The invention belongs to the technical field of biotechnology, in particular to a method for purifying hen egg yolk antibody. Chicken egg yolk antibody and the purification methods of elastin like peptides (ELP) and Streptococcus G (SPG) C2 protein domain fusion protein combined with crude egg yolk antibody, combined with the complex phase change cycle of precipitation; then the elution of yolk antibody, ELP removal C2 fusion protein with phase change cycle. Compared with the prior purification method of the yolk antibody, the chicken yolk antibody purification method of the invention has the advantages of simple, fast and high purification efficiency.
【技术实现步骤摘要】
一种鸡卵黄抗体的纯化方法
本专利技术属于生物
，具体涉及一种鸡卵黄抗体的纯化方法。
技术介绍
卵黄抗体(eggyolkimmunoglobulin,IgY)是母鸡产生的主要免疫球蛋白，存在于血清和卵黄中。与哺乳动物IgG相比，使用卵黄抗体具有独特的优势，包括小剂量抗原免疫鸡可产生高滴度抗体，收集鸡蛋进行抗体分离纯化十分方便，鸡对哺乳动物保守蛋白能产生更好的抗体应答，卵黄抗体具有良好的热稳定性和pH耐受性。因此，卵黄抗体在疾病防治、诊断试剂等研究领域越来越受到重视和青睐。然而，卵黄抗体的实际应用受到纯化方法的制约，主要原因是卵黄含大量难以去除的脂质成分。传统的卵黄抗体纯化方法有硫酸铵沉淀法、聚乙二醇沉淀法、水稀释与超滤法、凝胶过滤法和层析法等，这些方法不仅步骤复杂、耗时，而且纯化的卵黄抗体纯度和产量均较低。链球菌G蛋白(SPG)是一种免疫球蛋白结合蛋白，可用于哺乳动物IgG的纯化，但不能用于禽卵黄抗体的纯化。最近的研究资料显示，SPG免疫球蛋白结合区氨基酸替换可以改变其抗体亲和性，从而能与鸡卵黄抗体结合。类弹性蛋白多肽(elastin-likepolypept...
【技术保护点】
一种鸡卵黄抗体的纯化方法，其特征在于：用类弹性蛋白多肽(ELP)与链球菌G蛋白(SPG)C2结构域融合蛋白与粗制卵黄抗体结合，用相变循环沉淀结合复合物；然后洗脱卵黄抗体，用相变循环去除ELP‑C2融合蛋白。
【技术特征摘要】
1.一种鸡卵黄抗体的纯化方法，其特征在于：用类弹性蛋白多肽(ELP)与链球菌G蛋白(SPG)C2结构域融合蛋白与粗制卵黄抗体结合，用相变循环沉淀结合复合物；然后洗脱卵黄抗体，用相变循环去除ELP-C2融合蛋白。2.根据权利要求1所述的鸡卵黄抗体的纯化方法，其特征在于，所述类弹性蛋白多肽与链球菌G蛋白C2结构域融合蛋白通过下列方法制备：(1)将SPGC2结构域编码序列优化成大肠杆菌密码子序列，将合成序列插入ELP融合表达载体，获得重组载体pELP-C2；(2)将重组载体转化大肠杆菌，诱导ELP-C2融合蛋白表达；(3...
【专利技术属性】
技术研发人员：孙怀昌，夏文龙，刘晓明，张鑫宇，夏晓莉，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32
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