丙型肝炎病毒抗原抗体联合检测试剂盒及其检测方法技术

本发明专利技术公开了一种丙型肝炎病毒抗原抗体联合检测试剂盒，包括包被有HCV嵌合抗原及HCV单克隆抗体的微孔板、样品稀释液、HCV抗原抗体联合检测酶工作液、HCV抗体酶工作液、HCV抗原酶工作液、底物A液、底物B液、20倍浓缩洗涤液及终止液。本发明专利技术同时公开了本试剂盒中关键组份如HCV嵌合抗原及HCV单克隆抗体的微孔板、样品稀释液、酶工作液的稀释液的配制及其使用。本发明专利技术公开的试剂盒及其检测方法既可以同时检测HCV抗原和抗体，也可以单独检测丙型肝炎早期、急性感染期及在抗体产生之前或已经形成抗原-抗体复合物时HCV抗原的情况，或单独检测抗体产生后HCV抗体的情况，可用于HCV的早期检测及治疗评价，为指导临床提供重要的检测评价指标。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属免疫检测
，具体来说涉及一种丙型肝炎病毒(HCV)抗原抗体联合检测试剂盒及其检测方法。
技术介绍
丙型肝炎是由丙型肝炎病毒(hepatitis C virus, HCV)感染而引起的一种的全球性传染病。据估计，目前全世界有1.7亿丙肝病毒感染者，我国的丙肝感染率大约为3.2%，目前至少有4000 - 6000万丙肝患者。丙型肝炎的慢性化发生率明显高于乙型肝炎，且较乙型肝炎易早期出现肝硬化，导致肝癌，病死率较高，尤其是HCV的早期诊断对于筛查HCV的传染源、指导临床治疗和预后判断有重大意义。因此，有必要寻找一种简易的、准确的、价格低廉的和可以普遍推广的方法来实现对HCV的检测，对发展中国家尤其如此。HCV病毒属于黄病毒科，其基因组为单股RNA，约9.4kb，易变异。HCV基因组由一个大的开放阅读框(ORF)组成，编码10余种结构和非结构(NS)蛋白。编码一个3010?3033氨基酸的多聚蛋白，排列顺序为5' UTR-C2—El—E2—NS2—NS3—NS4—NS5—UTR,其中C为核心蛋白，El和E2为囊膜蛋白，NS为非结构蛋白.NS5B蛋白是RNA依赖本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种丙型肝炎病毒抗原抗体联合检测试剂盒，包含如下组份：包被有HCV嵌合抗原及HCV单克隆抗体的微孔板、样品稀释液、酶工作液、底物A液、底物B液、20倍浓缩洗涤液及终止液，其特征在于：所述微孔板制备时用含有离子表面活性剂和还原剂的包被缓冲液包被，其中离子表面活性剂选自十二烷基氨基丙酸、十二烷基二甲基胺乙内酯或溴化十六烷基三甲基铵（CTAB），还原剂选自半胱氨酸、二硫苏糖醇（DTT）、还原型谷胱甘肽或β?巯基乙醇，所述样品稀释液是含有还原剂、小鼠IgG和蛋白沉降剂硫酸铵的溶液，其中还原剂选自半胱氨酸、二硫苏糖醇（DTT）、还原型谷胱甘肽或β?巯基乙醇，所述酶工作液是包含有HCV抗原抗体联合检测酶工...

【技术特征摘要】
1.一种丙型肝炎病毒抗原抗体联合检测试剂盒，包含如下组份:包被有HCV嵌合抗原及HCV单克隆抗体的微孔板、样品稀释液、酶工作液、底物A液、底物B液、20倍浓缩洗涤液及终止液，其特征在于:所述微孔板制备时用含有离子表面活性剂和还原剂的包被缓冲液包被，其中离子表面活性剂选自十二烷基氨基丙酸、十二烷基二甲基胺乙内酯或溴化十六烷基三甲基铵(CTAB)，还原剂选自半胱氨酸、二硫苏糖醇(DTT)、还原型谷胱甘肽或β-巯基乙醇，所述样品稀释液是含有还原剂、小鼠IgG和蛋白沉降剂硫酸铵的溶液，其中还原剂选自半胱氨酸、二硫苏糖醇(DTT)、还原型谷胱甘肽或β-巯基乙醇，所述酶工作液是包含有HCV抗原抗体联合检测酶工作液、HCV抗原检测酶工作液和HCV抗体检测酶工作液的三个独立包装。2.根据权利要求1所述丙型肝炎病毒抗原抗体联合检测试剂盒，其特征在于:所述离子表面活性剂为溴化十六烷基三甲基铵(CTAB)，使用浓度为0.01wt%?1.3wt% ;所述还原剂为二硫苏糖醇(DTT)，使用浓度为0.01wt%?2wt%。3.根据权利要求2所述丙型肝炎病毒抗原抗体联合检测试剂盒，其特征在于:所述离子表面活性剂为溴化十六烷基三甲基铵(CTAB)，使用浓度为0.08wt%?0.5wt% ;所述还原剂为二硫苏糖醇(DTT)，使用浓度为0.05wt%?1.0wt%。4.根据权利要求2所述丙型肝炎病毒抗原抗体联合检测试剂盒，其特征在于:所述离子表面活性剂为溴化十六烷基三甲基铵(CTAB)，使用浓度为0.lw...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱之炜，吕红娟，欧兰香，王佳颖，陈振，王岩，寇宗阳，丁兴龙，
申请(专利权)人：山东莱博生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：