope of multiple antigenic peptides; single epitope multiple antigenic peptides for immunization on egg laying poultry, egg yolk extraction to obtain immune; immune egg specific IgY for egg yolk specific IgY the crude extract preparation; immunomagnetic beads; yolk antibody purification, obtaining specific IgY. The beneficial effect of the invention is to obtain the egg yolk specific IgY stronger, more friendly and better immune effect, IgY egg yolk specific access can be used for the preparation of bacterial infection, viral infection and tumor preparations preparation auxiliary treatment agents, not only can be used for the prevention and adjuvant treatment of bacterial infection, viral infection and tumor, also can can be used for the prevention and treatment of cardiovascular and cerebrovascular diseases.

【技术实现步骤摘要】
一种蛋黄特异性IgY及其制备方法和应用
本专利技术涉及生物制药
，尤其涉及一种蛋黄特异性IgY及其制备方法和应用。
技术介绍
鸡卵黄免疫球蛋白(Immunoglobμlinofeggyolk，简称IgY)。IgY又称鸡卵黄抗体，是母鸡血液中的免疫球蛋白传递至鸡卵黄并在子鸡孵育过程中和孵育后对子鸡起保护作用的免疫球蛋白，是卵黄中唯一的免疫球蛋白。正常鸡的IgY分子量约为180KD，由两条重链和两条轻链组成。IgY具有良好的稳定性和耐高渗性，耐热、耐酸、耐碱较好。卵黄抗体与哺乳动物抗体具有较多的相似性，在抗原制备环节、免疫流程环节、抗体提纯环节均存在较多的相似性。但是，禽类(包含鸡，鸭，鹅，鹌鹑等)在系统发育上与哺乳动物也有很大区别，其免疫球蛋白和哺乳动物免疫球蛋白在免疫学特性上有很大不同，禽类的免疫系统可以识别更多的免疫反应位点和更多的抗原决定簇，禽类的免疫系统对哺乳动物的蛋白或者生物分子能产生具有更高效价和亲和力的特异性抗体，其抗体效果更为明显。因其产生的这种特异性抗体主要储存在蛋黄中，因此，可以把禽类作为免疫反应器来生产特异性IgY。多聚抗原肽(multipleantigen本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种蛋黄特异性IgY的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：(1)制备单表位多聚抗原肽；(2)用所述单表位多聚抗原肽对产蛋禽类进行免疫注射，获取免疫禽蛋；(3)提取所述免疫禽蛋中的蛋黄特异性IgY，获取所述蛋黄特异性IgY的粗提物；(4)制备免疫磁珠；(5)抗体纯化，获取蛋黄特异性IgY。

【技术特征摘要】
1.一种蛋黄特异性IgY的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：(1)制备单表位多聚抗原肽；(2)用所述单表位多聚抗原肽对产蛋禽类进行免疫注射，获取免疫禽蛋；(3)提取所述免疫禽蛋中的蛋黄特异性IgY，获取所述蛋黄特异性IgY的粗提物；(4)制备免疫磁珠；(5)抗体纯化，获取蛋黄特异性IgY。2.根据权利要求1所述的一种蛋黄特异性IgY的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中采用Fmoc固相合成法制备单表位多聚抗原肽。3.根据权利要求1所述的一种蛋黄特异性IgY的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)产蛋禽类免疫注射的步骤如下：A1：稀释所述单表位多聚抗原肽，加入弗氏完全佐剂，混匀乳化，获得油包水乳浊液；A2：用所述油包水乳浊液对所述产蛋禽类进行注射免疫，收集第三次加强免疫20天后的禽蛋。4.根据权利要求1所述的一种蛋黄特异性IgY的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中获取所述蛋黄特异性IgY粗提物的方法步骤如下：B1：取所述免疫禽蛋的蛋黄，加入5-15倍的蒸馏水稀释并混匀，调节pH至5.5-6.0，于2-6℃下静置24小时，获得稀释液S1；B2：取所述稀释液S1，在10000r/min下离心20min，取上清液，过滤浓缩至15倍，然后加入两倍体积0.1mol/L的醋酸缓冲液充分混合均匀，获得稀释液S2；B3：向所述稀释液S2中加入辛酸，加入辛酸的量为所述稀释液S2总体积的3％，摇匀静置60min，4000r/min离心20min，取上清液，即为蛋黄特异性IgY粗提液。5.根据权利要求1所述的一种蛋黄特异性IgY的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中免疫磁珠的制备步骤如下：C1：用磁珠包被缓冲液洗涤所述磁珠3次；C2：稀释所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：闫小君，罗进，
申请(专利权)人：美国安泰健康投资管理公司，
类型：发明
国别省市：美国,US