从母育酚中分离纯化制备高纯度生育三烯酚的方法技术

本发明专利技术公开了一种从母育酚中分离纯化制备高纯度生育三烯酚的方法。现有的方法通常生产的是天然母育酚的混合物，包含了生育酚和生育三烯酚，少数溶剂萃取能分离生育酚和生育三烯酚，但是在商业规模方面经济上是不可行的。本发明专利技术通过一次中低压制备色谱从母育酚的混合物中分离纯化得到高纯度混合生育三烯酚的方法，其中制备色谱是通过正相色谱或者反相色谱纯化。采用本发明专利技术，能够在中低压下，实现原料一次上柱分离得到高含量的生育三烯酚，色谱层析柱内的填料能够再生，使用的溶剂可以回收套用，降低生产成本，简化生产设备，提高产品的竞争力。

Method for separating and purifying high purity producing three phenol from mother sterile phenol

The invention discloses a method for separating and purifying high purity producing three phenol from a parent phenol. The existing methods usually produce a mixture of natural tocol, including tocopherol and have three allyl phenol, a solvent extraction and separation of tocopherol can have three allyl phenol in a commercial scale, but the economy is not feasible. The present invention uses a low and medium pressure preparative chromatography to separate and purify the mixture from a parent phenolic compound to obtain a high-purity mixing method for producing three ene phenol, wherein the preparative chromatography is purified by normal phase chromatography or reversed phase chromatography. The invention can be in low pressure, raw materials to achieve a separation on the column to obtain high content have three allyl phenol, chromatography column filler can be regenerated, the solvent can be recycled, reducing production cost, simplify production equipment, improve product competitiveness.

【技术实现步骤摘要】
从母育酚中分离纯化制备高纯度生育三烯酚的方法
本专利技术涉及天然维生素E的生产方法，具体地说是一种利用制备色谱技术从母育酚中分离纯化制备高纯度、高相对含量生育三烯酚的方法。
技术介绍
生育三烯酚是天然维生素E族的成员，在自然界，已知的天然维生素E族成员有8种，统称为母育酚(tocols)，分别为α、β、γ及δ-生育酚和α、β、γ、δ-生育三烯酚。生育酚和生育三烯酚之间的区别在于后者的侧链上有3个双键，不同生育酚或生育三烯酚之间的区别是环状结构上的甲基的数目和位置不同。生育三烯酚的自然来源十分有限，在正常食物中不大可能摄取到大量的生育三烯酚。生育三烯酚现有的三种商业来源——棕榈油、米糠油脱臭馏出物及脂树红豆(Annatto)；其中棕榈油含有600-1000ppm的母育酚，其脱臭馏出物中大约含有0.1-2％的母育酚，是生育三烯酚最可靠的商业来源。目前全球棕榈油每年产量超过2000万吨，每年均在稳步上升，而且资源高度集中，主要分布于马来西亚和印度尼西亚。除此之外，生育三烯酚另外的一个商业来源是米糠油脱臭馏出物，现估计全球米糠油产量约80-100万吨左右，主要分布于亚洲的中国、印度及泰国等水稻主产国。由于生育酚研究较早，生理功能也得到认可，并且已经广泛应用，因此通常所说的天然维生素E是指生育酚。随着科学研究的深入，研究人员生育酚与生育三烯酚的生理功能及活性是有差别的，尤其是生育三烯酚在某些方面有比生育酚更优越的生理功能，是生育酚所欠缺的，这些研究资料显示出生育三烯酚可取代一些现有药品的潜质，而且包含了多种治疗功能的性质，且未有发现副作用及可能产生的毒性。同时，也有研究表明较高纯度的生育酚会削弱生育三烯酚的生理功能，因此有必要将二者分离。天然生育三烯酚的提取难点在于以下几个方面：1：含有生育三烯酚的植物资源有限(米糠油、棕榈油及大麦油等少数几种油料作物)且含量低，提取难度大；2：生育三烯酚含有双键，较生育酚更容易氧化损失，提取条件较苛刻；3：生育三烯酚与生育酚结构和性质高度相近，不易分离。目前高含量的生育三烯酚分离纯化绝大部分是以其植物油脂的脱臭馏出物为原料，粗提技术与生育酚类似，可以借鉴当期较成熟的生育酚提取纯化方法浓缩母育酚，以提高原料中母育酚的含量，减轻后续提取的负荷，后期则需着重考虑生育酚与生育三烯酚在一些特定方面的性质差异，从而使之与生育酚分离。美国专利US5157132公开了一种从棕榈油脱臭馏出物中提取类胡萝卜素及母育酚的方法，首先利用KOH的甲醇溶液皂化PFAD中的FFA，然后用石油醚萃取分层，上层即为富含类胡萝卜素的石油醚层，下层再用石油醚萃取，如此反复多次萃取分层，合并石油醚层并减压脱去溶剂即得到类胡萝卜素浓缩物，下层水洗，脱气、分子蒸馏蒸去低沸点的脂肪酸甲酯，残余物即为富含母育酚的浓缩物。此浓缩物上氧化铝柱色谱，首先利用正己烷洗脱脂肪酸甲脂等非极性不吸附物，然后再利用异丙醇正己烷的混合溶液梯度洗脱，分段收集，最后选择性合并含有母育酚的馏分并减压蒸干溶剂后，最后母育酚含量20.7％，母育酚中生育酚和生育三烯酚没有分离。美国专利US5190618以PFAD为原料，采用酯化、酯交换将FFA和甘油酯转换为低沸点的脂肪酸甲酯，之后采用高真空蒸馏的方式去除脂肪酸甲酯，总VE浓度从最初的0.4％-0.5％浓缩到8-9％；之后利用溶剂冷冻结晶析出甾醇，提取液上阴离子交换树脂进行纯化，最后经分子蒸馏和脱臭精制得到纯度高达95％的母育酚产品，生育酚与生育三烯酚也没有分离。中国专利CN1079795公开了一种从米糠原料中以高产率稳定和回收生育酚和生育三烯酚产物的方法，该方法包括加热米糠原料以使破坏性的酶失活，稳定米糠，再萃取得到富含母育酚的米糠油，然后通过物理精炼，分子蒸馏提取母育酚，母育酚中生育酚与生育三烯酚也没有分离。美国专利US6224717也以PFAD为原料，先将PFAD中的醇类物质如甾醇、单甘酯、双甘酯与FFA反应生成甾醇酯与脂肪酸甲酯，然后精馏分离母育酚，之后再用生育酚及生育三烯酚在各类溶剂中(尤其是含水的醇类)分配的差异采用逆流萃取法分离生育酚和生育三烯酚，最终能获得高含量的混合生育酚三烯酚及其单体。以上公开的专利文献中描述了从植物油脱臭馏出物中分离或者富集母育酚的方法，但是这些方法通常生产的是天然母育酚的混合物，包含了生育酚和生育三烯酚，少数溶剂萃取能分离生育酚和生育三烯酚，但是在商业规模方面经济上是不可行的。为了获得纯的生育三烯酚家族成员，后期必须借助色谱层析的方式分离。如公开专利EP1336610、JP61-151186、US6395915及US20140179933所述的方法。专利EP1336610及US20140179933采用模拟移动床层析色谱分离棕榈油来源的母育酚浓缩物，由于模拟移动床各区间阀门切换时间上不易操作，溶剂的选择和回收上存在一定的困难，尤其是这种设备成本很高，国内尚未有工业化分离母育酚的报道。专利US6395915采用两次反相色谱分离，分离效率低，分离成本高。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是克服上述现有技术存在的缺陷，提供一种利用制备色谱纯化技术从母育酚中低成本分离纯化制备高纯度、高相对含量生育三烯酚的方法。为此，本专利技术采用如下的技术方案：从母育酚中分离纯化制备高纯度生育三烯酚的方法，其特征在于：使用正相制备色谱，将母育酚吸附于正相制备色谱的固定相，母育酚的含量为70-90％，其中生育三烯酚相对含量为50-80％，来源于棕榈油脱臭馏出物或其浓缩物，所述的母育酚为生育三烯酚及至少一种生育酚同系物的混合物，经过一次色谱纯化得到母育酚含量≥90％，其中生育三烯酚相对含量≥90％的产物；该方法包括下述步骤：A)将适量的母育酚溶解在流动相一中，常温下充分溶解，得上样液；B)用制备泵将上样液打入正相色谱层析柱中，层析柱中预先装填正相色谱固定相，上样结束后，再利用制备泵依次将流动相一、二和三加入正相色谱层析柱中；C)分段收集洗脱液，减压回收溶剂后，获得流出液一、二和三，其中流出液二中母育酚含量≥90％，生育三烯酚相对含量≥90％；其中，所述的正相色谱固定相为非键合硅胶，其粒径为20～200μm，孔径为形状为球型或不定型；所述的流动相一为低极性有机溶剂；流动相二为低极性有机溶剂与高极性有机溶剂的混合溶剂，其中低极性有机溶剂的体积百分比大于60％；流动相三为高极性有机溶剂；所述的低极性有机溶剂选自正己烷、环己烷、正庚烷、石油醚中的一种，所述的高极性有机溶剂选自异丙醇、乙酸乙酯、四氢呋喃、甲基叔丁基醚中的一种。进一步，所述非键合硅胶的粒径优选为40～100μm，孔径优选为实验发现粒径较小则分离效果较好、收率相对较高，但粒径越小，层析柱压越高，配套仪器精密度、密封性要求也高。进一步，上样液中母育酚的质量为硅胶质量的0.05-0.5倍。制备色谱纯化技术一般分为正相制备色谱纯化与反相制备色谱纯化。所谓正相制备色谱是指用的固定相通常为非键合硅胶或键合其他具有极性官能团，如胺基团和氰基团的键合相填料。由于硅胶表面的硅羟基或其他团的极性较强，因此，分离的次序是依据样品中的各组份的极性大小，即极性强弱的组份最先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低。反相色谱填料常是以本文档来自技高网...

【技术保护点】
从母育酚中分离纯化制备高纯度生育三烯酚的方法，其特征在于：使用正相制备色谱，将母育酚吸附于正相制备色谱的固定相，母育酚的含量为70‑90％，其中生育三烯酚相对含量为50‑80％，来源于棕榈油脱臭馏出物或其浓缩物，所述的母育酚为生育三烯酚及至少一种生育酚同系物的混合物，经过一次色谱纯化得到母育酚含量≥90％，其中生育三烯酚相对含量≥90％的产物；该方法包括下述步骤：A)将适量的母育酚溶解在流动相一中，常温下充分溶解，得上样液；B)用制备泵将上样液打入正相色谱层析柱中，层析柱中预先装填正相色谱固定相，上样结束后，再利用制备泵依次将流动相一、二和三加入正相色谱层析柱中；C)分段收集洗脱液，减压回收溶剂后，获得流出液一、二和三，其中流出液二中母育酚含量≥90％，生育三烯酚相对含量≥90％；其中，所述的正相色谱固定相为非键合硅胶，其粒径为20～200μm，孔径为

【技术特征摘要】
1.从母育酚中分离纯化制备高纯度生育三烯酚的方法，其特征在于：使用正相制备色谱，将母育酚吸附于正相制备色谱的固定相，母育酚的含量为70-90％，其中生育三烯酚相对含量为50-80％，来源于棕榈油脱臭馏出物或其浓缩物，所述的母育酚为生育三烯酚及至少一种生育酚同系物的混合物，经过一次色谱纯化得到母育酚含量≥90％，其中生育三烯酚相对含量≥90％的产物；该方法包括下述步骤：A)将适量的母育酚溶解在流动相一中，常温下充分溶解，得上样液；B)用制备泵将上样液打入正相色谱层析柱中，层析柱中预先装填正相色谱固定相，上样结束后，再利用制备泵依次将流动相一、二和三加入正相色谱层析柱中；C)分段收集洗脱液，减压回收溶剂后，获得流出液一、二和三，其中流出液二中母育酚含量≥90％，生育三烯酚相对含量≥90％；其中，所述的正相色谱固定相为非键合硅胶，其粒径为20～200μm，孔径为形状为球型或不定型；所述的流动相一为低极性有机溶剂；流动相二为低极性有机溶剂与高极性有机溶剂的混合溶剂，其中低极性有机溶剂的体积百分比大于60％；流动相三为高极性有机溶剂；所述的低极性有机溶剂选自正己烷、环己烷、正庚烷、石油醚中的一种，所述的高极性有机溶剂选自异丙醇、乙酸乙酯、四氢呋喃、甲基叔丁基醚中的一种。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述非键合硅胶的粒径为40～100μm，孔径为3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：上样液中母育酚的质量为硅胶质量的0.05-0.5倍。4.从母育酚中分离纯化制备高纯度生育三烯酚的方法，其特征在于：使用反相制备色谱，将母育酚吸附于反...

【专利技术属性】
技术研发人员：代志凯，李祥清，赵健，王胜南，许新德，邵斌，
申请(专利权)人：浙江医药股份有限公司新昌制药厂，
类型：发明
国别省市：浙江,33