溶瘤性HSV的通用重新靶向制造技术

本文提供了双特异性衔接蛋白以及它们用于将溶瘤性HSV重新靶向至靶细胞诸如肿瘤细胞的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

本公开涉及双特异性衔接蛋白以及它们用于将溶瘤性hsv重新靶向至靶细胞诸如肿瘤细胞的用途。以电子方式提交的参考序列表本申请包含已经以ascii格式电子递交的序列表，并且据此全文以引用方式并入。创建于2022年2月28日的所述ascii副本命名为jbi6460wopct1_seqlisting.txt并且大小为192,512字节。

技术介绍

1、溶瘤性单纯疱疹病毒(ohsv)正被广泛研究用于治疗实体瘤。作为一个组，它们具有优于传统癌症治疗的许多优点(markert jm等人,genetically engineered hsv in thetreatment of glioma:a review.rev med virol.2000年1月至2月；10(1):17-30；russellsj等人,oncolytic virotherapy.nat biotechnol.2012年7月10日；30(7):658-70；以及shen y等人,herpes simplex virus 1(hsv-1)for cancer treatment.cancer genethe本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种将重组单纯疱疹病毒(HSV)重新靶向至表达TAA的肿瘤细胞的方法，所述方法包括向具有所述肿瘤细胞的受试者施用

2.根据权利要求1所述的方法，其中编码所述异源配体肽的所述核苷酸序列通过插入到编码野生型糖蛋白D(gD)的核苷酸序列中或替换编码野生型糖蛋白D(gD)的核苷酸序列的一部分而插入到所述重组HSV中。

3.根据权利要求2所述的方法，其中编码所述异源配体肽的所述核苷酸序列插入到所述重组HSV中，替换编码所述野生型糖蛋白D(gD)的氨基酸6-38的核苷酸序列。

4.根据权利要求1至3所述的方法，其中所述双特异性衔接蛋白的所述第一结合结构域包含对...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种将重组单纯疱疹病毒(hsv)重新靶向至表达taa的肿瘤细胞的方法，所述方法包括向具有所述肿瘤细胞的受试者施用

2.根据权利要求1所述的方法，其中编码所述异源配体肽的所述核苷酸序列通过插入到编码野生型糖蛋白d(gd)的核苷酸序列中或替换编码野生型糖蛋白d(gd)的核苷酸序列的一部分而插入到所述重组hsv中。

3.根据权利要求2所述的方法，其中编码所述异源配体肽的所述核苷酸序列插入到所述重组hsv中，替换编码所述野生型糖蛋白d(gd)的氨基酸6-38的核苷酸序列。

4.根据权利要求1至3所述的方法，其中所述双特异性衔接蛋白的所述第一结合结构域包含对由所述重组hsv表达的所述异源配体肽具有结合特异性的抗原结合片段。

5.根据权利要求4所述的方法，其中对所述异源配体肽具有结合特异性的所述抗原结合片段选自由以下项组成的组：单链可变区(scfv)、单链抗体vhh和多肽darpin。

6.根据权利要求1至3所述的方法，其中所述双特异性衔接蛋白的所述第二结合结构域包含对由所述肿瘤细胞表达的所述taa具有结合特异性的抗原结合片段。

7.根据权利要求6所述的方法，其中对所述taa具有结合特异性的所述抗原结合片段选自由以下项组成的组：scfv、单链抗体vhh、多肽darpin。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中由所述重组hsv表达的所述异源配体肽包含gcn4转录因子或其片段。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述gcn4转录因子或其片段包含seq id no:4的氨基酸序列。

10.根据权利要求8或9所述的方法，其中所述双特异性衔接蛋白的所述第一结合结构域包含对所述gcn4转录因子或其片段具有结合特异性的抗原结合片段。

11.根据权利要求10所述的方法，其中对所述gcn4转录因子或其片段具有结合特异性的所述抗原结合片段是抗gcn4 scfv，其包含由hcdr1(seq id no:16)、hcdr2(seq id no:17)和hcdr3(seq id no:18)构成的重链可变区(vh)和/或由lcdr1(seqidno:19)、lcdr2(seq id no:20)和lcdr3(seq id no:21)构成的轻链可变区(vl)。

12.根据权利要求10所述的方法，其中对所述gcn4转录因子或其片段具有结合特异性的所述抗原结合片段是抗gcn4 scfv，其包含具有与seq id no:22至少95％、或至少96％、或至少97％、或至少98％、或至少99％、或100％相同的多肽序列的vh和/或具有与seq idno:23至少95％、或至少96％、或至少97％、或至少98％、或至少99％、或100％相同的多肽序列的vl。

13.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中由所述重组hsv表达的所述异源配体肽包含la蛋白或其片段。

14.根据权利要求13所述的方法，其中所述la蛋白或其片段包含seqid no:12的氨基酸序列。

15.根据权利要求13或14所述的方法，其中所述双特异性衔接蛋白的所述第一结合结构域包含对所述la蛋白或其片段具有结合特异性的抗原结合片段。

16.根据权利要求15所述的方法，其中对所述la蛋白或其片段具有结合特异性的所述抗原结合片段是抗la scfv，其包含由hcdr1(seq idno:26)、hcdr2(seq id no:27)和hcdr3(seq id no:28)构成的vh和/或由lcdr1(seq id no:29)、lcdr2(seq id no:30)和lcdr3(seq id no:31)构成的vl。

17.根据权利要求15所述的方法，其中对所述la蛋白或其片段具有结合特异性的所述抗原结合片段是抗la scfv，其包含具有与seq id no:32至少95％、或至少96％、或至少97％、或至少98％、或至少99％、或100％相同的多肽序列的vh和/或具有与seq id no:33至少95％、或至少96％、或至少97％、或至少98％、或至少99％、或100％相同的多肽序列的vl。

18.根据权利要求1至3所述的方法，其中由所述重组hsv表达的所述异源配体肽包含第一亮氨酸拉链部分，并且所述双特异性衔接蛋白的所述第一结合结构域包含第二亮氨酸拉链部分，其中所述第一亮氨酸拉链部分和所述第二亮氨酸拉链部分能够形成亮氨酸拉链二聚体。

19.根据权利要求18所述的方法，其中所述第一亮氨酸拉链部分是合成的亮氨酸拉链部分re(seq id no:6)并且所述第二亮氨酸拉链部分是合成的亮氨酸拉链部分er(seq idno:10)，或者所述第一亮氨酸拉链部分是合成的亮氨酸拉链部分er(seq id no:10)并且所述第二亮氨酸拉链部分是合成的亮氨酸拉链部分re(seq id no:6)。

20.根据权利要求1至19中任一项所述的方法，其中由所述肿瘤细胞表达的所述taa选自由以下项组成的组：psma、tmeff2、ror1、klk2和hla-g。

21.根据权利要求20所述的方法，其中由所述肿瘤细胞表达的所述taa是psma，并且其中所述双特异性衔接蛋白的所述第二结合结构域包含对psma具有结合特异性的抗原结合片段。

22.根据权利要求21所述的方法，其中对psma具有结合特异性的所述抗原结合片段是抗psmavhh，其包含hcdr1(seq id no:35)、hcdr2(seq id no:36)和hcdr3(seq id no:37)。

23.根据权利要求21所述的方法，其中对psma具有结合特异性的所述抗原结合片段是抗psmavhh，其包含与seq id no:38至少95％、或至少96％、或至少97％、或至少98％、或至少99％、或100％相同的多肽序列。

24.根据权利要求21所述的方法，其中对psma具有结合特异性的所述抗原结合片段是抗psmavhh，其包含hcdr1(seq id no:39)、hcdr2(seq id no:40)和hcdr3(seq id no:41)。

25.根据权利要求21所述的方法，其中对psma具有结合特异性的所述抗原结合片段是抗psmavhh，其包含与seq id no:42至少95％、或至少96％、或至少97％、或至少98％、或至少99％、或100％相同的多肽序列。

26.根据权利要求21所述的方法，其中对psma具有结合特异性的所述抗原结合片段是抗psma scfv，其包含由hcdr1(seq id no:43)、hcdr2(seq id no:44)和hcdr3(seq id no:45)构成的vh和/或由lcdr1(seq id no:46)、lcdr2(seq id no:47)和lcdr3(seq id no:48)构成的vl。

27.根据权利要求21所述的方法，其中对psma具有结合特异性的所述抗原结合片段是抗psma scfv，其包含具有与seq id no:49至少95％、或至少96％、或至少97％、或至少98％、或至少99％、或100％相同的多肽序列的vh和/或具有与seq id no:50至少95％、或至少96％、或至少97％、或至少98％、或至少99％、或100％相同的多肽序列的vl。

28.根据权利要求21所述的方法，其中由所述肿瘤细胞表达的所述taa是tmeff2，并且其中所述双特异性衔接蛋白的所述第二结合结构域包含对tmeff2具有结合特异性的抗原结合片段。

29.根据权利要求28所述的方法，其中对tmeff2具有结合特异性的所述抗原结合片段是抗tmeff2 scfv，其包含由hcdr1(seq id no:53)、hcdr2(seq id no:54)和hcdr3(seq idno:55)构成的vh和/或由lcdr1(seq id no:56)、lcdr2(seq id no:57)和lcdr3(seq idno:58)构成的vl。

30.根据权利要求28所述的方法，其中对tmeff2具有结合特异性的所述抗原结合片段是抗tmeff2 scfv，其包含具有与seq id no:59至少95％、或至少96％、或至少97％、或至少98％、或至少99％、或100％相同的多肽序列的vh和/或具有与seq id no:60至少95％、或至少96％、或至少97％、或至少98％、或至少99％、或100％相同的多肽序列的vl。

31.根据权利要求28所述的方法，其中对tmeff2具有结合特异性的所述抗原结合片段是抗tmeff2 scfv，其包含由hcdr1(seq id no:61)、hcdr2(seq id no:62)和hcdr3(seq idno:63)构成的vh和/或由lcdr1(seq id no:64)、lcdr2(seq id no:65)和lcdr3(seq idno:66)构成的vl。

32.根据权利要求28所述的方法，其中对tmeff2具有结合特异性的所述抗原结合片段是抗tmeff2 scfv，其包含具有与seq id no:67至少95％、或至少96％、或至少97％、或至少98％、或至少99％、或100％相同的多肽序列的vh和/或具有与seq id no:68至少95％、或至少96％、或至少97％、或至少98％、或至少99％、或100％相同的多肽序列的vl。

33.根据权利要求20所述的方法，其中由所述肿瘤细胞表达的所述taa是klk2，并且其中所述双特异性衔接蛋白的所述第二结合结构域包含对klk2具有结合特异性的抗原结合片段。

34.根据权利要求33所述的方法，其中对klk2具有结合特异性的所述抗原结合片段是抗klk2 scfv，其包含由hcdr1(seq id no:72)、hcdr2(seq id no:73)和hcdr3(seq id no:74)构成的vh和/或由lcdr1(seq id no:75)、lcdr2(seq id no:76)和lcdr3(seq id no:77)构成的vl。

35.根据权利要求33所述的方法，其中对klk2具有结合特异性的所述抗原结合片段是抗klk2 scfv，其包含具有与seq id no:78至少95％、或至少96％、或至少97％、或至少98％、或至少99％、或100％相同的多肽序列的vh和/或具有与seq id no:79至少95％、或至少96％、或至少97％、或至少98％、或至少99％、或100％相同的多肽序列的vl。

36.根据权利要求33所述的方法，其中对klk2具有结合特异性的所述抗原结合片段是抗klk2 scfv，其包含具有与seq id no:80至少95％、或至少96％、或至少97％、或至少98％、或至少99％、或100％相同的多肽序列的vh和/或具有与seq id no:81至少95％、或至少96％、或至少97％、或至少98％、或至少99％、或100％相同的多肽序列的vl。

37.根据权利要求20所述的方法，其中由所述肿瘤细胞表达的所述taa是hla-g，并且其中所述双特异性衔接蛋白的所述第二结合结构域包含对hla-g具有结合特异性的抗原结合片段。

38.根据权利要求20所述的方法，其中由所述肿瘤细胞表达的所述taa是ror1，并且其中所述双特异性衔接蛋白的所述第二结合结构域包含对ror1具有结合特异性的抗原结合片段。

39.根据权利要求38所述的方法，其中对ror1具有结合特异性的所述抗原结合片段是多肽darpin，其具有与seq id no:94至少95％、或至少96％、或至少97％、或至少98％、或至少99％、或100％相同的多肽序列。

40.一种治疗受试者的癌症的方法，其中taa由癌细胞表达，所述方法包括向所述受试者施用

41.根据权利要求40所述的方法，其中编码所述异源配体肽的所述核苷酸序列通过插入到编码野生型糖蛋白d(gd)的核苷酸序列中或替换编码野生型糖蛋白d(gd)的核苷酸序列的一部分而插入到所述重组hsv中。

42.根据权利要求40或41所述的方法，其中编码所述异源配体肽的所述核苷酸序列插入到所述重组hsv中，替换编码野生型gd的氨基酸6-38的核苷酸序列。

43.一种用于将重组hsv重新靶...

【专利技术属性】
技术研发人员：D·巴亚拉特，M·穆尔维，
申请(专利权)人：詹森生物科技公司，
类型：发明
国别省市：