用于鼓膜愈合的肝素结合表皮生长因子活性的调节制造技术

本发明专利技术提供了用于通过调节HB-EGF活性产生或治疗慢性鼓膜穿孔的组合物和方法。在本发明专利技术的方法中，将慢性穿孔的鼓膜与有效剂量的肝素结合表皮生长因子HB-EGF或具有HB-EGF活性的试剂局部接触足以提供改善的膜穿孔的愈合的一段时间。在一些实施方案中，在持续释放制剂中提供HBEGF的剂量；在其它实施方案中，提供非持续释放制剂的定期施用。在一些实施方案中，持续释放制剂是可生物降解的。在其它实施方案中，通过装置例如泵或其它释放装置提供持续释放。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】专利技术背景鼓膜(TM)穿孔最常见地因中耳炎或创伤而产生。临床上，TM穿孔的最常见表现是传导性听觉丧失和慢性感染。TM穿孔的最常见原因是感染。与非复杂型急性中耳炎相关的穿孔通常很小；一旦感染消退后大部分自行愈合。另外，大的穿孔可由引起坏死的生物体感染引起。耳的创伤是TM穿孔的其它主要原因。损伤的常见原因为钝性与穿透性创伤、快速气压变化(气压伤)和过度声压。损伤后，已知组织经历愈合的几个阶段。虽然鼓膜的伤口愈合包括与常规皮肤愈合相似的最初的止血和发炎阶段，但鼓膜增殖和移行阶段与其它组织的增殖和移行阶段截然不同。在大多数伤口愈合情形中，肉芽组织床形成，其用作在其上发生上皮再形成的平台。在鼓膜的愈合中，这些事件以相反的方式发生。鳞状上皮层最初形成横跨伤口的桥，只有这样随后才进行纤维组分的再形成。TM是独特的，因为表皮层在移行中起着至关重要的起始作用，基底增殖层控制该过程。大多数鼓膜穿孔自发愈合；然而，许多因素可延缓或阻止闭合，从而导致慢性穿孔。持久性穿孔通常在削弱修复过程的持续感染的背景中发生。在这些情况下，膜的再生性愈合过程被阻挠，从而阻止趋化作用和随后横跨伤口的上皮移行。在组织学上，在慢性穿孔中，鳞状上皮在穿孔边缘之上生长至接触TM的中间粘膜层。用于慢性TM穿孔的治疗将慢性中耳炎的治疗或预防以及听力的恢复包括作为目标。常规疗法包括组织移植瓣的使用，例如用于鼓室成形术的自体移植可使用颞肌膜作为自体移植物。可使用由胶原基质中的成纤维细胞组成的颞浅筋膜。尽管利用自体结缔组织移植物的鼓室成形术是用于持久性TM穿孔的修复的高度成功的方法，但可有益地开发不需要显微手术技能，不太昂贵并且可在诊室环境中应用的方法。本专利技术解决了此需求。出版物SantaMaria等(2010)JMolHistol.2010年12月；41(6):309-14.SantaMaria(2011)Thesis,UniversityofWesternAustralia。Johnson和Wang(2013)JControlRelease166(2):124-9。Ishihara等(2003)JBiomedMaterResA.64(3):551-9。Tolino等(2011)BiochimBiophysActa.1810(9):875-8；Shirakata等(2005)JCellSci.118(Pt11):2363-70；Hüttenbrink(2005)HNO53(6):515-6；Ma等(2002)ActaOtolaryngol.122(6):586-99。WO2007/037514。US2010/0222265专利技术概述提供了用于治疗慢性鼓膜穿孔的组合物和方法。在本专利技术的方法中，将慢性穿孔的鼓膜与有效剂量的肝素结合表皮生长因子HB-EGF或具有HB-EGF活性的试剂局部接触足以提供改善的膜穿孔的愈合的一段时间。在一些实施方案中，在持续释放制剂中提供HB-EGF的剂量；在其它实施方案中，提供非持续释放制剂的定期施用。在一些实施方案中，持续释放制剂是可生物降解的。在其它实施方案中，通过装置例如泵或其它释放装置提供持续释放。将待处理的TM与HB-EGF接触足以改善TM穿孔的愈合(即导致穿孔的基本上闭合，例如达到面积小于约0.1mm2的穿孔)的一段时间。闭合可通过目视(包括利用显微)、通过功能(例如听力损失的减少)等来监测；与HB-EGF接触的时期可以是至少1天、至少3天、至少5天、至少7天、至少10天、至少2周、至少3周；并且可根据个体的需要达到1天、达到3天、达到5天、达到7天、达到10天、达到2周、达到3周或更长时间。在某些具体实施方案中，在无耳毒性持续释放制剂例如凝胶、泡沫、插入物等，优选地可生物降解制剂中提供有效剂量的HB-EGF。在一个此类实施方案中，在包含壳聚糖、聚乳酸和血纤蛋白原的凝胶中配制有效剂量的HB-EGF。在一个实施方案中，本专利技术包括这样的方法，该方法(i)鉴定具有TM的慢性穿孔的患者；(ii)将受累TM与有效剂量的HB-EGF(例如，以液滴的一些(以合适的间隔施用的)、以用于HB-EGF的持续释放的装置、以持续释放制剂等提供的)接触；和(iii)监测个体以确定穿孔的有效闭合的方法。本专利技术的另一个方面涉及具有HB-EGF活性的试剂在制造用于治疗TM的慢性穿孔的药物中的用途，其中以足以实现穿孔闭合的一段时间和剂量向具有TM的慢性穿孔的患者施用该药物。本专利技术的另一个方面提供了用于治疗TM的慢性穿孔的试剂盒。试剂盒包括例如以滴剂、装置、制剂等形式提供有效剂量的HB-EGF的制剂。试剂盒还包括递送装置，例如用于制剂的递送的滴耳器、注射器、用于递送两部分制剂的双筒注射器等。试剂盒还可包括使用说明书。在其它实施方案中，提供了用于鼓膜的临时打开，例如以进行管的插入等的方法。在此类实施方案中，将TM与有效剂量的HB-EGF抑制剂，包括但不限于EGFR配体脱落的抑制剂接触，进行足以在TM中产生小穿孔的一段时间。在一些此类实施方案中，可机械地产生小穿孔，随后与抑制剂接触。附图简述图1.在(a)第2天、(b)第14天、(c)第44天、(d)第90天(3个月)利用OSU8-1(EGFR配体脱落的抑制剂)处理的穿孔后TM的代表性图像。以蓝色描画穿孔的轮廓。图2.在于9只小鼠中对两个鼓膜进行手术穿孔后60天测量ABR和DPOAE阈值。一只耳朵未进行注射(对照)，然而将相对的耳朵充满壳聚糖、血纤蛋白原和聚交酯的聚合物递送媒介物。图3.在利用杜仲胶阻塞之前(a)和之后(b)的ET。通过使用具有0.5mm的钻孔器的雕刻装置打开大疱(bulla)来适应大鼠中的操作。侧边打开大疱允许杜仲胶在较少气道收缩的情况下下供ET。死后检查ET，从而确认完全阻塞。图4.ET阻塞的小鼠模型中的慢性穿孔的GF治疗。顶行(a)是显示愈合的穿孔的处理组的代表性图像。底行(b)是显示持久性穿孔(蓝色轮廓)的对照(仅聚合物)的代表性图像。注意：顶图中的一些TM已愈合且具有鼓室硬化。图5.经鼓膜生长因子递送。图6.经鼓膜生长因子递送。图7.经鼓膜生长因子递送。图8.鼓室内生长因子递送。图9.邻近鼓膜的药物递送媒介物。图10.可流动的药物递送制剂。当与附图结合起来时，通过参考下列详细描述将更好地理解本专利技术的特性和许多其它有利方面。实施方案的详述在进一步描述主题专利技术之前，应理解本专利技术不限于下述专利技术的特定实施方案，如可产生特定实施方案的变型本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种在个体中改善慢性鼓膜穿孔的愈合的方法，所述方法包括：将慢性鼓膜穿孔的部位与包含有效剂量的提供肝素结合表皮生长因子(HB‑EGF)活性的试剂接触，持续足以基本上闭合所述穿孔的一段时间。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2013.05.15 US 61/823,7491.一种在个体中改善慢性鼓膜穿孔的愈合的方法，所述方法包括：
将慢性鼓膜穿孔的部位与包含有效剂量的提供肝素结合表皮生长因子(HB-EGF)活
性的试剂接触，持续足以基本上闭合所述穿孔的一段时间。
2.根据权利要求1所述的方法，其中提供HB-EGF活性的试剂是HB-EGF蛋白的
可溶性形式。
3.根据权利要求2所述的方法，其中所述个体是人，并且所述HB-EGF是人
HB-EGF。
4.根据权利要求1所述的方法，其中将包含有效剂量的HB-EGF的制剂与所述受累
鼓膜接触，持续至少7天的时期。
5.根据权利要求1所述的方法，其中将包含有效剂量的HB-EGF的制剂与所述受累
鼓膜接触，持续至少2周的时期。
6.根据权利要求4或5所述的方法，其中至少每天施用一次所述制剂。
7.根据权利要求4或5所述的方法，其中所述制剂提供所述HB-EGF的持续释放。
8.根据权利要求1所述的方法，其中以水溶液、凝胶、洗剂、香膏、糊剂或其它媒
介物形式提供所述制剂。
9.根据权利要求1所述的方法，其中通过喷雾施用所述组合物。
10.根据权利要求1所述的方法，其中以液体形式施用组合物，所述组合物随后固
化以停留在所述鼓膜附近。
11.根据权利要求1所述的方法，其中所述制剂是包含交联的壳聚糖与聚交酯的共
聚物的持续释放凝胶。
12.根据权利要求1所述的方法，其中所...

【专利技术属性】
技术研发人员：彼得·卢克·桑塔·玛利亚，云志·彼得·杨，金圣宇，克洛伊·多明维尔刘易斯，
申请(专利权)人：小利兰·斯坦福大学托管委员会，
类型：发明
国别省市：美国;US