用于病原体及相关抗生素抗性基因检测以进行诊断的种、属特异性和通用的探针及引物制造技术

公开了基于ＤＮＡ的、利用扩增引物或探针检测、鉴定和定量测定测试样品中下述来源的ＤＮＡ的方法：（ｉ）任何细菌，（ｉｉ）无乳链球菌、腐生葡萄球菌、屎肠球菌、脑膜炎奈瑟氏球菌、单核细胞增生利斯特氏菌和白假丝酵母，为（ｉｉｉ）链球菌、葡萄球菌、肠球菌、奈瑟氏球菌和假丝酵母各属的任何种类。也公开了基于ＤＮＡ的、利用扩增引物或探针检测、鉴定和定量测定测试样品中选自下述的抗生素抗性基因的方法：ｂｌａ↓［ｔｅｍ］、ｂｌａ↓［ｓｈｖ］、ｂｌａ↓［ｒｏｂ］、ｂｌａ↓［ｏｘａ］、ｂｌａＺ、ａａｄＢ、ａａｃＣ１、ａａｃＣ２、ａａｃＣ３、ａａｃ６’－ＩＩａ、ａａｃＡ４、ａａｄ（６’）、ｖａｎＡ、ｖａｎＢ、ｖａｎＣ、ｍｓｒＡ、ｓａｔＡ、ａａｃ（６’）－ａｐｈ（２”）、ｖａｔ、ｖｇａ、ｅｒｍＡ、ｅｒｍＢ、ｅｒｍＣ、ｍｅｃＡ、ｉｎｔ和ｓｕｌ。上述微生物种、属和抗性基因均是多种临床标本中临床相关的和常见的，这些基于ＤＮＡ的检测法比较快速、准确，可以用于临床微生物为实验室中进行常规诊断。这些新型方法应可用于提高微生物感染诊断的速度和准确度，因此可以达到更有效的治疗。也要求了用于（ｉ）细菌的通用检测和定量测定，和／或（ｉｉ）上述细菌和真菌种和／或属的检测，鉴定和定量测定，和／或（ｉｉｉ）上述抗生素抗性基因的检测，鉴定和定量测定的诊断试剂盒。（*该技术在2017年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

技术介绍
用于细菌鉴定和敏感性试验的传统方法在过去，通常是使用例如API20ETM系统(bioMe′rieux)等生物测试方法，根据细菌利用不同的底物作为碳和氮源的能力来鉴定细菌的。就敏感性试验来说，临床微生物学实验室使用的方法包括平板扩散、琼脂稀释和肉汤微量稀释法。虽然基于生物化学试验和抗菌敏感性试验的鉴定方法是有效的，但由于需要鉴定临床样品中的细菌及确定其对抗微生物药剂的敏感性而必须经过连续两次过夜培养，所以至少要用两天时间才能得到初步鉴定结果。为进行快速微生物鉴定和敏感性试验，已有一些市售的使用高级和贵重装置的自动检测系统(即Dade DiagnoticsCorp.的MicroScan系统和bioMe′rieux的Vitek系统)(Stager andDavis，临床微生物综述，5302-327)。这些系统需要较短的保温时间，因而可在不到6小时的时间内完成大多数细菌鉴定和敏感性试验。然而，这些快速系统总是需要首先将细菌分离成纯培养物，这一过程对于纯培养物要花费至少18小时，对于混合培养物则需2天时间。最快的鉴定系统是auto SCAN-Walk-AwayTM系统(Date Diga本文档来自技高网...

【技术保护点】
使用特异性、普遍适用并灵敏的探针和／或扩增引物从怀疑含有下述细菌和／或真菌核酸的任何样品中确定下列来源的核酸的存在和／或量的方法：－选自下列组中的抗生素抗性基因：ｂｌａ↓［ｔｅｍ］、ｂｌａ↓［ｓｈｖ］、ｂｌａ↓［ｒｏｂ］、ｂｌａ↓［ｏｘ ａ］、ｂｌａＺ、ａａｄＢ、ａａｃＣ１、ａａｃＣ２、ａａｃＣ３、ａａｃ６′－Ⅱａ、ａａｃＡ４、ａａｄ（６′）、ｖａｎＡ、ｖａｎＢ、ｖａｎＣ、ｍｓｒＡ、ｓａｔＡ、ａａｃ（６′）－ａｐｈ（２″）、ｖａｔ、ｖｇａ、ｅｒｍＡ、ｅｒｍＢ、ｅｒｍＣ、ｍｅｃＡ、ｉｎｔ和ｓｕｌ，以及－选自下列组中的特定细菌和真菌菌种：屎肠球菌、单核细胞增生利斯特氏菌、脑膜炎奈瑟氏球菌、无...

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：MG伯吉罗恩，FJ皮卡德，M奥莱特，PH罗伊，
申请(专利权)人：感染诊断IDI公司，
类型：发明
国别省市：CA[加拿大]