一种可去除随机整合的位点特异性整合载体及其构建方法和应用技术

技术编号:10090637 阅读:229 留言:0更新日期:2014-05-28 13:41
本发明专利技术公开了一种可去除随机整合的位点特异性整合载体及其构建方法和应用,包括pUC ori、attB序列和多克隆位点MCS,在attB序列上下游分别设有第一loxP序列和第一rox序列,CMV启动子连接在第一loxP序列的上游,负筛选基因与第一rox序列相连接,负筛选基因下游还连接有内核糖体结合位点IRES2,IRES2下游为荧光标记基因,荧光标记基因下游为MCS,MCS上下游分别设有第二rox序列和第二loxP序列,并且分别与第一rox序列和第一loxP序列方向相同,MCS下游为正筛选元件。本发明专利技术为在细胞筛选中提供剔除随机整合重组细胞而直接筛选出假attP位点特异整合的重组细胞的新的应用。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种可去除随机整合的位点特异性整合载体,其特征在于,包括pUC ori、attB序列和多克隆位点MCS,在attB序列上下游分别设有第一loxP序列和第一rox序列,CMV启动子连接在第一loxP序列的上游,负筛选基因与第一rox序列相连接,负筛选基因下游还连接有内核糖体结合位点IRES2,IRES2下游为荧光标记基因,荧光标记基因下游为MCS,MCS上下游分别设有第二rox序列和第二loxP序列,并且分别与第一rox序列和第一loxP序列方向相同,MCS下游为正筛选元件。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:张涌余源李仲夏佟琪王易之王勇胜刘军权富生郭泽坤
申请(专利权)人:西北农林科技大学杨凌科元克隆股份有限公司
类型:发明
国别省市:陕西;61

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