一种调控人参皂苷积累的PDR转运蛋白基因启动子及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种可以调控人参皂苷积累的PDR转运蛋白基因启动子及其应用，该启动子ProPDR1的DNA序列如SEQIDNo.1所示，或是与SEQIDNo.1具有99%以上同源性的DNA序列。本发明专利技术采用基因组步移技术(Genomewalker)克隆得到PgPDR1转运蛋白基因启动子序列，该序列包含TCA元件和TCCACCT-Motif。本发明专利技术构建启动子表达载体pBI121-ProPDR1::GUS，在启动子ProPDR1的驱动下，报告基因GUS在转基因烟草中可较强地受人参皂苷、水杨酸、茉莉酸甲酯和脱落酸的调控，表明该启动子启动的人参PgPDR1基因表达与人参皂苷的积累密切相关。因此，本发明专利技术提供的启动子，在药用植物次生代谢产物的合成与积累调控的基因工程中具有十分重要的应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物基因工程
，具体涉及一个可以调控人参皂苷积累的TOR转运蛋白基因的启动子。
技术介绍
人参0°.ginseng C.A.Meyer)为五加科人参属多年生草本植物,是名贵中药材。人参中含有多种药用成分，其中人参皂苷是人参最主要的活性成分。目前已从人参根中分离出50余种人参皂苷，现代医学研究证明各皂苷单体具有重要的药用价值，且已广泛应用于临床。但是其中一些具有抗肿瘤、抗衰老、抑制细胞凋亡和增强免疫力等活性强的皂苷含量极低。利用人参皂苷合成代谢相关的基因调控技术促进人参皂苷的合成与积累具有重要的理论价值和应用前景。基因的有效转录和表达是发挥其基因功能的重要条件，基因成功转录和表达需要依靠启动子对其的调控，启动子与RNA聚合酶、转录调控因子等相互作用发挥其调控的功能。真核生物中的TATA和CAAT框，它们决定了转录的起始位点和效率，负责和RNA聚合酶结合，启动基本转录过程。启动子组件有许多不同的类型，包括病原诱导型作用元件、组织特异型作用元件和化学诱导作用元件等。其中化学物质诱导型作用元件在促进次生代谢产物合成方面起重要作用。在次生代谢产物合成与积累相关基因的表达过本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种人参皂苷积累的PDR转运蛋白基因启动子，其特征在于，所述的启动子的DNA序列如SEQ?NO.1所示，或是与SEQ?ID?NO.1具有99%以上同源性的DNA序列。

【技术特征摘要】
1.一种人参皂苷积累的roR转运蛋白基因启动子，其特征在于，所述的启动子的DNA序列如SEQ N0.1所示，或是与SEQ ID N0.1具有99%以上同源性的DNA序列。2.根据权利要求1所述的启动子的制备方法，其特征在于依次包括以下步骤:(1)提取人参根基因组总DNA，以人参根总DNA为模板，构建四个启动子文库'Dral文库、V文库、Pvu II文库和I文库；(2)分别以构建的文库、V文库、II文库和Stu I文库为模板，根据人参作/Wl基因的5'端序列设计引物，进行PCR扩增；(3)胶回收PCR产物，该产物即得本发明所述的启动子ProPDRl。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于:所述步骤(2)中根据人参基因的5'端序列设计的引物为一个引物对:外侧引物和巢式引物，外侧引物如SEQ ID N0.2所示，巢式引物如SEQ ID N0.3所示。4.有权利要求1所述启动子的重组载体，其特征在于:所述重组载体为pBI121-ProroRl::⑶S，其中空载体为ρΒΙ121载体，在ProPDRl启动子的下游连接⑶S报告基因。5.按权利要求4所述的重组载体的...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗志勇，张儒，黄景嘉，陈湘晖，罗俊，李继佳，
申请(专利权)人：中南大学，
类型：发明
国别省市：