微波辅助反胶束分离纯化芸豆凝集素的方法技术

微波辅助反胶束分离纯化芸豆凝集素的方法，涉及一种凝集素的分离纯化方法。为了解决芸豆凝集素分离纯化倍率低、成本高、工艺多、时间长的问题，本发明专利技术提出的微波辅助反胶束分离纯化芸豆凝集素的方法为直接从芸豆凝集素水提液中分离纯化凝集素，包括前萃取过程和反萃取过程。本发明专利技术在微波辅助作用下，使芸豆中水溶性蛋白迅速溶入水提液，大大提高了溶解度，缩短了浸提时间。本发明专利技术基于液-液萃取原理，提高了萃取的选择性，可实现芸豆凝集素的高效前萃取和反萃取。应用反胶束萃取技术只需前萃取和反萃取两步即可达到较好的分离纯化效果，步骤简单，操作方便，与微波辅助集合可极大缩短前处理时间，节约成本。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种凝集素的分离纯化方法，尤其涉及一种使用反胶束萃取技术直接从水提液中分离纯化芸豆凝集素的方法。
技术介绍
凝集素(lectin或agglutinin)是一类具有糖专一'丨生,可与细胞表面特殊糖蛋白、糖脂的寡糖结构结合，促使细胞凝集或糖复合物沉淀的，非免疫来源的糖蛋白或糖结合蛋白。凝集素用途广泛，在生物化学研究中可用于含糖高分子的分离纯化和糖链结构的鉴定；在生物学研究中可专一识别细胞表面信号分子，用于选择突变细胞株、研究细胞机制和细胞表面特征及鉴定微生物；在免疫学研究中可促细胞有丝分裂，抑制肿瘤等恶性细胞的生长；在医学上可鉴定血型，诊断病变和作为载体分子使药物专一地靶向不同的细胞和组织。因此，凝集素在现代科研领域是一种重要的研究工具，凝集素的分离纯化具有极为诱人的科研价值和市场前景。凝集素的研究始于1888年Herman Stillmark偶然发现蓖麻毒素(Ricicn)。至今已发现的凝集素以植物凝集素类为主，近1000种，广泛分布于豆科、茄科、大戟科、禾木科、百合科和石蒜科等众多的植物类群中，其中以豆科植物中的凝集素种类最为丰富，目前已有600余种。我国大部分地区具本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种微波辅助反胶束分离纯化芸豆凝集素的方法，其特征在于所述方法为直接从芸豆凝集素水提液中分离纯化凝集素，包括前萃取过程和反萃取过程，具体步骤如下：（1）芸豆凝集素水提液制备：芸豆磨粉，过40～100目筛，溶于5～50体积倍水溶液中，10～60℃下微波辅助浸提5～60min，功率为150～800W，浸提后经8000～15000rpm、4℃离心10～20min，取上清液；（2）反胶束溶液配制：将表面活性剂加入到有机溶剂中，搅拌至表面活性剂完全溶解，加入一定的量的水，使体系Wo值处于15～35范围内，静置所得透明溶液即为反胶束溶液，其浓度为15～300mM；（3）前萃取过程：调节芸豆凝集素水提液pH...

【技术特征摘要】
1.一种微波辅助反胶束分离纯化芸豆凝集素的方法，其特征在于所述方法为直接从芸豆凝集素水提液中分离纯化凝集素，包括前萃取过程和反萃取过程，具体步骤如下: (1)芸豆凝集素水提液制备:芸豆磨粉，过40 100目筛，溶于5 50体积倍水溶液中，10 60°C下微波辅助浸提5 60min，功率为150 800W，浸提后经8000 15000rpm、4°C离心10 20min,取上清液； (2)反胶束溶液配制:将表面活性剂加入到有机溶剂中，搅拌至表面活性剂完全溶解，加入一定的量的水，使体系W。值处于15 35范围内，静置所得透明溶液即为反胶束溶液，其浓度为15 300mM ； (3)前萃取过程:调节芸豆凝集素水提液pH值为4.0 10.0，离子强度为20 200mM，将芸豆凝集素水提液与反胶束溶液按照体积比为1:1 1:50的比例混合5 40min后，1500 5000rpm离心分层，取上层有机相； (4)反萃取过程:将上述上层有机相与具有一定离子强度的反萃缓冲溶液按照体积比为1:1 1:50的比例混合5 40min后，1500 5000rpm离心分层,取下层水相,经除盐、冷冻干燥，得到分离纯化后的芸豆凝集素。2.根据权利要求1所述的微波辅助反胶束分离纯化芸豆凝集素的方法，其特征在于所述芸豆种类为红芸豆、红花芸豆、奶花芸豆、黑芸豆、白芸豆或黄芸豆。3.根据权利要求1所述的微波辅助反胶束分离纯化芸豆凝集素的方法，其特征在于所述水溶液为蒸馏水、生理盐水、磷酸盐缓冲溶液或Tris-HCl缓冲溶液，水溶液pH值为6.0 8.0，缓冲溶液...

【专利技术属性】
技术研发人员：马莺，何述栋，李琳，何胜华，王超，
申请(专利权)人：哈尔滨工业大学，
类型：发明
国别省市：