一种蛋黄抗体的提纯灭活方法技术

本发明专利技术公开了一种蛋黄抗体的提纯灭活方法，属于生物制品技术领域。该方法包括：1)在蛋黄中加入缓冲液和聚乙二醇，使聚乙二醇的终浓度为10％～15％，混匀后离心，取沉淀；2)在沉淀中加入缓冲液和酸化水，使体系pH值为4.2～5.0，混匀后静置，取上清液；3)在上清液中加入正辛酸，使其终浓度为0.1％～0.3％，混匀后静置，取上清液；4)上清液过滤除菌，再超滤浓缩，得浓缩液；5)浓缩液采用亲硫性混合模式吸附技术纯化，得到提纯的蛋黄抗体。该制备工艺简单、操作方便，产品收率高、纯度好，保存期长，使用安全可靠、无残留，制备成本低，适于工业化生产及应用。

Purification and inactivation method of yolk antibody

The invention discloses a method for purifying and inactivating yolk antibody, belonging to the technical field of biological products. The method comprises the following steps: 1) adding buffer and polyethylene glycol in egg yolk, and the final concentration of polyethylene glycol is 10% ~ 15%, mixed and centrifuged, and precipitation; 2) adding buffer and acidified water in precipitation, the pH value is 4.2 ~ 5, and mixed static, the supernatant was 3; join) octanoic acid in the supernatant, the final concentration of 0.1% to 0.3%, after mixing static, supernatant; 4) supernatant filtration, then ultrafiltration, concentrated solution; 5) concentrate using thiophilic mixed mode adsorption purification technology, purification of egg yolk antibody. The preparation process is simple, the operation is convenient, the product has the advantages of high yield, good purity, long storage life, safe and reliable use, no residue, low preparation cost, and is suitable for industrial production and application.

【技术实现步骤摘要】
一种蛋黄抗体的提纯灭活方法
本专利技术涉及一种蛋黄抗体的提纯灭活方法，属于生物制品

技术介绍
蛋黄抗体是指蛋黄中的免疫球蛋白(IgY)。母鸡在细胞分裂产蛋过程中会将血液中的免疫球蛋白转移至鸡蛋，如血液中的IgA、IgM会在输卵管中与其他蛋白质结合构成鸡蛋的蛋白部分，IgG会经蛋黄薄膜转移至蛋黄内部。由于蛋黄的IgG与哺乳类的IgG在相对分子质量、等电点、细胞膜上Fc受质的键结构上存在着相异点，因而被特定称为IgY。IgY是一种7S免疫球蛋白，其相对分子质量约为180kD，含两个亚单位，即67～70kD的重链和22～30kD的轻链。鸡蛋黄中IgY的纯度高，含量大，具有较强的耐热、耐酸性和特异性，化学性质稳定，产量高，成本低，并且具有动物种系发生学距离的优势，更适于生产特异性抗体。目前，IgY常作为免疫学诊断工具，用于测定类风湿因子、补体和血液循环中的免疫复合物，以减少假阳性反应，同时还可用于IgG亚类和病毒的检测，此外还能作为免疫预防和治疗剂。蛋黄中蛋白质与脂肪的比例约为1:2，其中大部分蛋白是脂蛋白，存在于蛋黄颗粒中，不溶于水，只有α、β、γ免疫球蛋白是水溶性蛋白。而IgY本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种蛋黄抗体的提纯灭活方法，其特征在于：包括以下步骤：1)在蛋黄中加入缓冲液和聚乙二醇，使聚乙二醇的终浓度为10％～15％，混匀后离心，取沉淀；2)在沉淀中加入缓冲液和酸化水，使体系pH值为4.2～5.0，混匀后静置，取上清液；3)在上清液中加入正辛酸，使其终浓度为0.1％～0.3％，混匀后静置，取上清液；4)上清液过滤除菌，再超滤浓缩，得浓缩液；5)浓缩液采用亲硫性混合模式吸附技术纯化，得到提纯的蛋黄抗体。

【技术特征摘要】
1.一种蛋黄抗体的提纯灭活方法，其特征在于：包括以下步骤：1)在蛋黄中加入缓冲液和聚乙二醇，使聚乙二醇的终浓度为10％～15％，混匀后离心，取沉淀；2)在沉淀中加入缓冲液和酸化水，使体系pH值为4.2～5.0，混匀后静置，取上清液；3)在上清液中加入正辛酸，使其终浓度为0.1％～0.3％，混匀后静置，取上清液；4)上清液过滤除菌，再超滤浓缩，得浓缩液；5)浓缩液采用亲硫性混合模式吸附技术纯化，得到提纯的蛋黄抗体。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤1)中缓冲液为浓度0.01mol/L、pH7.2的PBS缓冲液，其加量为蛋黄体积的2.5～3.5倍。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤1)中聚乙二醇的相对分子量为4000～8000。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤2)中缓冲液为浓度0.01mol/L、pH7.2的PBS缓冲液，其加量为将沉淀还原至原蛋黄体积。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：步骤2)中酸化水的温度为1～4℃，其加量为蛋黄...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙林杰，徐进，李厚伟，
申请(专利权)人：河南后羿生物工程股份有限公司，
类型：发明
国别省市：河南,41