【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
土壤中抗生素抗性基因的定量检测方法，其特征在于包括以下步骤：1)、选用经常服用抗生素的猪；提取上述猪的猪粪的基因组DNA，并以猪粪DNA为模板，采用PCR扩增目的抗性基因片段；2)、切胶回收纯化扩增后的目的抗性基因，将抗性基因连接在T载体上，然后转化感受态大肠杆菌细胞，涂LB平板后挑选阳性克隆子，用LB培养液培养；3)、用琼脂糖凝胶电泳检测扩大培养菌液的质量，选克隆成功的菌液提取质粒，检测质粒浓度，换算出质粒所携带抗性基因的拷贝数，并按10倍为稀释梯度稀释备用，作为抗性基因标准品；4)、提取土壤的基因组DNA，将土壤样品DNA和抗性基因标准品同时进行定量PCR扩增，根据抗性基因标准品的拷贝数和其扩增的CT值生成标准曲线，进而得出土壤样品的抗性基因的拷贝数。
【技术特征摘要】
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