【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种人表皮生长因子的制备和纯化方法,其特征在于,包括以下步骤:(a) 构建重组质粒pBSAZ 1.1 myc‑His6:提取质粒pcDNA3.1(+)/myc‑His A,经限制性内切酶Bgl II和Stu I双酶切处理,得到3392bp的片段;提取质粒pSecTag2 A,经限制性内切酶Bgl II和Stu I双酶切处理,得到2186bp的片段;将3392bp片段与2186bp片段以体积比2:3的比例用连接酶连接;将连接产物转化大肠杆菌JM109感受态中,经过氨苄青霉素抗性筛选,挑取阳性克隆子,提取质粒并进行限制性内切酶Bgl II和Stu I双酶切鉴定,得到重组质粒pBSAZ 1.1 myc‑His6;(b) 构建重组质粒pBSAZ 1.1 myc‑His6‑SUMO‑hEGF:提取重组质粒pBSAZ 1.1 myc‑His6,经限制性内切酶BamH I和Xho I酶切,得到5525bp的片段,酶切产物纯化后,加去磷酸化酶做去磷酸化处理;提取含hEGF基因片段的质粒pMD18‑T‑His6‑SUMO‑hEGF,经限制性内切酶BamH I和Xho I酶切得到486bp的hEGF基因片 ...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:王喆明,郑学明,张宏波,马经纬,
申请(专利权)人:杭州拜善晟生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:浙江;33
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