抗表皮生长因子受体(EGFR)抗体制造技术

本发明专利技术提供了抗表皮生长因子受体(EGFR)抗体、无糖基化CDR‑H2抗EGFR抗体及其抗原结合片段。本发明专利技术还提供了编码抗EGFR抗体或其抗原结合片段的分离的核酸分子，相关表达载体及宿主细胞。本发明专利技术提供了制备抗表皮生长因子受体(EGFR)抗体、无糖基化CDR‑H2抗EGFR抗体及其抗原结合片段的方法。本发明专利技术还提供了相关药物组合物及其用于治疗对象的方法。

Anti epidermal growth factor receptor (EGFR) antibody

The present invention provides anti epidermal growth factor receptor (EGFR) antibody and non glycosylated CDR H2 anti EGFR antibodies and antigen binding fragments thereof. The present invention also provides isolated nucleic acid molecules encoding anti EGFR antibodies or their antigen binding fragments, related expression vectors, and host cells. The present invention provides a process for the preparation of anti epidermal growth factor receptor (EGFR) antibody, no sugar binding fragment of CDR method H2 anti EGFR antibody and antigen. The present invention also provides related pharmaceutical compositions and methods for treating them.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗表皮生长因子受体(EGFR)抗体相关申请的交叉参考本申请要求2014年5月30日申请的美国临时申请系列号62/005,887的优先权，其全部内容并入本文作参考。专利技术背景表皮生长因子受体(也称作EGFR、ErbB-1和HER1)是ErbB受体家族的一种细胞表面受体，ErbB受体家族是由四种密切相关的受体酪氨酸激酶组成的亚家族，包括EGFR(ErbB-1)、HER2/c-neu(ErbB-2)、Her3(ErbB-3)和Her4(ErbB-4)。EGFR与配体(如表皮生长因子(EGF)、转化生长因子a(TGFα)、HB-EGF、双调蛋白、β细胞素/BTC、上皮细胞有丝分裂蛋白(epigen)/EPGN或其它)的结合在EGFR的C末端结构域中诱导一些酪氨酸(Y)残基(Y992、Y1045、Y1068、Y1148和Y1173)的受体二聚体化及自身磷酸化。这种自身磷酸化引发包括MAPK、Akt和JNK途径在内的一些信号转导级联的下游激活，导致细胞迁移、粘附和细胞增殖。EGFR或家族成员的突变、扩增或误调节涉及全部上皮细胞癌的大约30％。例如，导致EGFR过表达或过度反应性的突变与许多癌症相关，包括肺癌、肛门癌、头颈癌及多形性成胶质细胞瘤。EGFR被鉴别为癌基因导致需要开发针对EGFR的抗癌治疗剂。本专利技术满足了这一需求及其它需求。专利技术概述本专利技术提供了抗表皮生长因子受体(EGFR)抗体或其抗原结合片段，其包含重链可变结构域序列和轻链可变结构域序列，所述重链可变结构域序列包含(1)CDR-H1，其包含氨基酸序列N/T/Q-YGVH(SEQIDNO:4)，(2)CDR-H2，其包含氨基酸序列Y-N/A/G/D-T/D/N-P/K/E-FTSRF(SEQIDNO:9)及(3)CDR-H3，其包含氨基酸序列T/D-Y/L-YDY-E/N-FAY(SEQIDNO:14)；所述轻链可变结构域序列包含(1)CDR-L1，其包含氨基酸序列I-G/R/S-T/L/P-NIH(SEQIDNO:20)，(2)CDR-L2，其包含氨基酸序列KY-A/G-SE-S/T-I-S/R(SEQIDNO:24)及(3)CDR-L3，其包含氨基酸序列NWPT-T/L/S/A/Y(SEQIDNO:30)。在一些实施方案中，所述抗体包含重链可变结构域序列和轻链可变结构域序列，所述重链可变结构域序列包含(1)CDR-H1，其包含选自SEQIDNO:1-3的氨基酸序列，(2)CDR-H2，其包含选自SEQIDNO:5-8的氨基酸序列及(3)CDR-H3，其包含选自SEQIDNO:10-13的氨基酸序列；所述轻链可变结构域序列包含(1)CDR-L1，其包含选自SEQIDNO:15-19的氨基酸序列，(2)CDR-L2，其包含选自SEQIDNO:21-23的氨基酸序列，(3)CDR-L3，其包含选自SEQIDNO:25-29的氨基酸序列。在根据(或者适合于)上述任何实施方案的一些实施方案中，所述抗体包含重链可变结构域序列和轻链可变结构域序列，所述重链可变结构域序列包含(1)CDR-H1，其包含氨基酸序列NYGVH(SEQIDNO:1)，(2)CDR-H2，其包含氨基酸序列YNTPFTSRF(SEQIDNO:5)及(3)CDR-H3，其包含氨基酸序列TYYDYEFAY(SEQIDNO:10)；所述轻链可变结构域序列包含(1)CDR-L1，其包含氨基酸序列IGTNIH(SEQIDNO:15)，(2)CDR-L2，其包含氨基酸序列KYASESIS(SEQIDNO:21)及(3)CDR-L3，其包含氨基酸序列NWPTT(SEQIDNO:25)。在根据(或者适合于)上述任何实施方案的一些实施方案中，所述抗体包含重链可变结构域序列和轻链可变结构域序列，所述重链可变结构域序列包含(1)CDR-H1，其包含氨基酸序列NYGVH(SEQIDNO:1)，(2)CDR-H2，其包含氨基酸序列YNTPFTSRF(SEQIDNO:5)及(3)CDR-H3，其包含氨基酸序列DYYDYEFAY(SEQIDNO:11)；所述轻链可变结构域序列包含(1)CDR-L1，其包含氨基酸序列IGTNIH(SEQIDNO:15)，(2)CDR-L2，其包含氨基酸序列KYASESIS(SEQIDNO:21)及(3)CDR-L3，其包含氨基酸序列NWPTS(SEQIDNO:27)。在根据(或者适合于)上述任何实施方案的一些实施方案中，所述抗体包含重链可变结构域序列和轻链可变结构域序列，所述重链可变结构域序列包含(1)CDR-H1，其包含氨基酸序列NYGVH(SEQIDNO:1)，(2)CDR-H2，其包含氨基酸序列YGNEFTSRF(SEQIDNO:8)及(3)CDR-H3，其包含氨基酸序列DYYDYEFAY(SEQIDNO:11)；所述轻链可变结构域序列包含(1)CDR-L1，其包含氨基酸序列IGTNIH(SEQIDNO:15)，(2)CDR-L2，其包含氨基酸序列KYASESIS(SEQIDNO:21)及(3)CDR-L3，其包含氨基酸序列NWPTS(SEQIDNO:27)。在根据(或者适合于)上述任何实施方案的一些实施方案中，所述抗体包含重链可变结构域序列和轻链可变结构域序列，所述重链可变结构域序列包含(1)CDR-H1，其包含氨基酸序列NYGVH(SEQIDNO:1)，(2)CDR-H2，其包含氨基酸序列YATEFTSRF(SEQIDNO:7)及(3)CDR-H3，其包含氨基酸序列DYYDYEFAY(SEQIDNO:11)；所述轻链可变结构域序列包含(1)CDR-L1，其包含氨基酸序列IGTNIH(SEQIDNO:15)，(2)CDR-L2，其包含氨基酸序列KYASESIS(SEQIDNO:21)及(3)CDR-L3，其包含氨基酸序列NWPTS(SEQIDNO:27)。在根据(或者适合于)上述任何实施方案的一些实施方案中，所述抗体包含重链可变结构域序列和轻链可变结构域序列，所述重链可变结构域序列包含(1)CDR-H1，其包含氨基酸序列NYGVH(SEQIDNO:1)，(2)CDR-H2，其包含氨基酸序列YDDKFTSRF(SEQIDNO:6)及(3)CDR-H3，其包含氨基酸序列DYYDYEFAY(SEQIDNO:11)；所述轻链可变结构域序列包含(1)CDR-L1，其包含氨基酸序列IGTNIH(SEQIDNO:15)，(2)CDR-L2，其包含氨基酸序列KYASESIS(SEQIDNO:21)及(3)CDR-L3，其包含氨基酸序列NWPTS(SEQIDNO:27)。在根据(或者适合于)上述任何实施方案的一些实施方案中，所述抗体包含重链可变结构域序列和轻链可变结构域序列，所述重链可变结构域序列包含(1)CDR-H1，其包含氨基酸序列TYGVH(SEQIDNO:3)，(2)CDR-H2，其包含氨基酸序列YGNEFTSRF(SEQIDNO:8)及(3)CDR-H3，其包含氨基酸序列DYYDYEFAY(SEQIDNO:11)；所述轻链可变结构域序列包含(1)CDR-L1，其包含氨基酸序列IRTNIH(SEQIDNO:16)，(2)CDR-L2，其包含氨基酸序列KYGSESIS(SEQIDN本文档来自技高网...

【技术保护点】
抗表皮生长因子受体(EGFR)抗体或其抗原结合片段，其包含重链可变结构域序列及轻链可变结构域序列，所述重链可变结构域序列包含：(1)CDR‑H1，其包含氨基酸序列N/T/Q‑YGVH(SEQ ID NO:4)，(2)CDR‑H2，其包含氨基酸序列Y‑N/A/G/D‑T/D/N‑P/K/E‑FTSRF(SEQ ID NO:9)，及(3)CDR‑H3，其包含氨基酸序列T/D‑Y/L‑YDY‑E/N‑FAY(SEQ ID NO:14)；所述轻链可变结构域序列包含(1)CDR‑L1，其包含氨基酸序列I‑G/R/S‑T/L/P‑NIH(SEQ ID NO:20)，(2)CDR‑L2，其包含氨基酸序列KY‑A/G‑SE‑S/T‑I‑S/R(SEQ ID NO:24)，及(3)CDR‑L3，其包含氨基酸序列NWPT‑T/L/S/A/Y(SEQ ID NO:30)。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.05.30 US 62/005,8871.抗表皮生长因子受体(EGFR)抗体或其抗原结合片段，其包含重链可变结构域序列及轻链可变结构域序列，所述重链可变结构域序列包含：(1)CDR-H1，其包含氨基酸序列N/T/Q-YGVH(SEQIDNO:4)，(2)CDR-H2，其包含氨基酸序列Y-N/A/G/D-T/D/N-P/K/E-FTSRF(SEQIDNO:9)，及(3)CDR-H3，其包含氨基酸序列T/D-Y/L-YDY-E/N-FAY(SEQIDNO:14)；所述轻链可变结构域序列包含(1)CDR-L1，其包含氨基酸序列I-G/R/S-T/L/P-NIH(SEQIDNO:20)，(2)CDR-L2，其包含氨基酸序列KY-A/G-SE-S/T-I-S/R(SEQIDNO:24)，及(3)CDR-L3，其包含氨基酸序列NWPT-T/L/S/A/Y(SEQIDNO:30)。2.权利要求1的抗EGFR抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体包含重链可变结构域序列和轻链可变结构域序列，所述重链可变结构域序列包含(1)CDR-H1，其包含选自SEQIDNO:1-3的氨基酸序列，(2)CDR-H2，其包含选自SEQIDNO:5-8的氨基酸序列，及(3)CDR-H3，其包含选自SEQIDNO:10-13的氨基酸序列；所述轻链可变结构域序列包含(1)CDR-L1，其包含选自SEQIDNO:15-19的氨基酸序列，(2)CDR-L2，其包含选自SEQIDNO:21-23的氨基酸序列，(3)CDR-L3，其包含选自SEQIDNO:25-29的氨基酸序列。3.权利要求2的抗EGFR抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体包含重链可变结构域序列和轻链可变结构域序列，所述重链可变结构域序列包含(1)CDR-H1，其包含氨基酸序列NYGVH(SEQIDNO:1)，(2)CDR-H2，其包含氨基酸序列YNTPFTSRF(SEQIDNO:5)，及(3)CDR-H3，其包含氨基酸序列TYYDYEFAY(SEQIDNO:10)；所述轻链可变结构域序列包含(1)CDR-L1，其包含氨基酸序列IGTNIH(SEQIDNO:15)，(2)CDR-L2，其包含氨基酸序列KYASESIS(SEQIDNO:21)，及(3)CDR-L3，其包含氨基酸序列NWPTT(SEQIDNO:25)。4.权利要求2的抗EGFR抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体包含重链可变结构域序列和轻链可变结构域序列，所述重链可变结构域序列包含(1)CDR-H1，其包含氨基酸序列NYGVH(SEQIDNO:1)，(2)CDR-H2，其包含氨基酸序列YNTPFTSRF(SEQIDNO:5)，及(3)CDR-H3，其包含氨基酸序列DYYDYEFAY(SEQIDNO:11)；所述轻链可变结构域序列包含(1)CDR-L1，其包含氨基酸序列IGTNIH(SEQIDNO:15)，(2)CDR-L2，其包含氨基酸序列KYASESIS(SEQIDNO:21)，及(3)CDR-L3，其包含氨基酸序列NWPTS(SEQIDNO:27)。5.权利要求2的抗EGFR抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体包含重链可变结构域序列和轻链可变结构域序列，所述重链可变结构域序列包含(1)CDR-H1，其包含氨基酸序列NYGVH(SEQIDNO:1)，(2)CDR-H2，其包含氨基酸序列YGNEFTSRF(SEQIDNO:8)，及(3)CDR-H3，其包含氨基酸序列DYYDYEFAY(SEQIDNO:11)；所述轻链可变结构域序列包含(1)CDR-L1，其包含氨基酸序列IGTNIH(SEQIDNO:15)，(2)CDR-L2，其包含氨基酸序列KYASESIS(SEQIDNO:21)，及(3)CDR-L3，其包含氨基酸序列NWPTS(SEQIDNO:27)。6.权利要求2的抗EGFR抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体包含重链可变结构域序列和轻链可变结构域序列，所述重链可变结构域序列包含(1)CDR-H1，其包含氨基酸序列NYGVH(SEQIDNO:1)，(2)CDR-H2，其包含氨基酸序列YATEFTSRF(SEQIDNO:7)，及(3)CDR-H3，其包含氨基酸序列DYYDYEFAY(SEQIDNO:11)；所述轻链可变结构域序列包含(1)CDR-L1，其包含氨基酸序列IGTNIH(SEQIDNO:15)，(2)CDR-L2，其包含氨基酸序列KYASESIS(SEQIDNO:21)，及(3)CDR-L3，其包含氨基酸序列NWPTS(SEQIDNO:27)。7.权利要求2的抗EGFR抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体包含重链可变结构域序列和轻链可变结构域序列，所述重链可变结构域序列包含(1)CDR-H1，其包含氨基酸序列NYGVH(SEQIDNO:1)，(2)CDR-H2，其包含氨基酸序列YDDKFTSRF(SEQIDNO:6)，及(3)CDR-...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜伟东，林佩桦，
申请(专利权)人：上海复宏汉霖生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31