构建体制造技术

本发明专利技术提供了一种构建体，其包含(i)编码酪氨酸羟化酶(TH)的核苷酸序列，(ii)编码GTP-环化水解酶I(CH1)的核苷酸序列和(iii)编码芳香族氨基酸多巴脱羧酶(AADC)的核苷酸序列，其中编码TH的核苷酸序列与编码CH1的核苷酸序列相连，使得它们编码融合蛋白TH-CH1。本发明专利技术还提供了包含所述核苷酸序列的病毒载体以及其在治疗和/或预防帕金森氏病中的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】构建体专利
本专利技术涉及一种包含编码参与多巴胺合成途径的酶活性的核苷酸序列的构建体。可操作地连接至少两条核苷酸序列使得它们编码一种融合蛋白。本专利技术也提供包含所述核苷酸序列的病毒载体基因组、载体生产系统和病毒载体颗粒。核苷酸序列在体内的表达，例如通过使用病毒载体颗粒的基因治疗，导致多巴胺的合成，这在治疗和/或预防以产生多巴胺的神经元的减少或损失为特征的神经系统疾病，如帕金森氏(Parkinson’ s disease)病中是有用的。专利技术背景帕金森氏病(PD)是一种神经变性疾病，其是以黑质区产多巴胺的神经元的损失为特征的。这最终导 致在纹状体中多巴胺的耗竭，引起严重的运动障碍。帕金森氏病的一种治疗方法是口服给药L-D0PA，即多巴胺的前体，这可以恢复一定程度的运动功能。然而，随着病情的发展，在运动障碍的治疗中L-DOPA治疗变得不那么有效，需要使用更高的剂量，这具有严重的副作用。可以通过将多巴胺直接释放到纹状体来实现ro的改善治疗。这可以通过基因治疗来实现。基因治疗对于ro治疗是有吸引力的，因为特定蛋白质的产生可以靶向cns(中枢神经系统)的特定区域，如纹状体。从氨基酸酪氨本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种构建体，其包含(i)编码酪氨酸羟化酶(TH)的核苷酸序列，(ii)编码GTP‑环化水解酶I(CH1)的核苷酸序列和(iii)编码芳香族氨基酸多巴脱羧酶(AADC)的核苷酸序列，其中编码TH的核苷酸序列与编码CH1的核苷酸序列相连，使得它们编码融合蛋白TH‑CH1。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.10.28 GB 1118636.8;2011.10.28 US 61/552,5811.一种构建体，其包含(i)编码酪氨酸羟化酶(TH)的核苷酸序列，(ii)编码GTP-环化水解酶I (CHl)的核苷酸序列和(iii)编码芳香族氨基酸多巴脱羧酶(AADC)的核苷酸序列，其中编码TH的核苷酸序列与编码CHl的核苷酸序列相连，使得它们编码融合蛋白TH-CHl。2.根据权利要求1所述的构建体，其选自:TH-L-CHl-壓JVADC ；AADC+TH+CH1 ；TH_l_CH1_l_AADC ;和TH_l_CH1_p_AADCL =接头编码序列， IRES =内部核糖体进入位点， P =启动子。3.根据权利要求2所述的构建体，其是TH+CH1_ikes_AADC。4.根据前述权利要求中任一项所述的构建体，其包含不是为人类使用而密码子优化的接头。5.根据权利要求1-3任一项所述的构建体，其包含含有如SEQID N0.1所示序列的接头。6.根据权利要求1或2所述的构建体，其具有序列AADC_u_TH+2_CH1或TH_u_AADC_u_CHl，其中LI和L2是两个不同的接头序列。7.根据权利要求6所述的构建体，其中LI和L2的核酸序列是不同的，但是LI和L2的氨基酸序列是相同的。8.根据权利要求7所述的构建体，其中LI和L2的核酸序列是不同的并选自SEQIDN0.1 和 SEQ ID N0.3。9.根据权利要求2所述的构建体，其具有序列TH+CH1_PJVADC，其中所述启动子是组成型启动子或组织特异性启动子。10.根据权利要求9所述的构建体，其中所述启动子是组成型启动子，其是CMV启动子、磷酸甘油酸激酶启动子或胸苷激酶启动子。11.一种病毒载体基因组，其包含根据前述权利要求中任一项所述的构建体。12.根据权利要求11所述的病毒载体基因组，其是慢病毒载体基因...

【专利技术属性】
技术研发人员：K米特罗范奥斯，S拉尔夫，H斯图尔德，A金斯曼，
申请(专利权)人：牛津生物医学英国有限公司，
类型：发明
国别省市：英国;GB