一种沉默人乳腺癌特异基因的shRNA制造技术

本发明专利技术公开了一种沉默人乳腺癌特异基因的shRNA，其正义链序列如序列表SEQ?NO.1所示，其反义链序列如序列表SEQ?NO.2所示。本发明专利技术所述的shRNA是通过对人乳腺癌特异基因(breast?cancer?special?gene1，BCSG1)的mRNA序列设计、合成并构建了shRNA表达载体，通过功能性实验验证，得到了有效抑制肿瘤细胞BCSG1表达的shRNA。本发明专利技术还公开了所述shRNA的应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分子生物学领域，涉及一种shRNA的构建及应用。具体而言，本专利技术针对人乳腺癌特异基因(breast cancer special gene I, BCSG1)的核苷酸序列设计合成shRNA，所述shRNA转入乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞后能抑制所述肿瘤细胞的BCSGl基因的表达。
技术介绍
乳腺癌特异基因(breast cancer special genel,BCSGl)则是一种特异的在乳腺癌中有选择性表达的新基因，是1997年用cDNA直接测序法发现的乳腺癌相关基因，定位于染色体10q23，转录mRNA全长约10Kb，含5个外显子，有一 38Ibp的开放读码框架，编码一127个氨基酸的多肽链。BCSGl基因与1998年Lavedan等确认的SNCs家族新成员SNCG几乎为同一基因，因此又可称为SNCG, persyrioBCSGl是一种特异的在乳腺癌中有选择性表达的新基因，BCSGl对乳腺癌的进展起明显促进作用，BCSGl呈阳性表达的乳腺癌有更多浸润和转移倾向；前期研究发现，BCSGl可作为“三阴性”乳腺癌亚型治疗和预后的评估因子。乳腺癌细胞的侵袭转移本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种shRNA，包括正义链和反义链，其特征在于，所述正义链的核苷酸序列如序列表SEQ?NO.1所示，所述反义链的核苷酸序列如序列表SEQ?NO.2所示。

【技术特征摘要】
1.一种shRNA，包括正义链和反义链，其特征在于，所述正义链的核苷酸序列如序列表SEQ N0.1所示,所述反义链的核苷酸序列如序列表SEQ N0.2所示。2.权利要求1所述的shRNA在制备降低细胞BCSGlmRNA试剂中的应用。3.权利要求1所述的shRNA在制备抑制细胞BCSGl蛋白表达试剂中的应用。4.一种降低细胞BCSGl表达的方法，具体步骤如下: (1)转染前一天，以合适的细胞密度接种到6cm培养皿中，转染时，细胞要达到90%的融合度。(2)转染前每个孔弃调旧的培养基，加入5ml不含双抗5%FB...

【专利技术属性】
技术研发人员：何劲松，陈伟财，叶伟亮，袁梓膳，王坤，李国劲，
申请(专利权)人：何劲松，
类型：发明
国别省市：