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【技术实现步骤摘要】
本申请涉及小麦育种领域,特别是一种与小麦粒重相关的kasp标记引物组及其育种应用。
技术介绍
1、高产是小麦育种的重要目标,粒重是产量的构成要素之一,主要受加性效应的控制,在产量因素中遗传力最高,可达59-80%(肖世和,何中虎.小麦产量潜力和品质的改良.见:庄巧生.中国小麦品种改良及系谱分析.北京:中国农业出版社,2003.pp 497-542)。小麦粒重为数量性状,呈现连续变异,受微效多基因调控(zhang l y,liu d c,guo x l,yangw l,sun j z,wang d w,zhang a.genomic distribution of quantitative trait locifor yield and yield-related traits in common wheat.journal of integrativeplant biology,2010,52:996-1007)。关于小麦粒重的遗传定位研究已有诸多报道。mason等对不同播期下的小麦产量性状进行调查,在2d和5a染色体上检测到2个千粒重qtl(masonr e,hays d b,mondal s,ibrahim a m h,basnet b r.qtl for yield,yield componentsand canopy temperature depression in wheat under late sown fieldconditions.euphytica,2013,194:243-259)。刘丽华等对248个中国
2、随着分子生物学的发展,分子标记从rflp、rapd和ssr等发展到近年来的snp标记。snp具有遗传稳定、数量多、分布广等特点,并且适于高通量检测,基于其开发的9k、50k、90k、660k等基因型芯片集合了成千上万个snp标记,大大提高了遗传作图的准确性(cavanagh c r,shiaoman c,shichen w,bevan emma h,stuart s,seifollah k,kerrief,cyrille s,brown-guedira g l,alina a.genome-wide comparative diversityuncovers multiple targets of selection for improvement in hexaploid wheatlandraces and cultivars.proceedings of the national academy of sciences ofthe united states,2013,110:8057-8062;wang s,wong d,forrest k,allen a,chao s,huang b e,maccaferri m,salvi s,milner s g,cattivelli l.characterization ofpolyploid wheat genomic diversity using a high-density 90,000singlenucleotide polymorphism array.plant biotechnology journal,2014,12:787-796;cuif,zhang n,fan x,zhang w,zhao c,yang l,pan r,chen m,han j,zhao x.utilizationof a wheat660k snp array-derived high-density genetic map for high-resolutionmapping of a major qtl for kernel number.scientific reports,2017,7:3788)。基于snp位点差异,还可开发特异匹配引物末端碱基的kasp(kompetitive allele specificpcr)标记,可对snp位点进行精准的双等位基因判断,并具有高通量的特点,适于大量样本的分子标记检测,与育种选择相契合,在育种中具有广泛应用前景(semagn k,babu r,hearne s,olsen m.single nucleotide polymorphism genotyping using kompetitiveallele specific pcr(kasp):overview of the technology and its application incrop improvement.molecular breeding,2014,33:1-14)。
3、国内外近几十年的研究表明,千粒重的增加在小麦产量提升中起到了重要作用(morgounov a,zykin v,belan i,roseeva l,zelenskiy y,gomez becerra hf,budak h,bekes f(2010)genetic gains for grain yield in high latitude spring wheatgrown in western siberia in 1900–2008.field crops research117:101-112;songjm,dai s,li hs,cheng dg,liu af,cao xy,liu jj,zhao zd(2013)evolution ofagronomic and quality traits of wheat cultivars released in shandong provincerecently.scientia agricultura sinica46:1114-1126;underdahl jl,mergoum m,ransom jk,schatz bg(2008)agronomic traits improvement and associations inhard red spring wheat cultivars released in north dakota from 1968to2006.crop science48:158-166),长江中下游冬麦区是我国第二大麦区,其小麦生产对保障国家粮食安全具有重要意义,发掘当地小麦品种中的千粒重遗传控制位点,对进一步开展小麦产量的定向选择具有重要的指导作用。
技术实现思路
1、针对上述问题,本申请提供一组与小麦5b染色体上的粒重控制位点ktkw-5b相关的kas本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.与小麦粒重相关的KASP引物组,其特征在于,所述引物组由核苷酸序列如SEQ IDNO.7所示的引物AX-108792406-F1、核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示的引物AX-108792406-F1、核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示的引物AX-108792406-R组成。
2.如权利要求1所述的KASP引物组在检测小麦粒重中的应用,以样品小麦DNA为模板,利用上述KASP引物组配制成PCR检测体系并对样品小麦进行荧光PCR检测,若产生红色荧光,则含有C等位变异;若产生蓝色荧光,则含有T等位变异;携带等位变异C的小麦千粒重显著高于携带等位变异T的小麦。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述PCR检测体系包括:2×KASP MasterMix 2.5 μL、KASP Assay Mix 0.07 μL、浓度为20 ng/μL的模板DNA 2.43 μL;
4.一种用于检测小麦粒重的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括:2×KASP MasterMix 2.5 μL、KASP Assay Mix 0.07 μL;
【技术特征摘要】
1.与小麦粒重相关的kasp引物组,其特征在于,所述引物组由核苷酸序列如seq idno.7所示的引物ax-108792406-f1、核苷酸序列如seq id no.8所示的引物ax-108792406-f1、核苷酸序列如seq id no.3所示的引物ax-108792406-r组成。
2.如权利要求1所述的kasp引物组在检测小麦粒重中的应用,以样品小麦dna为模板,利用上述kasp引物组配制成pcr检测体系并对样品小麦进行荧光pcr检测,若产生红色荧光,则含有c等位变...
【专利技术属性】
技术研发人员:姜朋,张旭,吴磊,何漪,李畅,
申请(专利权)人:江苏省农业科学院,
类型:发明
国别省市:
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