人HSP90α-2抗原表位肽、抗原、抗体、应用及试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及人HSP90α-2抗原表位肽、抗原、抗体、应用及试剂盒。本发明专利技术的人HSP90α-2抗原表位肽的氨基酸序列为序列表SEQ ID NO.1所示的序列。本发明专利技术的人HSP90α-2抗原由人HSP90α-2抗原表位肽与蛋白载体偶联制得。本发明专利技术的人HSP90α-2单克隆抗体或多克隆抗体由本发明专利技术的人HSP90α-2抗原制得。本发明专利技术的人HSP90α-2单克隆抗体或多克隆抗体用于制备人HSP90α-2体外诊断试剂盒。本发明专利技术的人HSP90α-2抗原表位肽具有良好的抗原性，用其制备的抗原(免疫原)免疫动物能够产生高度特异性的单克隆抗体和多克隆抗体，从而可应用于人HSP90α-2的体外检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于多肽化学和免疫学领域，具体涉及人热休克蛋白90α-2(HSP90α-2)抗原表位肽、用该抗原表位肽制备的HSP90α-2特异性抗原和相应的单克隆抗体或多克隆抗体、所述抗体在制备人HSP90α-2体外诊断试剂盒上的应用，人HSP90α-2体外诊断试剂盒。
技术介绍
近年来，对肿瘤标志物的研究已经引起许多研究者的注意。寻找一种可靠的、非侵入式的、能反映肿瘤的发生、增值分化的肿瘤标志物是众多研究者的共同心愿。通过对血液、组织液的研究，目前发现一些肿瘤标志物可以对肿瘤的发生、增殖分化进行预测。其中，人热休克蛋白90α-2(HSP90α-2)就是这样的一种肿瘤标志物。热休克蛋白90α-2是热休克蛋白家族中的重要的蛋白之一，其作为分子伴侣来参与调控、维持细胞内多种蛋白的构象和功能，在调节细胞生长、分化和凋亡等方面发挥重要的作用。近年发现，热休克蛋白90α-2作为伴侣蛋白对肿瘤的恶性转变、生长、增殖及侵袭有着重要的作用。有许多报道证实，人体肿瘤组织中，热休克蛋白的表达发生了改变。在不同部位的肿瘤组织中，热休克蛋白表达的改变并不一致。目前发现肿瘤病人血清中的HSP90α-2含量与肿瘤的恶性程度，尤其是转移正相关。因此，HSP90α-2有希望作为肿瘤诊断和预后的标志物。检测血清中的HSP90α-2水平的最理想的方法为免疫检测。因此，寻找合适的具有免疫原性的HSP90α-2抗原表位肽、制备特异性的HSP90α-2抗原及抗体即成了重点。
技术实现思路
为解决上述现有技术中所存在的问题，本专利技术提供了一种人HSP90α-2抗原表位肽，用该抗原表位肽制备的HSP90α-2特异性抗原和相应的单克隆抗体或多克隆抗体，其在制备人HSP90α-2试剂盒上的应用，以及人HSP90α-2体外诊断试剂盒。具体而言，本专利技术提供了：一种人HSP90α-2抗原表位肽，其中所述HSP90α-2抗原表位肽的氨基酸序列为：Tyr-Glu-Lys-Glu-Ser-Glu-Asp-Lys-Pro-Glu-Ile-Glu-Asp-Val-Gly-Ser-Asp-Glu。本专利技术还提供了一种HSP90α-2抗原，其是通过使所述的人HSP90α-2抗原表位肽与载体蛋白偶联制备而成的。本专利技术还提供了一种人HSP90α-2抗体，其是由所述的HSP90α-2抗原制备而成的单克隆抗体或多克隆抗体，其中所述HSP90α-2抗原是通过使所述的人HSP90α-2抗原表位肽与载体蛋白偶联制备而成的。本专利技术还提供了所述的人HSP90α-2抗体在制备人HSP90α-2体外诊断试剂盒上的应用。本专利技术还提供了一种人HSP90α-2体外诊断试剂盒，其包含所述的人HSP90α-2抗体作为包被抗体或结合抗体。优选地，所述试剂盒还包含另一种人HSP90α-2抗体，并且上述的人HSP90α-2抗体和所述的另一种人HSP90α-2抗体中的一者作为包被抗体，另一者作为结合抗体，其中所述的另一种人HSP90α-2抗体由包含如以下序列所示的抗原表位的另一种HSP90α-2抗原制备而成：Tyr-Arg-Gly-Ile-Asp-Glu-Asp-Asp-Pro-Thr-Ala-Asp-Asp-Thr-Ser-Ala-Ala-Val-Thr-Glu。优选地，所述包被抗体为单克隆抗体。优选地，所述结合抗体为多克隆抗体。优选地，所述试剂盒还包含酶标记的抗抗体。本专利技术与现有技术相比具有以下优点和积极效果：1.本专利技术的人HSP90α-2抗原表位肽具有良好的抗原性，用其制备的抗原(免疫原)免疫动物能够产生高度特异性的单克隆抗体和多克隆抗体。2.用本专利技术制备的HSP90α-2单克隆抗体和多克隆抗体能够高度特异地与血液样本中的HSP90α-2结合。3.本专利技术的人HSP90α-2体外诊断试剂盒可以有效地检测血清中的HSP90α-2的水平，可用来判断肿瘤的恶性程度，并对转移和预后进行预测。具体实施方式以下通过具体实施方式的描述对本专利技术作进一步说明，但这并非是对本专利技术的限制，本领域技术人员根据本专利技术的基本思想，可以做出各种修改或改进，但是只要不脱离本专利技术的基本思想，均在本发明的范围之内。一、人HSP90α-2抗原表位肽本文中所述的人HSP90α-2蛋白是本领域已知的，其氨基酸序列是本领域已知的，可以在NCBI等专业数据库中查到。本专利技术提供了人HSP90α-2抗原表位肽(1)和(2)，其氨基酸序列分别如序列表SEQIDNo.1和SEQIDNo.2所示，为：(1)Y-E-K-E-S-E-D-K-P-E-I-E-D-V-G-S-D-E；和(2)Y-R-G-I-D-E-D-D-P-T-A-D-D-T-S-A-A-V-T-E。本专利技术的专利技术人经过大量的理论研究和实验摸索，最终筛选得到两种具有良好的抗原性的抗原表位肽。HSP90α-2抗原表位肽(1)包含人HSP90α-2蛋白(NCBI登录号NP_005339.3)N端第249位至第265位的肽段，并且在该肽段的N段加上Y，从而构成包含18个氨基酸的HSP90α-2抗原表位肽(1)。HSP90α-2抗原表位肽(2)包含人HSP90α-2蛋白(NCBI登录号NP_005339.3)C端第697位至第714位肽段，并且在该肽段的N段加上Y和R，从而构成包含20个氨基酸的HSP90α-2抗原表位肽(2)。这两个肽段均具有亲水性、抗原性强并且易于合成的特点。目前，本专利技术研究发现，本专利技术的HSP90α-2抗原表位肽具有如下功能：1.具有抗原性；2.与载体蛋白连接后作为免疫原刺激动物产生特异性的抗体；3.用抗原表位肽制备的抗体可特异性地与人HSP90α-2结合。本专利技术的HSP90α-2抗原表位肽的制备方法可用化学合成法：利用美国ABI431A型多肽自动合成仪，通过固相法合成抗原表位肽。本专利技术的抗原表位肽(1)和(2)的分子量分别为2404.35、2483.39，可用质谱进行确定，并通过多肽序列测定鉴定所合成的抗原表位肽序列。肽段的纯度可用薄层色谱和高效液相色谱进行评定，并测定抗原表位肽的浓度。二、HSP90α-2抗原本专利技术还提供了HSP90α-2抗原，其通过使本专利技术的人HSP90α-2抗原表位肽(1)和(2)中的一者与载体蛋白偶联制备而成。具体而言，本专利技术提供了HSP90α-2抗原(1)和(2)，所述HSP90α-2抗原本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种人HSP90α‑2抗原表位肽，其中所述HSP90α‑2抗原表位肽的氨基酸序列为：Tyr‑Glu‑Lys‑Glu‑Ser‑Glu‑Asp‑Lys‑Pro‑Glu‑Ile‑Glu‑Asp‑Val‑Gly‑Ser‑Asp‑Glu。

【技术特征摘要】
1.一种人HSP90α-2抗原表位肽，其中所述HSP90α-2抗原表位
肽的氨基酸序列为：
Tyr-Glu-Lys-Glu-Ser-Glu-Asp-Lys-Pro-Glu-Ile-Glu-Asp-Val-Gly
-Ser-Asp-Glu。
2.一种HSP90α-2抗原，其是通过使权利要求1所述的人
HSP90α-2抗原表位肽与载体蛋白偶联制备而成的。
3.一种人HSP90α-2抗体，其是由权利要求2所述的HSP90α-2
抗原制备而成的单克隆抗体或多克隆抗体。
4.根据权利要求3所述的人HSP90α-2抗体在制备人HSP90α-2
体外诊断试剂盒上的应用。
5.一种人HSP90α-2体外诊断试剂盒，其包含权利要求3所述
的人HSP90α-2抗体作为包被抗体或结合抗体。
6.根据权利要求5所述的人HSP90α-2体外诊断试剂盒...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱建安，
申请(专利权)人：深圳市安群生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44