使用人源化抗‑BCMA嵌合抗原受体治疗癌症制造技术

本发明专利技术提供了用于治疗与BCMA的表达相关的疾病的组合物和方法。本发明专利技术还涉及对编码其的BCMA载体特异的嵌合抗原受体(CAR)和包含BCMA CAR的重组T细胞。本发明专利技术还包括施用表达CAR的遗传修饰的T细胞的方法，所述CAR包含BCMA结合结构域。

The use of humanized anti BCMA chimeric antigen receptor for treatment of cancer

The present invention provides compositions and methods for treating diseases related to the expression of BCMA. The invention also relates to a chimeric antigen receptor of BCMA vector encoding the specific (CAR) and BCMA CAR containing recombinant T cells. The present invention also includes methods for administering genetically modified T cells expressing CAR, the CAR comprising an BCMA binding domain.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】使用人源化抗-BCMA嵌合抗原受体治疗癌症本申请要求2014年11月6日提交的PCT申请号PCT/CN2014/090501和2014年7月21日提交的PCT申请号PCT/CN2014/082586的优先权。这些申请的全部内容通过引用并入本文。序列表本申请包含以ASCII格式电子提交的序列表，并且其全部内容通过引用并入本文。所述ASCII拷贝，创建于2015年7月15日，命名为N2067-7045WO3_SL.txt，大小为771,026字节。专利
本专利技术一般地涉及被工程化以表达嵌合抗原受体(CAR)的免疫效应细胞(例如，T细胞、NK细胞)用于治疗与B细胞成熟抗原蛋白(BCMA)的表达相关的疾病的用途。
技术介绍
B细胞成熟抗原(BCMA)是B细胞谱系的细胞表达的肿瘤坏死家族受体(TNFR)成员。BCMA表达在终末分化的B细胞上最高。BCMA参与介导浆细胞的存活以维持长期体液免疫力。最近，BCMA的表达与许多癌症，自身免疫性疾病和感染性疾病相关。具有增加的BCMA表达的癌症包括一些血液癌症，例如多发性骨髓瘤，霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤，各种白血病和胶质母细胞瘤。专利技术概述在第一方面，本专利技术的特征在于编码嵌合抗原受体(CAR)的分离的核酸分子，其中CAR包含抗体或抗体片段，其包括人抗-BCMA结合结构域或人源化抗-BCMA结合结构域，跨膜结构域和胞内信号传导结构域(例如，包含共刺激结构域和/或一级信号传导结构域的胞内信号传导结构域)。在一个实施方案中，CAR包含抗体或抗体片段，其包括本文所述的人抗BCMA结合结构域或本文所述的人源化抗-BCMA结合结构域，本文所述的跨膜结构域和本文所述的胞内信号传导结构域(例如，包含共刺激结构域和/或一级信号传导结构域的胞内信号传导结构域)。在一个实施方案中，编码的BCMA结合结构域(例如人或人源化抗-BCMA结合结构域)包含本文所述的人或人源化抗-BCMA结合结构域的一个或多个(例如全部三个)轻链互补决定区1(LCCDR1)，轻链互补决定区2(LCCDR2)和轻链互补决定区3(LCCDR3)和/或本文所述的抗-BCMA结合结构域的一个或多个(例如所有三个)重链互补决定区1(HCCDR1)、重链互补决定区2(HCCDR2)和重链互补决定区3(HCCDR3)，例如包含一个或多个，例如所有三个，LCCDR和一个或多个，例如所有三个HCCDR的人或人源化抗-BCMA结合结构域。在一个实施方案中，编码的人抗-BCMA结合结构域包含本文所述的轻链可变区(例如，表1中)和/或本文所述的重链可变区(例如表1中)。在一个实施方案中，编码的人源化抗-BCMA结合结构域包含SEQIDNO:271或273中提供的轻链可变区和/或SEQIDNO:271或273中提供的重链可变区。在一个实施方案中，编码的人抗-BCMA结合结构域是包含表1的氨基酸序列的轻链和重链的scFv。在一个实施方案中，编码的人源化抗-BCMA结合结构域是包含SEQIDNO:271或273的氨基酸序列的轻链和重链的scFv。在一个实施方案中，人或人源化抗-BCMA结合结构域(例如scFv)包含:轻链可变区，其包含具有表1或SEQIDNO:271或273中提供的轻链可变区的氨基酸序列的至少一个，两个或三个修饰(例如，取代，例如保守取代)但不超过30,20或10个修饰(例如，取代，例如保守取代)的氨基酸序列或与表1或SEQIDNO:271或273中的氨基酸序列具有95-99％同一性的序列；和/或重链可变区，其包含具有表1或SEQIDNO:271或273中提供的重链可变区的氨基酸序列的至少一个，两个或三个修饰(例如，取代，例如保守取代)但不超过30,20或10个修饰(例如，取代，例如保守取代)的氨基酸序列，或与表1的氨基酸序列具有95-99％同一性的序列。在一个实施方案中，编码的人抗-BCMA结合结构域包含选自SEQIDNO:39,SEQIDNO:40,SEQIDNO:41,SEQIDNO:42,SEQIDNO:43,SEQIDNO:44,SEQIDNO:45,SEQIDNO:46,SEQIDNO:47,SEQIDNO:48,SEQIDNO:49,SEQIDNO:50,SEQIDNO:51,SEQIDNO:52,SEQIDNO:53,SEQIDNO:129,SEQIDNO:130,SEQIDNO:131,SEQIDNO:132,SEQIDNO:133,SEQIDNO:134,SEQIDNO:135,SEQIDNO:136,SEQIDNO:137,SEQIDNO:138,SEQIDNO:139,SEQIDNO:140,SEQIDNO:141,SEQIDNO:142,SEQIDNO:143,SEQIDNO:144,SEQIDNO:145,SEQIDNO:146,SEQIDNO:147,SEQIDNO:148,和SEQIDNO:149的序列或与其具有95-99％同一性的序列。在一个实施方案中，编码的人源化抗-BCMA结合结构域包含选自SEQIDNO:271或SEQIDNO:273的序列或其具有95-99％同一性的序列。在一个实施方案中，编码的人或人源化抗-BCMA结合结构域包括(Gly4-Ser)n接头，其中n为1,2,3,4,5或6，优选3或4(SEQIDNO:26)。scFv的轻链可变区和重链可变区可以是例如以下方向的任一个:轻链可变区-接头-重链可变区或重链可变区-接头-轻链可变区。在其它实施方案中，编码的BCMA结合结构域包含表1或16中所列的任何BCMA重链结合结构域氨基酸序列的HCCDR1，HCCDR2和HCCDR3。在实施方案中，BCMA结合结构域还包含LCCDR1，LCCDR2和LCCDR3。在实施方案中，BCMA结合结构域包含表1或16中列出的任何BCMA轻链结合结构域氨基酸序列的LCCDR1，LCCDR2和LCCDR3。在一些实施方案中，编码的BCMA结合结构域包含表1或16中所列的任何BCMA轻链结合结构域氨基酸序列的LCCDR1，LCCDR2和LCCDR3中的一个，两个或全部，以及表1或16中所列的任何BCMA重链结合结构域氨基酸序列的HCCDR1,HCCDR2,和HCCDR3中的一个，两个或全部。在一个实施方案中，编码的抗-BCMA结合结构域包含本文所述的轻链可变区(例如，表16中)和/或本文所述的重链可变区(例如，表16中)。在一个实施方案中，编码的人源化抗-BCMA结合结构域包含SEQIDNO:259，SEQIDNO:260，SEQIDNO:261，SEQIDNO:262中提供的轻链可变区，和/或SEQIDNO:255，SEQIDNO:256，SEQIDNO:257，SEQIDNO:258中提供的重链可变区。在一个实施方案中，编码的抗-BCMA结合结构域是包含表16的氨基酸序列的轻链和重链的scFv。在一个实施方案中，人或人源化抗-BCMA结合结构域(例如scFv)包含:轻链可变区，其包含具有SEQIDNO:259，SEQIDNO:260，SEQIDNO:261，SEQIDNO:262中提供的轻链可变区的氨基酸序列的至少一个，两个或三个修饰(例如，取代，例如保守取代)但不超过30,20或10个本文档来自技高网...

【技术保护点】
编码嵌合抗原受体(CAR)的分离的核酸分子，其中所述CAR包含抗‑BCMA结合结构域(例如人或人源化抗‑BCMA结合结构域)，跨膜结构域和胞内信号传导结构域，并且其中所述抗‑BCMA结合结构域包含列于表1或16中的任一抗BMCA重链结合结构域氨基酸序列的重链互补决定区1(HC CDR1)，重链互补决定区2(HC CDR2)和重链互补决定区3(HC CDR3)。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.07.21 CN PCT/CN2014/082586;2014.11.06 CN PCT/1.编码嵌合抗原受体(CAR)的分离的核酸分子，其中所述CAR包含抗-BCMA结合结构域(例如人或人源化抗-BCMA结合结构域)，跨膜结构域和胞内信号传导结构域，并且其中所述抗-BCMA结合结构域包含列于表1或16中的任一抗BMCA重链结合结构域氨基酸序列的重链互补决定区1(HCCDR1)，重链互补决定区2(HCCDR2)和重链互补决定区3(HCCDR3)。2.权利要求1的分离的核酸分子，其中所述抗-BCMA结合结构域还包含列于表1或16中的任一抗BMCA轻链结合结构域氨基酸序列的轻链互补决定区1(LCCDR1)，轻链互补决定区2(LCCDR2)和轻链互补决定区3(LCCDR3)。3.权利要求2的分离的核酸分子，其中所述LCCDR1，LCCDR2和LCCDR3是表21,23或25所列的LCCDR序列。4.权利要求1-3的分离的核酸分子，其中所述HCCDR1，HCCDR2和HCCDR3是表20,22或24中所列的HCCDR序列。5.权利要求1-4中任一项的分离的核酸分子，其编码CAR，所述CAR包含:(i)表1中所列的任一轻链可变区的氨基酸序列；(ii)具有表1中提供的任一轻链可变区的氨基酸序列的至少一个，两个或三个修饰但不超过30,20或10个修饰的氨基酸序列；或(iii)与表1中提供的任一轻链可变区的氨基酸序列具有95-99％同一性的氨基酸序列。6.权利要求1-5中任一项的分离的核酸分子，其编码CAR，所述CAR包含:(i)表1中所列的任一重链可变区的氨基酸序列；(ii)具有表1中提供的任一重链可变区的氨基酸序列的至少一个，两个或三个修饰但不超过30,20或10个修饰的氨基酸序列；或(iii)与表1中提供的任一重链可变区的氨基酸序列具有95-99％同一性的氨基酸序列。7.权利要求1-6中任一项的分离的核酸分子，其编码CAR，所述CAR包含表1所列任一轻链可变区的氨基酸序列和表1所列任一重链可变区的氨基酸序列。8.前述权利要求中任一项的分离的核酸分子，其中所述编码的抗-BCMA结合结构域包含:(i)选自SEQIDNO:49,39-53,69-83,84-98,129-149,171-191,192-212,255-258,259-262,263-266,271,或273的氨基酸序列；(ii)具有对SEQIDNO:49,39-53,69-83,84-98,129-149,171-191,192-212.255-258,259-262,263-266,271,或273中任一项的至少一个，两个或三个修饰但不超过30,20或10个修饰的氨基酸序列；或(iii)与SEQIDNO:49,39-53,69-83,84-98,129-149,171-191,192-212.255-258,259-262,263-266,271,或273的任一个具有95-99％同一性的氨基酸序列。9.前述权利要求中任一项的分离的核酸分子，其中所述抗-BCMA结合结构域包含选自SEQIDNO:64,54-68,150-170,272,或274的核苷酸序列，或其具有95-99％同一性的序列。10.前述权利要求中任一项的分离的核酸分子，其中:(i)编码的CAR包括跨膜结构域，该跨膜结构域包含选自T细胞受体的α，β或ζ链，CD28,CD3ε,CD45,CD4,CD5,CD8,CD9,CD16,CD22,CD33,CD37,CD64,CD80,CD86,CD134,CD137和CD154的蛋白质的跨膜结构域；(ii)编码的跨膜结构域包含SEQIDNO:6的氨基酸序列，包含SEQIDNO:6的氨基酸序列的至少一个，两个或三个修饰，但不超过20个，10个或5个修饰的氨基酸序列，或与SEQIDNO:6的氨基酸序列具有95-99％同一性的序列；或(ii)编码跨膜结构域的核酸序列包含SEQIDNO:17的序列或其具有95-99％同一性的序列。11.前述权利要求中任一项的分离的核酸分子，其中所述编码的抗-BCMA结合结构域包含:(i)SEQIDNO:49的氨基酸序列；(ii)对SEQIDNO:49具有至少一个，两个或三个修饰但不超过30,20或10个修饰的氨基酸序列；或(iii)与SEQIDNO:49具有95-99％同一性的氨基酸序列。12.前述权利要求中任一项的分离的核酸分子，其中所述编码的抗-BCMA结合结构域通过铰链区连接至所述跨膜结构域。13.权利要求12的分离的核酸分子，其中:(i)所编码的铰链区包含SEQIDNO:2的氨基酸序列或其具有95-99％同一性的序列；或(ii)编码铰链区的核酸序列包含SEQIDNO:13的核苷酸序列或其具有95-99％同一性的序列。14.前述权利要求中任一项的分离的核酸分子，其中所述编码的共刺激结构域是从选自下组的蛋白质获得的功能信号传导结构域:MHCI类分子，TNF受体蛋白，免疫球蛋白样蛋白，细胞因子受体，整联蛋白，信号淋巴细胞活化分子(SLAM蛋白)，激活NK细胞受体，BTLA，Toll配体受体，OX40,CD2,CD7,CD27,CD28,CD30,CD40,CDS,ICAM-1,LFA-1(CD11a/CD18),4-1BB(CD137),B7-H3,CDS,ICAM-1,ICOS(CD278),GITR,BAFFR,LIGHT,HVEM(LIGHTR),KIRDS2,SLAMF7,NKp80(KLRF1),NKp44,NKp30,NKp46,CD19,CD4,CD8α,CD8β,IL2Rβ,IL2Rγ,IL7Rα,ITGA4,VLA1,CD49a,ITGA4,IA4,CD49D,ITGA6,VLA-6,CD49f,ITGAD,CD11d,ITGAE,CD103,ITGAL,CD11a,LFA-1,ITGAM,CD11b,ITGAX,CD11c,ITGB1,CD29,ITGB2,CD18,LFA-1,ITGB7,NKG2D,NKG2C,TNFR2,TRANCE/RANKL,DNAM1(CD226),SLAMF4(CD244,2B4),CD84,CD96(Tactile),CEACAM1,CRTAM,Ly9(CD229),CD160(BY55),PSGL1,CD100(SEMA4D),CD69,SLAMF6(NTB-A,Ly108),SLAM(SLAMF1,CD150,IPO-3),BLAME(SLAMF8),SELPLG(CD162),LTBR,LAT,GADS,SLP-76,PAG/Cbp,CD19a和与CD83特异性结合的配体。15.权利要求14的分离的核酸分子，其中所述编码的共刺激结构域包含SEQIDNO:7的氨基酸序列或具有SEQIDNO:7的氨基酸序列的至少一个，两个或三个修饰但不超过20,10或5个修饰的氨基酸序列，或与SEQIDNO:7的氨基酸序列具有95-99％同一性的序列。16.权利要求14的分离的核酸分子，其中所述编码共刺激结构域的核酸序列包含SEQIDNO:18的核苷酸序列或其具有95-99％同一性的序列。17.前述权利要求中任一项的分离的核酸分子，其中所述编码的胞内信号传导结构域包含4-1BB的功能信号传导结构域和/或CD3ζ的功能信号传导结构域。18.前述权利要求中任一项的分离的核酸分子，其中所述编码的胞内信号传导结构域包含SEQIDNO:7的氨基酸序列和/或SEQIDNO:9或SEQIDNO:10的序列；或具有SEQIDNO:7的氨基酸序列和/或SEQIDNO:9或SEQIDNO:10的氨基酸序列的至少一个，两个或三个修饰但不超过20,10或5个修饰的氨基酸序列，或与SEQIDNO:7的氨基酸序列和/或SEQIDNO:9或SEQIDNO:10的氨基酸序列具有95-99％同一性的序列。19.前述权利要求中任一项的分离的核酸分子，其中所述编码的胞内信号传导结构域包含SEQIDNO:7的序列和SEQIDNO:9或SEQIDNO:10的序列，其中包含胞内信号传导结构域的序列在相同的框中和作为单个多肽链表达。20.前述权利要求中任一项的分离的核酸分子，其中所述编码胞内信号传导结构域的核酸序列包含SEQIDNO:18的序列或其具有95-99％同一性的序列，和/或SEQIDNO:20或SEQIDNO:21的序列，或其具有95-99％同一性的序列。21.前述权利要求中任一项的分离的核酸分子，其还包含编码SEQIDNO:1的氨基酸序列的前导序列。22.前述权利要求中任一项的分离的核酸分子，其编码CAR，所述CAR包含:(i)SEQIDNOs:109,99-113,213-233,或267-270中任一个的氨基酸序列；(ii)对SEQIDNOs:109,99-113,213-233,或267-270中任一个具有至少一个，两个或三个修饰但不超过30,20或10个修饰的氨基酸序列；或(iii)与SEQIDNOs:109,99-113,213-233,或267-270中任一个具有95-99％同一性的氨基酸序列。23.前述权利要求中任一项的分离的核酸分子，其包含SEQIDNOs:124,114-128或234-254中任一个的核苷酸序列，或与SEQIDNOs:124,114-128或234-254中任一个具有95-99％同一性的核苷酸序列。24.由权利要求1-23中任一项的核酸分子编码的分离的多肽分子。25.一种分离的嵌合抗原受体(CAR)多肽，其中所述CAR包含抗体或抗体片段，所述抗体或抗体片段包括人抗-BCMA结合结构域，跨膜结构域和包含共刺激结构域和/或一级信号传导结构域的胞内信号传导结构域，并且其中所述抗-BCMA结合结构域包含列于表1或16中的任一抗-BCMA重链结合结构域氨基酸序列的重链互补决定区1(HCCDR1)，重链互补决定区2(HCCDR2)和重链互补决定区3(HCCDR3)。26.权利要求25的分离的CAR多肽，其中所述人抗BCMA结合结构域还包含列于表1或16中的任一抗-BCMA重链结合结构域氨基酸序列的轻链互补决定区1(LCCDR1)，轻链互补决定区2(LCCDR2)和轻链互补决定区3(LCCDR3)。27.权利要求24的分离的CAR多肽，其中所述LCCDR1，LCCDR2和LCCDR3是表21,23或25中所列的LCCDR序列。28.权利要求25-27中任一项的分离的CAR多肽，其中所述HCCDR1，HCCDR2和HCCDR3是表21,23或25所列的HCCDR序列。29.权利要求25-28中任一项的分离的CAR多肽，其包含:(i)表1中所列的任一轻链可变区的氨基酸序列；(ii)具有表1中提供的任一轻链可变区的氨基酸序列的至少一个，两个或三个修饰但不超过30,20或10个修饰的氨基酸序列；或(iii)与表1中提供的任一轻链可变区的氨基酸序列具有95-99％同一性的氨基酸序列。30.权利要求25-29中任一项的分离的CAR多肽，其包含:(i)表1中所列的任一重链可变区的氨基酸序列；(ii)具有表1中提供的任一重链可变区的氨基酸序列的至少一个，两个或三个修饰但不超过30,20或10个修饰的氨基酸序列；或(iii)与表1中提供的任一重链可变区的氨基酸序列具有95-99％同一性的氨基酸序列。31.权利要求25-30中任一项的分离的CAR多肽，其包含表1中所列的任一轻链可变区的氨基酸序列和表1中提供的任一重链可变区的氨基酸序列。32.权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：J·布罗格顿，E·崔，H·艾伯斯巴赫，D·格拉斯，H·于埃，C·H·琼，J·曼尼克，M·C·米伦，L·墨菲，G·普莱萨，C·理查森，M·鲁艾拉，R·辛格，王永强，吴期隆，
申请(专利权)人：诺华股份有限公司，宾夕法尼亚大学托管会，
类型：发明
国别省市：瑞士,CH