一种从鸡蛋黄中联合提取IgY、卵黄高磷蛋白、卵磷脂、蛋黄油及脱脂蛋黄粉的方法技术

本发明专利技术公开了一种从鸡蛋黄中联合提取IgY、卵黄高磷蛋白、卵磷脂、蛋黄油及脱脂蛋黄粉的方法。首先将蛋黄液用水稀释并离心，获取的上清液采取盐析、聚乙二醇沉淀提取IgY；下层为蛋黄浆质，先采用乙醇脱除蛋黄浆质水分，接着利用乙醇和乙酸乙酯混合溶剂萃取蛋黄总脂质，然后利用乙酸乙酯处理可获得卵磷脂和蛋黄油两种产品；最后利用氯化钠溶液处理脱除脂质后的蛋白可获得卵黄高磷蛋白。本发明专利技术工艺操作简便、环保无毒，生产成本低，且产品纯度，产率较高，为蛋黄综合利用提供了技术保障。

A method of extracting IgY, egg yolk protein, lecithin, egg yolk oil and defatted yolk powder from egg yolk

The invention discloses a method for extracting IgY, egg yolk phosphoprotein, lecithin, egg yolk oil and defatted egg yolk powder from egg yolk. The egg yolk liquid water dilution and centrifugation, the supernatant obtained by salting out extraction, PEG precipitation IgY; lower egg yolk paste quality, first use of ethanol was egg yolk paste quality water, then using ethanol and ethyl acetate mixed solvent extraction of yolk total lipid, then using ethyl acetate treatment can obtain lecithin and yolk oil two kinds of products; finally, the use of Sodium Chloride Solution after removal of lipid treatment can obtain protein phosvitin. The process has the advantages of simple operation, environmental protection, non-toxic, low production cost, high purity and high yield, thus providing technical support for the comprehensive utilization of egg yolk.

【技术实现步骤摘要】
一种从鸡蛋黄中联合提取IgY、卵黄高磷蛋白、卵磷脂、蛋黄油及脱脂蛋黄粉的方法
本专利技术属于蛋品深加工领域，具体是一种从鸡蛋黄中联合提取IgY、卵黄高磷蛋白、卵磷脂、蛋黄油及脱脂蛋黄粉的方法。
技术介绍
鸡蛋蛋黄是鸡蛋中营养价值最为丰富的一部分，蛋白含量不仅高，且其氨基酸组成与人体蛋白极为相似，是仅次于牛乳的优质全价蛋白质，其生物效价高达96％；其次，富集在蛋黄中的脂类，不仅含有丰富的不饱和脂肪酸，以及适宜的亚油酸含量，同时含有人类在脑和神经系统所不可缺少的磷脂成分，因此，鸡蛋蛋黄中的蛋白质和脂质等生物活性成分的开发一直是国内外学者的研究热点。由于蛋黄组成成分复杂，很难做到物尽其用。目前研究主要集中在蛋黄中单一生物活性成分的分离提取方面，很少对蛋黄的综合利用进行研究。现有国内蛋黄功能性成分分离制备主要集中在一种或两种，尤其在提取蛋黄油脂成分时使用了大量有毒的有机溶剂，纯度较低，污染大，而本专利技术采用食品上允许使用的试剂提取目标产物，大大降低食品的安全隐患，同时实现卵黄免疫球蛋白、蛋黄油、卵磷脂、卵黄高磷蛋白以及脱脂蛋黄粉多种蛋黄生物活性成分的联产，建立了一套提取效率高、纯度高、可操作性强以及高值化、全利用的蛋品深加工生产工艺，为蛋黄综合利用提供技术支持。
技术实现思路
本专利技术的目的是实现蛋黄多种功能性成分的联产，建立了一套提取效率高、纯度高、操作简单以及高值化、全利用的蛋品深加工生产工艺。本专利技术的方法包括以下步骤：(1)IgY的提取：将新鲜蛋黄液与水按体积比1∶1-12稀释并调节pH为4-7，搅拌均匀后放入冰箱中静置过夜，离心获取上清液A，下层为蛋黄浆质(主要含高密度脂蛋白、低密度脂蛋白以及水分)，随后向上清液A中加入硫酸铵和氯化钠，使IgY盐析并沉淀，接着将离心获取的粗IgY沉淀用蒸馏水溶解，并透析除盐后获得粗IgY水溶液，然后向粗IgY水溶液中加入PEG6000使其重量浓度达到2-10％，并调节pH为3-8，放入冰箱静置后离心获取纯化后的IgY沉淀，最后将纯化后的IgY沉淀用蒸馏水再次溶解，并透析除去PEG6000后获取纯化后的IgY水溶液，冻干后即得IgY固体；(2)蛋黄总脂质的提取：向步骤(1)获得的蛋黄浆质加入无水乙醇，充分搅拌后进行离心，得到上清液B(含有水、乙醇、水溶性蛋白质以及部分蛋黄脂质)和沉淀A(主要为低密度脂蛋白和高密度脂蛋白)，将上清液B放入-20℃冰箱过夜结晶析出沉淀B，沉淀B主要为蛋黄脂质2以及水溶性蛋白，通过温水熔化凝固的脂质蛋黄2，使其成为油状液体，再通过离心可将蛋黄脂质2与水溶性蛋白质分开，其中脂质在上层，蛋白质在下层；小心倒出上清液C(主要为乙醇、水和一部分低温未结晶析出的蛋黄脂质1)并旋蒸除去乙醇，然后通过分液即可获得蛋黄脂质1；向获得的沉淀A中加入乙醇-乙酸乙酯混合溶剂进行萃取，过滤获取滤液1和滤渣1，将滤液1旋蒸脱除溶剂获得蛋黄脂质3，混合蛋黄脂质1、2、3进行真空干燥即得蛋黄总脂质；(3)卵磷脂的提取：向步骤(2)获得的蛋黄总脂质加入乙酸乙酯并在低温条件下结晶后，离心获取沉淀并进行真空干燥即为膏状的卵磷脂；(4)蛋黄油的提取：将步骤(3)离心获得的上清液D旋蒸脱除溶剂后真空干燥即为蛋黄油；(5)卵黄高磷蛋白和脱脂蛋黄粉的提取：将步骤(2)获得的滤渣1自然风干，加入重量浓度为10-20％的氯化钠溶液，磁力搅拌0.5-2h，使水溶性的卵黄高磷蛋白充分溶解，然后在50-100℃高温下保温10-30min使其它水溶性杂蛋白变性沉淀，最后过滤获取滤液2和滤渣2，滤液2透析除盐后冻干即得卵黄高磷蛋白，滤渣2自然风干后即为脱脂蛋黄粉。优选地，步骤(1)中，所述硫酸铵和氯化钠在上清液A中的终浓度分别为20-35％和0.1-1％，均为重量浓度。优选地，步骤(2)中，所述乙醇-乙酸乙酯混合溶剂中，乙醇与乙酸乙酯的体积比1∶1-6。本专利技术的有益效果是：(1)本专利技术对设备要求不高，操作简便，运行成本低，提取率高，不会造成有毒溶剂残留，可进行工业化生产。(2)本专利技术在提取蛋黄油和蛋黄卵磷脂时，条件比较温和，温度均控制在50℃以下，避免了蛋黄油和卵磷脂的氧化，最大程度保证了二者的功能活性。(3)本专利技术同时获得了卵黄免疫球蛋白、卵黄高磷蛋白、卵磷脂、蛋黄油及脱脂蛋黄粉5种产品，实现了蛋黄的高值化全利用。(4)使用乙醇-乙酸乙酯混合溶剂提取比乙醇单一溶剂提取效果更好，提油率更高。(5)本专利技术使用无水乙醇脱除蛋黄浆质中的水分，而非采用冻干、烘干等方法，既节能，又简化了步骤，而且为后续提取水溶性卵黄高磷蛋白提供良好条件，使卵黄高磷蛋白产量大大增加，同时获取的蛋黄总脂质含有较少的水溶性蛋白，具有良好的流动性。附图说明图1是本专利技术的工艺流程图。具体实施方式为了更好地说明本专利技术，以下通过实施例对本专利技术进行详细地说明。实施例1(1)取500ml蛋黄原液，加入9倍体积蒸馏水稀释，调pH＝5.5，搅拌均匀后4℃冰箱中静置过夜，取出后以10000rpm转速离心15min，获取上清液A和蛋黄浆质；随后向上清液A加入硫酸铵和氯化钠沉淀IgY，使二者的终重量浓度分别达到28％和0.5％，接着将离心获取的沉淀用蒸馏水完全溶解，并透析除盐后获取粗IgY水溶液，然后向粗IgY水溶液中加入PEG6000并调节pH＝5.0，PEG6000的终重量浓度为8％，放入冰箱1h后离心获取纯化后的IgY沉淀，最后将纯化后的IgY沉淀加蒸馏水再次溶解，并透析除去PEG6000获取纯化后的IgY水溶液，经冻干可获得IgY成品；(2)向步骤(1)中的蛋黄浆质中加入400ml无水乙醇，10000rpm转速搅拌10min，离心获取沉淀A和上清液B，然后将上清液B放入-20℃冰箱静置过夜后倒出上清液C和沉淀B，上清液C在45℃温度下旋蒸除去乙醇，并通过分液获取蛋黄脂质1，真空干燥(称重0.52g)；沉淀B通过30℃温水熔化凝固的蛋黄脂质2并离心，获取蛋黄脂质2并真空干燥(称重14.01g)；(3)向沉淀A中加入无水乙醇1335ml、乙酸乙酯2670ml，40℃磁力搅拌90min，真空抽滤，滤液1在45℃旋蒸后真空干燥，获取蛋黄脂质3(称重148.03g)；滤渣1自然风干后加入805ml10％的NaCl2溶液，4℃磁力搅拌1h，90℃水浴20min，抽滤获取滤液2，透析24h冻干获取卵黄高磷蛋白；滤渣2自然风干即为脱脂蛋黄粉；(4)混合蛋黄脂质1,2,3，加入960ml乙酸乙酯，于0℃静置结晶2h后抽滤，获取沉淀进行真空干燥，得到精制卵磷脂；上清液D45℃旋蒸，真空干燥后得蛋黄油。各产品产量及纯度如下表：产品IgY卵黄高磷蛋白卵磷脂蛋黄油脱脂蛋黄粉产量/g3.27505.250553.8107.542.18纯度/％99.3880.1388.7实施例2(1)取500ml蛋黄原液，加入3倍体积蒸馏水稀释，调pH＝4，搅拌均匀后4℃冰箱中静置过夜，转速10000rpm，离心15min，获取上清液A和蛋黄浆质；随后向上清液A加入硫酸铵和氯化钠沉淀IgY，使其终浓度分别达到20％和1％，接着将离心获取的沉淀用蒸馏水完全溶解，并透析除盐后获取粗IgY水溶液，然后向粗IgY水溶液中加入PEG6000并调节pH＝7.0，PEG6000终浓度为4％，放入冰箱1本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从鸡蛋黄中联合提取IgY、卵黄高磷蛋白、卵磷脂、蛋黄油及脱脂蛋黄粉的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)IgY的提取：将新鲜蛋黄液与水按体积比1∶1‑12稀释并调节pH为4‑7，搅拌均匀后放入冰箱中静置过夜，离心获取上清液A，下层为蛋黄浆质，随后向上清液A中加入硫酸铵和氯化钠，使IgY盐析并沉淀，接着将离心获取的粗IgY沉淀用蒸馏水溶解，并透析除盐后获得粗IgY水溶液，然后向粗IgY水溶液中加入PEG6000使其重量浓度达到2‑10％，并调节pH为3‑8，放入冰箱静置后离心获取纯化后的IgY沉淀，最后将纯化后的IgY沉淀用蒸馏水再次溶解，并透析除去PEG6000后获取纯化后的IgY水溶液，冻干后即得IgY固体；(2)蛋黄总脂质的提取：向步骤(1)获得的蛋黄浆质加入无水乙醇，充分搅拌后进行离心，得到上清液B和沉淀A，将上清液B放入‑20℃冰箱过夜结晶析出沉淀B，沉淀B主要为蛋黄脂质2以及水溶性蛋白，通过温水熔化凝固的蛋黄脂质2，使其成为油状液体，再通过离心可将蛋黄脂质2与水溶性蛋白质分开；倒出上清液C并旋蒸除去乙醇，然后通过分液即可获得蛋黄脂质1；向获得的沉淀A中加入乙醇‑乙酸乙酯混合溶剂进行萃取，过滤获取滤液1和滤渣1，滤液1旋蒸脱除溶剂获得蛋黄脂质3，混合蛋黄脂质1、2、3进行真空干燥即得蛋黄总脂质；(3)卵磷脂的提取：向步骤(2)获得的蛋黄总脂质加入乙酸乙酯并在低温条件下结晶后，离心获取沉淀并进行真空干燥即为膏状的卵磷脂；(4)蛋黄油的提取：将步骤(3)离心获得的上清液D旋蒸脱除溶剂后真空干燥即为蛋黄油；(5)卵黄高磷蛋白和脱脂蛋黄粉的提取：将步骤(2)获得的滤渣1自然风干，加入重量浓度为10‑20％的氯化钠溶液，磁力搅拌0.5‑2h，使水溶性的卵黄高磷蛋白充分溶解，然后在50‑100℃高温下保温10‑30min使其它水溶性杂蛋白变性沉淀，最后过滤获取滤液2和滤渣2，滤液2透析除盐后冻干即得卵黄高磷蛋白，滤渣2自然风干后即为脱脂蛋黄粉。...

【技术特征摘要】
1.一种从鸡蛋黄中联合提取IgY、卵黄高磷蛋白、卵磷脂、蛋黄油及脱脂蛋黄粉的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)IgY的提取：将新鲜蛋黄液与水按体积比1∶1-12稀释并调节pH为4-7，搅拌均匀后放入冰箱中静置过夜，离心获取上清液A，下层为蛋黄浆质，随后向上清液A中加入硫酸铵和氯化钠，使IgY盐析并沉淀，接着将离心获取的粗IgY沉淀用蒸馏水溶解，并透析除盐后获得粗IgY水溶液，然后向粗IgY水溶液中加入PEG6000使其重量浓度达到2-10％，并调节pH为3-8，放入冰箱静置后离心获取纯化后的IgY沉淀，最后将纯化后的IgY沉淀用蒸馏水再次溶解，并透析除去PEG6000后获取纯化后的IgY水溶液，冻干后即得IgY固体；(2)蛋黄总脂质的提取：向步骤(1)获得的蛋黄浆质加入无水乙醇，充分搅拌后进行离心，得到上清液B和沉淀A，将上清液B放入-20℃冰箱过夜结晶析出沉淀B，沉淀B主要为蛋黄脂质2以及水溶性蛋白，通过温水熔化凝固的蛋黄脂质2，使其成为油状液体，再通过离心可将蛋黄脂质2与水溶性蛋白质分开；倒出上清液C并旋蒸除去乙醇，然后通过分液即可获得蛋黄脂质1；向获得的沉淀A中加入乙醇-乙酸乙酯混合溶剂进行萃取，过滤获取滤液...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡朝霞，罗进旭，刘巧，唐世涛，付星，马美湖，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：湖北,42