【技术实现步骤摘要】
西兰苔凝集素的制备方法与应用
本专利技术属于生物
，具体涉及西兰苔凝集素的制备方法与应用。
技术介绍
西兰苔，又称小小西兰花、芦笋型青花菜、青花笋，属十字花科芸薹属，由两种甘蓝类蔬菜西兰花与芥蓝杂交选育而成，因主要以肥嫩的花苔供食而得名。西兰花与芥蓝是蔬菜中公认的“抗癌”能手，而西兰苔集中了两者的优良性状，因此抗癌物质含量极高，同时还含有丰富的维生素A、B、E。据美国权威机构检测，其抗癌物质含量比普通蔬菜高出五到十倍，其抗肿瘤物质种类也多。凝集素(Lectin)是指一种糖蛋白或结合糖的蛋白，广泛存在于各种植物、无脊椎动物和高等动物中。大多数凝集素存在于植物的成熟种子中，但在叶、茎和根等组织器官中也有发现，它最大的特点是能够识别糖蛋白和糖脂，特别是细胞膜中复杂的糖链结构。凝集素对糖基的结合具有特异性，这可通过糖抑制试验进行研究，此特异性取决于凝集素中糖基结合位点的大小、形状、糖链中决定簇的位置等。凝集素具有细胞凝集能力，不仅能凝集红细胞，还能凝集肿瘤细胞，淋巴细胞，精子，细菌等。此外，凝集素还能识别并结合细菌、肿瘤细胞表面的糖结构，从而抑制它们的生...
【技术保护点】
西兰苔凝集素的制备方法，其特征在于，所述制备方法为：（1）将西兰苔粉碎后加入缓冲溶液调节pH值，低温保存，过滤，取滤液离心后取上清液，盐析，低温保存后离心去沉淀，将沉淀溶解透析冷冻干燥得到西兰苔凝集素粗品；（2）取步骤（1）所得西兰苔凝集素粗品溶解于缓冲液，离子交换层析，并梯度洗脱，收集第一个蛋白峰冻干保存，得到西兰苔凝集素样品；（3）取步骤（2）得到的西兰苔凝集素样品溶解于缓冲液中，再进行凝胶色谱葡聚糖凝胶Sephadex G‑75分离纯化，梯度洗脱，收集第一个蛋白峰冻干保存，得到西兰苔凝集素。
【技术特征摘要】
1.西兰苔凝集素的制备方法，其特征在于，所述制备方法为: (1)将西兰苔粉碎后加入缓冲溶液调节PH值，低温保存，过滤，取滤液离心后取上清液，盐析，低温保存后离心去沉淀，将沉淀溶解透析冷冻干燥得到西兰苔凝集素粗品； (2)取步骤(1)所得西兰苔凝集素粗品溶解于缓冲液，离子交换层析，并梯度洗脱，收集第一个蛋白峰冻干保存，得到西兰苔凝集素样品； (3)取步骤(2)得到的西兰苔凝集素样品溶解于缓冲液中，再进行凝胶色谱葡聚糖凝胶Sephadex G-75分离纯化，梯度洗脱，收集第一个蛋白峰冻干保存，得到西兰苔凝集素。2.根据权利要求1所述西兰苔凝集素的制备方法，其特征在于，具体步骤如下 (1)将西兰苔洗净，切碎，冻干后粉粹，得到干粉，准确称取干粉10~100g，加入100-500ml缓冲液，置于冰箱中，过滤，滤液离心后收集上清液，将上清液在搅拌条件下加入硫酸铵晶体至饱和度为10%~90%，于冰箱中过夜，离心取沉淀，将沉淀加入蒸馏水溶解后，置于透析袋中进行透析，冷冻干燥，即为西兰苔凝集素粗品； (2)称取步骤(1)得到的西兰苔凝集素粗品5(T300mg，溶解于0.5~5 ml，pH为6~9的Tris-HCl缓冲液，用DEAE Sephadex A-52离子交换层析，并用NaCl溶液梯度洗脱，调节流速为0.5 ml/min，每管收集8 min，收集具有凝血活性的第一个蛋白峰冻干保存，得到西兰苔凝集素样品；...
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