人抗CD27抗体、方法和用途技术

对于人CD27免疫特异性的人抗体能够阻断CD27与其配体CD70的结合并中和CD27的生物活性，包括但不限于CD27胞内信号传导、T细胞增殖和活化、B细胞增殖和分化、成浆细胞形成和抗体应答的减轻、通过CD70的肿瘤细胞刺激、以及来自T细胞和B细胞的可溶性介质产生。该抗体可以用于诊断或治疗CD27活性相关疾病和状况。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】人抗CD27抗体、方法和用途
本专利技术涉及针对CD27蛋白质的人抗体及其用途，并且更具体地，涉及针对人CD27蛋白质的人抗体及其在治疗炎性病症中的用途。
技术介绍
CD27是I型跨膜蛋白质和TNF受体超家族(TNFSF27)成员，在大多数T细胞、自然杀伤细胞以及抗体分泌浆细胞和记忆B细胞上作为表面抗原表达。CD70是细胞因子，也称为肿瘤坏死因子配体超家族成员7(TNFSF7)，以及CD27的同源配体。TNFSF配体受体相互作用能够调节T细胞依赖性B细胞分化(JacquotS.2000ImmunolRes.21(1):23-30)，并且在不同细胞中诱导细胞凋亡性细胞死亡。CD27:CD70连接导致经典和非经典NF-kβ信号传导途径的活化，所述活化依次又刺激B细胞和T细胞增殖、浆细胞分化和后续抗体分泌(Yamamoto,H.1998JImmunol.161(9):4753-9)。CD27与OX40、4-1BB的共刺激还促进活化T细胞的存活(Croft,M.2003CytokineGrowthFactorRev.14(3-4):265-73)，从而调节许多效应和记忆T细胞，并且通过促进细胞因子例如IL-4和IFNγ产生或调节对其他细胞因子例如IL2和IL-12的作用的T细胞应答而控制T细胞功能。在人和动物两者中的研究均提示CD27:CD70途径在多种免疫相关疾病中的重要作用，所述免疫相关疾病包括系统性红斑狼疮(SLE)(DoernerTLupus200413(5):283-9)、类风湿性关节炎(Tak,PP等人，1996clinImmunolImmunopathol80(2):129-38)和多发性硬化症(HintzenRQ等人，1991JNeuroimmunol35(1-3):211-7)。另一方面，CD70已报道在恶性B细胞上表达至不同程度，并且CD70:CD27复合物能够通过活化抗肿瘤免疫并减少肿瘤生长来介导抗肿瘤应答(BorstJ,HendriksJ和XiaoY.2005.CurrOpinImmunol.17(3):275-81)。CD27还可控制在感染部位处的CD4+和CD8+T细胞积聚(Hendricks等人，2000NatureImmunol1,433-440)。CD70在正常非造血细胞上不表达。CD70表达看起来暂时局限于抗原活化T细胞和B细胞，并且当抗原刺激停止时，它的表达下调。来自动物模型的证据提示CD70可促成免疫病症例如类风湿性关节炎(Brugnoni等人，1997Immunol.Lett.55:99-104)、牛皮癣关节炎(Brugnoni等人，1997,Immunol.Lett.55:99-104)、以及狼疮(Oelke等人，2004,ArthritisRheum.50:1850-60)。除其在炎症应答中的潜在作用之外，CD70还在各种经转化的细胞上表达，所述经转化的细胞包括淋巴瘤B细胞、何杰金氏细胞和里德-斯特恩伯格细胞(Reed-Sternbergcell)、神经和许多癌起源的恶性细胞。在W02008/051424(Univ.SouthHampton)中描述的激动剂CD27结合抗体注明为可用于促进T细胞免疫，并且此类抗体具有促使它们不受CD70影响(未被抑制)的结合表位。虽然啮齿类中涉及CD27和/或CD70改变的研究已证实该受体配体相互作用的潜在重要作用，但需要提供对于人CD27及其他CD27:CD70相互作用阻断剂特异性的人抗体，所述人抗体可对CD27表达细胞发挥临床上有用的细胞毒性、细胞生长抑制或免疫调节作用，特别是在不存在CD70的情况下不对CD27表达细胞发挥不希望的激动剂作用。此类化合物可以是调节由CD27表达细胞介导的赘生性细胞或免疫病症发展中有用的治疗剂。
技术实现思路
本专利技术提供了能够阻断在宿主受试者中的细胞、组织或器官上与CD27-CD70相互作用相关的活性的人CD27结合单克隆抗体。本专利技术提供了示例性CD27结合单克隆抗体的氨基酸序列，所述氨基酸序列通过用于在宿主细胞中表达的核酸编码。此外，本专利技术的CD27单克隆抗体限定在CD27的胞外域上的至少三个非重叠表位，当由本专利技术的抗体接合时，所述至少三个非重叠表位阻止CD70型配体连接驱动的信号传导和下游生物活性。本专利技术的另一个方面是与CD27蛋白质表位反应的分离的抗CD27抗体，所述CD27蛋白质表位由在CD27蛋白质的位置21-191之间的残基限定。本专利技术的另一个方面是具有重链可变区序列和轻链可变区序列的分离的抗体，所述重链可变区序列选自SEQIDNO:76、78、80、102-126、128-136和145-147中所示的序列，所述轻链可变区序列选自SEQIDNO:77、79、81-101、127、137-144和148中所示的序列，包括这些序列的变体例如保守置换。本专利技术的进一步方面是分离的抗体，所述分离的抗体具有选自SEQIDNO:1-75和151-158中所示的序列的重链和轻链CDR序列，包括这些序列的变体例如保守置换。本专利技术的另一个方面是编码本专利技术的抗体的分离的多核苷酸。在另一方面，本专利技术涉及这样的抗体，所述抗体结合抗体C2177和/或C2186或表30-39中所述的由其生成的人抗体与之结合的由蛋白质上的区域限定的共同表位，或所述抗体与抗体C2177和/或C2186或表30-39中所述的由其生成的人抗体竞争结合CD27蛋白质。在另一个实施例中，本专利技术涉及这样的抗体，所述抗体结合抗体C2191或表30-39中所述的由其生成的人抗体与之结合的由蛋白质上的区域限定的CD27的胞外域表位，并且与抗体C2191或表30-39中所述的由其生成的人抗体竞争结合CD27蛋白质。在另一个实施例中，本专利技术涉及这样的抗体，所述抗体结合抗体C2192或表30-39中所述的由其生成的人抗体与之结合的由蛋白质上的区域限定的CD27的胞外域表位，并且与抗体C2192或表30-39中所述的由其生成的人抗体竞争结合CD27蛋白质。在另一个方面，本专利技术包含衍生自抗体C2177、C2186、C2191和C2192或表30-39中所述的由其生成的人抗体中的一种或多种的抗体或其片段，所述抗体或其片段具有由C2177、C2186、C2191和C2192或表30-39中所述的由其生成的人抗体中的一种或多种表现出的其他功能结合特征，例如抑制CD27与CD70阳性细胞的结合。因此，本专利技术的一个方面涉及包含经改造的(例如人源化或人适应的)重链和轻链的经改造的抗体，其中：(1)经改造的重链可变区包含或衍生自来自小鼠抗体C2177、C2191、C2192和C2186重链的一个或多个互补决定区(CDR)，和来自人受体抗体重链的框架，任选具有一个或多个人框架残基置换，以及(2)经改造的轻链可变区包含来自小鼠抗体C2177、C2191、C2192和C2186轻链的一个或多个互补决定区，和来自人受体抗体轻链的框架，任选具有一个或多个人框架残基置换；以及(3)经改造的抗体与人CD27特异性结合并干扰其与CD70的相互作用。在进一步的实施例中，经改造的抗体可由一个或多个CDR组成，所述CDR由一个或多个置换或缺失进一步改造，例如与抗体C2177、C2191、本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的人CD27抗体或其抗原结合片段，包含轻链可变区，所述轻链可变区包含：选自SEQ ID NO:59‑66和158的互补决定区轻链1（CDRL1）氨基酸序列；选自SEQ ID NO:67‑74的CDRL2氨基酸序列；和SEQ ID NO:75的CDRL3氨基酸序列。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2012.03.15 US 61/6113321.一种分离的人CD27抗体或其抗原结合片段，包含轻链可变区和重链可变区，所述轻链可变区包含：SEQIDNO:62的CDRL1氨基酸序列；SEQIDNO:68的CDRL2氨基酸序列；和SEQIDNO:75的CDRL3氨基酸序列，并且所述重链可变区包含：选自SEQIDNO:44和161的CDRH1氨基酸序列；SEQIDNO:47的CDRH2氨基酸序列；和SEQIDNO:58的CDRH3氨基酸序列。2.一种分离的人CD27抗体或其抗原结合片段，包含轻链可变氨基酸序列和重链可变氨基酸序列，其中所述轻链可变氨基酸序列是SEQIDNO:143，并且所述重链可变氨基酸序列是SEQIDNO:133。3.根据权利要求1或2所述的分离的人CD27抗体或其抗原结合片段，还包含IgG4重链恒定区和IgG4轻链恒定区。4.根据权利要求3所述的分离的人CD27抗体或其抗原结合片段，其中所述重链恒定区是SEQIDNO:159的氨基酸序列，并且所述轻链恒定区是SEQIDNO:160的氨基酸序列。5.根据权利要求1或2所述的分离的人CD27抗体或其抗原结合片段，其中如通过表面等离振子共振测定的，所述抗体或其抗原结合片段以1×10-7M或更小的KD与人CD27结合。6.一种包含药学上可接受的制剂的制造制品，所述药学上可接受的制剂包含权利要求1-4中任一项所述的分离的人CD27抗体或其抗原结合片段。7.一种分离的核酸分子，其编码权利要求1-4中任一项所述的分离的人CD27抗体或其抗原结合片段。8.一种或多种用于表达权利要求1-4中任一项所述的分离的人CD27抗体或其抗原结合片段的分离的载体，包含权利要求7所述的分离的核酸分子。9.一种用于产生权利要求1-4中任一项所述的分离的人CD27抗体或其抗原结合片段的原核或真核宿主细胞，包含权利要求8所述的一种或多种分离的核酸载体。10.根据权利要求9所述的宿主细胞，其中所述宿主细胞是选自...

【专利技术属性】
技术研发人员：J陈，J弗兰斯森，N富索夫，D哈梅，T马里亚，G奧布莫洛瓦，T奧尔特，M赖兹伊恩，M斯库里，R斯维特，A特普亚科夫，J惠勒，JC阿马格罗，
申请(专利权)人：詹森生物科技公司，
类型：发明
国别省市：美国;US