一种4′,7–二乙基射干苷元的纯化方法及制备方法技术

本发明专利技术公开了一种4′,7–二乙基射干苷元的纯化方法，它包括以下步骤：(1)将4′,7–二乙基射干苷元加热溶解在溶剂中，过滤，取滤液；(2)向滤液中加入抗溶剂无水乙醇，冷却析晶，过滤；(3)取过滤后的固体，采用步骤(1)中相同的溶剂重结晶；(4)分离出晶体，干燥即得。本发明专利技术还提供了一种制备4′,7–二乙基射干苷元的方法，它包括以下步骤：(A)以射干苷元为原料，加入NaOH和乙基化试剂反应后得反应液；(B)加酸，调整反应液的pH值至pH＝1～2，加水，过滤，纯化得4′,7–二乙基射干苷元。本发明专利技术的纯化方法和制备方法，通过工艺的筛选，可以简便有效地制备得到高纯度的4′,7–二乙基射干苷元。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及药物领域，具体涉及一种4′,7–二乙基射干苷元的纯化方法及制备方法。
技术介绍
柯萨奇病毒(Coxsachievirus)是一种肠道病毒，分为A型和B型两种，病毒进入人体于咽部和肠粘膜细胞内繁殖后，可侵入血液形成病毒血症，再散布至中枢神经系统、呼吸道、心脏、肌肉、皮肤等处，可引起无菌性脑膜炎、出疹性发热病、急性心肌炎和心包炎、流行性肌痛、上感、疤疹性咽喉炎及婴儿腹泻等。目前，临床尚无能有效治疗柯萨奇病毒的药物，常用病毒唑等抗病毒药物以及干扰素、营养性制剂、中药黄芪参麦注射液等对症保守治疗。专利CN101723926A公开了4′,7–二乙基射干苷元的制备方法及抗柯萨奇病毒作用，其效果优于利巴韦林。但是，其制备方法中，样品未有溶解、过滤、析晶这一过程，只是用95％乙醇反复洗脱除去杂质，且采用测定方法为面积归一法，其含量不是真实的含量，其产品真实收率和纯度并不高，HPLC外标法含量测定为97.23％，炽灼残渣1.2％。因此，为了改善产品收率，并且得到更高纯度的产品作为对照品进而控制其质量，目前亟需一种4′,7–二乙基射干苷元的纯化方法及制备方法。
技术实现思路
为解决上述问题，本专利技术提供了一种4′,7–二乙基射干苷元的纯化方法，它包括以下步骤：(1)将4′,7–二乙基射干苷元加热溶解在溶剂中，过滤，取滤液；所述溶剂选自二甲基乙酰胺或氯仿；(2)向滤液中加入抗溶剂无水乙醇，冷却析晶，过滤；(3)取过滤后的固体，采用步骤(1)中相同的溶剂重结晶；(4)分离出晶体，干燥即得。进一步地，所述溶剂与4′,7–二乙基射干苷元的体积重量比为5～10mL：1g。进一步地，所述溶剂选自二甲基乙酰胺，二甲基乙酰胺与4′,7–二乙基射干苷元的体积重量比为10mL：1g，无水乙醇与4′,7–二乙基射干苷元的体积重量比为5mL：1g。进一步地，所述溶剂选自氯仿，氯仿与4′,7–二乙基射干苷元的体积重量比为5mL：1g，无水乙醇与4′,7–二乙基射干苷元的体积重量比为10mL：1g。本专利技术的纯化方法，通过工艺的筛选，尤其是加入抗溶剂无水乙醇这种析晶方式的特定选择，可以简便有效地制备得到高纯度的4′,7–二乙基射干苷元，可以作为对照品，为有效控制药品的质量提供了可靠的保障。本专利技术还提供了一种制备4′,7–二乙基射干苷元的方法，它包括以下步骤：(A)以射干苷元为原料，加入NaOH和乙基化试剂反应后得反应液；(B)加酸，调整反应液的pH值至pH＝1～2，加水，过滤，纯化得4′,7–二乙基射干苷元。进一步地，所述纯化是按照前述的纯化方法进行的。进一步地，所述射干苷元与氢氧化钠的重量比为1:1。进一步地，所述乙基化试剂选自碳酸二乙酯、碘乙烷、溴乙烷或硫酸二乙酯；优选硫酸二乙酯。进一步地，步骤(A)中，所述反应的温度为100℃。进一步地，所述酸为盐酸。射干苷元为5，7，4′三羟基异黄酮化合物，有三个游离的酚羟基存在，烷基化(乙基化)反应理论反应产物有7个，另外射干苷元C环的氧键在强碱存在下易发生裂解成为查尔酮，从而使反应产物多达10余种。专利技术人在制备方法的摸索中，对反应过程用薄层层析跟踪，通过多次实验，证明射干苷元与氢氧化钠配料比为1:1时所得反应产物副产物少，目标产物4′,7–二乙基射干苷元得率高(薄层条件：固定相为硅胶GF254，展开剂为氯仿：甲醇(10：0.5))。薄层层析图谱见图1，HPLC图谱见图2～5。从图1中可以看出，射干苷元：氢氧化钠(1:1)时的反应产物的杂质最少。从图2中可以看出，射干苷元：氢氧化钠(1:0.2)时产物有4个副产物，目标产物占总产物83.7％(面积归一化法)。从图3中可以看出，射干苷元：氢氧化钠(1:0.5)时产物有3个副产物，目标产物占总产物87.9％(面积归一化法)。从图4中可以看出，射干苷元：氢氧化钠(1:1)时产物有1个副产物，目标产物占总产物90.2％(面积归一化法)。显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。附图说明图1为不同配料比下反应产物的薄层图谱。从左至右依次为点1：射干苷元：氢氧化钠(1:0.2)时的反应产物(4个杂质斑点)；点2：射干苷元：氢氧化钠(1:0.5)时的反应产物(3个杂质斑点)点3：射干苷元：氢氧化钠(1:1)时的反应产物(1个杂质斑点)；点4：4′,7–二乙基射干苷元对照品。图2为射干苷元：氢氧化钠(1:0.2)时反应产物的HPLC图谱。图3为射干苷元：氢氧化钠(1:0.5)时反应产物的HPLC图谱。图4为射干苷元：氢氧化钠(1:1)时反应产物的HPLC图谱。图5为4′,7–二乙基射干苷元对照品的HPLC图谱。具体实施方式试剂来源为成都市科龙化工试剂厂，均为分析纯。射干苷元为自制，含量>98％(面积归一化法)，具体见专利ZL200910308146.1。实施例14′,7–二乙基射干苷元的制备称取射干苷元100g，加NaOH100g，95％乙醇1000mL，碳酸二乙酯200mL，水浴回流反应2小时，取出，用适量36％盐酸中和至pH＝1～2，加水搅拌放冷，过滤，60℃减压干燥，得淡黄色粉末，即4′,7–二乙基射干苷元，收率50％，纯度60％(HPLC面积归一化法)。实施例24′,7–二乙基射干苷元的制备称取射干苷元100g，加NaOH100g，95％乙醇1000mL，碘乙烷200mL，水浴回流反应30分钟，取出，用适量36％盐酸中和至pH＝1～2，加水搅拌放冷，过滤，60℃减压干燥，得淡黄色粉末，即4′,7–二乙基射干苷元，收率75％，纯度78％(HPLC面积归一化法)。实施例34′,7–二乙基射干苷元的制备称取射干苷元100g，加NaOH100g，95％乙醇1000mL，溴乙烷200mL，水浴回流反应1小时，取出，用适量36％盐酸中和至pH＝1～2，加水搅拌放冷，过滤，60℃减压干燥，得淡黄色粉末，即4′,7–二乙基射干苷元，收率70％，纯度72％(HPLC面积归一化法)。实施例44′,7–二乙基射干苷元的制备称取射干苷元100g，加NaOH100g，95％乙醇1000mL，硫酸二乙酯200mL，水浴回流反应30分钟，取出，用适量36％盐酸中和至pH＝1～2，加水搅拌放冷，过滤，60℃减压干燥，得淡黄色粉末，即4′,7–二乙基射干苷元，收率85％，纯度90％(HPLC面积归一化法)。实施例54′,7–二乙基射干苷元的纯化取上述实施例4制备的4′,7–二乙基射干苷元10g，加二甲基乙酰胺100mL100℃加热溶解，趁热过滤，滤液加入无水乙醇50mL，摇匀，放置析晶，结晶过滤，粗晶加入二甲基乙酰胺80mL100℃加热溶解，趁热过滤，滤液加入无水乙醇40mL，摇匀，放置析晶，得到淡黄色片状结晶，过滤，60℃减压干燥24小时，得4′,7–二乙基射干苷元5.5g，含量99.12％(HPLC外标法)。实施例64′,7–二乙基射干苷元的纯化取上述实施例4制备的4′,7–二乙基射干苷元10本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种4′,7–二乙基射干苷元的纯化方法，其特征在于：它包括以下步骤：(1)将4′,7–二乙基射干苷元加热溶解在溶剂中，过滤，取滤液；所述溶剂选自二甲基乙酰胺或氯仿；(2)向滤液中加入抗溶剂无水乙醇，冷却析晶，过滤；(3)取过滤后的固体，采用步骤(1)中相同的溶剂重结晶；(4)分离出晶体，干燥即得。

【技术特征摘要】
1.一种4′,7–二乙基射干苷元的纯化方法，其特征在于：它包括以下步骤：(1)将4′,7–二乙基射干苷元加热溶解在溶剂中，过滤，取滤液；所述溶剂选自二甲基乙酰胺或氯仿；(2)向滤液中加入抗溶剂无水乙醇，冷却析晶，过滤；(3)取过滤后的固体，采用步骤(1)中相同的溶剂重结晶；(4)分离出晶体，干燥即得。2.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于：所述溶剂与4′,7–二乙基射干苷元的体积重量比为5～10mL：1g。3.根据权利要求2所述的纯化方法，其特征在于：所述溶剂选自二甲基乙酰胺，二甲基乙酰胺与4′,7–二乙基射干苷元的体积重量比为10mL：1g，无水乙醇与4′,7–二乙基射干苷元的体积重量比为5mL：1g。4.根据权利要求2所述的纯化方法，其特征在于：所述溶剂选自氯仿，氯仿与4′,7–二乙基射干苷元的体积重量比为5mL：1g，无水乙醇与4...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈帅，袁崇均，罗森，王笳，张磊，李利民，陈雏，吴燕，宁楠，
申请(专利权)人：四川省中医药科学院，
类型：发明
国别省市：四川;51