具有复制能力的病毒测定制造技术

本发明专利技术提供了一种用于在测试样品中检测具有复制能力的病毒的新方法。该方法包括培养和稀释多个单独的细胞培养物等分试样，该等分试样包含病毒允许细胞和一部分测试样品，随后测试具有复制能力的病毒的存在。该方法可以与阳性对照平行使用，本文中也提供了该阳性对照。照。照。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】具有复制能力的病毒测定


[0001]本专利技术提供了一种用于在测试样品中检测具有复制能力的病毒(复制型病毒，复制感受态病毒，replication competent virus)的新方法。所述方法包括培养和稀释多个单独的细胞培养物等分试样(aliquots)，该等分试样包含病毒允许细胞(容许病毒感染细胞，virus
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permissive cells)和一部分测试样品，随后测试具有复制能力的病毒的存在。所述方法可以与阳性对照平行使用，其也在本文中提供。

技术介绍

[0002]基因疗法广泛涉及使用遗传物质来治疗疾病。可以使用载体将治疗性遗传物质合并到宿主的靶细胞中，以实现核酸的转移。此类载体一般可分为病毒和非病毒类别。使用病毒载体递送治疗性基因是众所周知的，基因疗法产品现在是我们全球医疗保健市场的重要组成部分。
[0003]作为复制周期的一部分，病毒自然地将其遗传物质引入宿主的靶细胞。工程化病毒载体利用这种能力将目的核苷酸(nucleotide of interest,NOI)递送至靶细胞。迄今为止，许多病毒已被工程化本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于在测试样品中检测具有复制能力的病毒的方法，包括：a)提供多个单独的细胞培养物等分试样，每个等分试样具有小于12ml的最大水体积，其中每个等分试样包含所述样品的一部分和病毒允许细胞；b)培养所述等分试样至少9天；c)将所述等分试样再培养至少6天，其中在每次传代时使用至少2的稀释因子传代所述等分试样；以及d)测试具有复制能力的病毒的存在。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述病毒选自由以下组成的组：逆转录病毒、腺病毒、腺相关病毒、单纯疱疹病毒和牛痘病毒。3.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中逆转录病毒是慢病毒。4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中步骤a)中每个单独的细胞培养物等分试样的最大水体积选自：11ml、10ml、5ml或3ml。5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中在步骤c)期间所有等分试样的总体积减少至少50％。6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述测试样品包含病毒颗粒或生产终末细胞。7.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述病毒允许细胞是非贴壁的。8.根据权利要求7所述的方法，其中所述病毒允许细胞选自：a)永生化T细胞系，任选地其中所述细胞选自Jurkat、CEM
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SS、PM1、Molt4、Molt4.8、SupT1、MT4或C8166细胞；或b)非T细胞系，任选地其中所述细胞选自HEK293或92BR细胞。9.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中步骤a)的所述多个单独的细胞培养物等分试样的总体积为至少约115ml。10.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中步骤a)中所述多个单独的细胞培养物等分试样的初始接种密度在总计约1x105个细胞/ml至总计约1x107个细胞/ml的范围内。11.根据权利要求10所述的方法，其中步骤a)中所述多个单独的细胞培养物等分试样的初始接种密度在总计约1x106个细胞/ml至总计1x107个细胞/ml的范围内。12...

【专利技术属性】
技术研发人员：塞谬尔，
申请(专利权)人：牛津生物医学英国有限公司，
类型：发明
国别省市：