一种易感基因SNP位点检测方法及试剂盒技术

本发明专利技术涉及基因工程领域，提供了一种易感基因SNP位点检测方法及试剂盒。所述方法包括以下步骤：A.利用特异性引物对对待测样本进行非单分子扩增，将扩增产物可寻址的固定在固相载体上；B.对固定在固相载体上的扩增产物中的易感基因待测SNP位点进行测序，确定其基因型。所述试剂盒包括用于通过非单分子扩增获得含易感基因待测SNP位点的核酸片段的特异性引物对和用于可寻址固定含易感基因待测SNP位点的核酸片段的固相载体。本发明专利技术的方法和试剂盒能够避免不同探针之间的相互干扰，提高了对易感基因SNP位点检测的通量。

【技术实现步骤摘要】
一种易感基因SNP位点检测方法及试剂盒
本专利技术涉及基因工程领域，更具体地说，涉及一种易感基因SNP位点检测方法及试剂盒。
技术介绍
单核苷酸多态性（SingleNucleotidePolymorphism，SNP）是指基因组内DNA中某一特定核苷酸位置上存在转换、颠换、插入、缺失等变化。目前，国内外已有的易感基因SNP位点检测方法有sanger测序法、基于芯片技术的SNP分型方法、等位基因特异性扩增法（AmplificationRefractoryMutationSystemRealTimePCR，ARMS-RTPCR）和Taqman荧光探针法等。其中，基于芯片技术的SNP分型方法因为能够同时检测多个SNP位点，通量相对较高等优点最为常用，其原理是将大量的探针分子固定在支持物上，然后使这些探针与带标记的样品分子进行杂交，并在除去未结合的分子后，通过检测每个探针分子的杂交信号强度，即每个探针分子所结合的样品分子的标记的信号强度，来判断样品分子的SNP情况。但是这种方法对探针的设计要求高，容易出现高背景值，特别是在同时进行多个易感基因的多个SNP位点检测时，不同探针之间的相互干扰现象本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种易感基因SNP位点检测方法，其特征在于，包括以下步骤：A.利用特异性引物对对待测样本进行非单分子扩增，将扩增产物可寻址的固定在固相载体上；B.对固定在固相载体上的扩增产物中的易感基因待测SNP位点进行测序，进而确定易感基因待测SNP位点的基因型。

【技术特征摘要】
1.一种易感基因SNP位点检测方法，其特征在于，包括以下步骤：A.利用特异性引物对对待测样本进行非单分子扩增，将扩增产物可寻址的固定在固相载体上；B.对固定在固相载体上的扩增产物中的易感基因待测SNP位点进行测序，进而确定易感基因待测SNP位点的基因型；所述测序方法为第二代高通量基因测序技术。2.根据权利要求1所述的易感基因SNP位点检测方法，其特征在于，所述扩增产物通过微球间接的可寻址固定在固相载体上。3.根据权利要求2所述的易感基因SNP位点检测方法，其特征在于，所述步骤A包括以下步骤：A1、利用特异性引物对对待测样本进行非单分子扩增，得扩增产物；A2、将扩增产物与接头连接，得连接产物；A3、将连接产物固定在微球上，然后将微球可寻址的固定在固相载体上；所述特异性引物对中，仅用于扩出易感基因待测SNP位点所在链的引物的5’端含有磷酸基团。4.根据权利要求2所述的易感基因SNP位点检测方法，其特征在于，所述步骤A包括以下步骤：A1、利用特异性引物对对待测样本进行非单分子扩增，得扩增产物；A2、将扩增产物与固定在微球上的接头连接，在连接过程中，使整个连接反应体系周期性震荡，得被固定在微球上的连接产物；A3、将固定有连接产物的微球可寻址的固定在固相载体上。5.根据权利要求2所述的易感基因SNP位点检测方法，其特征在于，所述步骤A包括以下步骤：A1、利用特异性引物对对待测样本进行非单分子扩增，得固定在微球上的扩增产物；所述特异性引物对中仅有一种引物被预先固定在微球上，在扩增反应过程中，使整个扩增反应体系周期性震荡；A2、将固定有扩增产物的微球可寻址的固定在固相载体上。6.根据权利要求1至5中任一项所述的易感基因SNP位点检测方法，其特征在于，所述待测样本有多个；所述易感基因待测SNP位点有多个；所述步骤A为：利用多种特异性引物对分别对多个待测样本进行非单分子扩增，得多种不同待测样本来源的含不同易感基因待测SNP位点的扩增产物，进而将这些扩增产物分别可寻址的固定在固相载体上；所述多种不同待测样本来源的含不同易感基因待测SNP位点的扩增产物均连有标签序列；所述标签序列用于识别不同的待测样本和易感基因待测...

【专利技术属性】
技术研发人员：盛司潼，
申请(专利权)人：深圳华因康基因科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44