一种结核分枝杆菌ESAT6抗原蛋白串联重组表达方法及其在结核检测中的应用技术

本发明专利技术公布一种结核分枝杆菌ESAT6串联重组融合蛋白及其应用。本发明专利技术提供了一种结核分枝杆菌ESAT6密码子优化方法、串联重组融合方法及融合蛋白制备方法，还提供了该重组融合蛋白在全血IFN-γ结核诊断试剂盒及TCELL-SPOT结核感染诊断试剂盒的制作和应用方法，具有特异性强、灵敏度高等优点，很好的满足了结核(TB)感染临床诊断的需要。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因工程领域及医学免疫学领域，涉及结核病病人和结核杆菌感染者的快速、早期特异的检测方法，具体的涉及一种结核分枝杆菌ESAT6串联重组融合蛋白及其应用，特别是一种结核病抗原ESAT6串联重组融合蛋白特异的全血IFN-Y结核诊断试剂盒及TCELL-SP0T结核感染诊断试剂盒的制作方法和应用方法。
技术介绍
结核病是由结核分支杆菌(Mycobacterium tuberculosis, MTB)感染所致的人类疾病，主要通过呼吸道传播，且疫情发展日趋严重。结核病的预防、早期诊断和及时治疗意义重大。MTB标准菌株H37Rv被广泛应用于TB相关的生物医药研究，其特异性抗原的制备备受关注。目前常用的结核特异抗原可以通过基因工程方法大量制备，是结核诊断的基础。但是目前多集中于单独一种抗原的表达、单独抗原表位的表达、多种抗原联合表达的方法获得结核特异抗原，少有单一抗原串联重组表达的研究，且结核特异性抗原多直接用血清学方法检测结核感染，灵敏度低、特异性差。
技术实现思路
为了克服上述现有技术的不足，本专利技术提供了一种用基因工程方法生产的结核ESAT6串联重组融合蛋白作为抗原，特异性强且易于本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种编码结核分枝杆菌ESAT6基因的密码子优化基因序列，其特征在于：其单拷贝核昔酸序列如SEQ?ID?NO.1所示，2次拷贝串联核苷酸序列如SEQ?ID?NO.2所示，3次拷贝串联核苷酸序列如SEQ?ID?NO.3所示，4次拷贝串联核苷酸序列如SEQ?ID?NO.4所示，5次拷贝串联核苷酸序列如SEQ?ID?NO.5所示，6次拷贝串联核苷酸序列如SEQ?ID?NO.6所示，ESAT6基因串联次数包括但不限于1?6次。

【技术特征摘要】
2012.07.20 CN 201210254850.51.一种编码结核分枝杆菌ESAT6基因的密码子优化基因序列，其特征在于:其单拷贝核昔酸序列如SEQ ID N0.1所示，2次拷贝串联核苷酸序列如SEQ ID N0.2所示，3次拷贝串联核苷酸序列如SEQ ID N0.3所示，4次拷贝串联核苷酸序列如SEQ ID N0.4所示，5次拷贝串联核苷酸序列如SEQ ID N0.5所示，6次拷贝串联核苷酸序列如SEQ ID N0.6所示，ESAT6基因串联次数包括但不限于1-6次。2.结核分枝杆菌ESAT6串联重组融合蛋白，其特征在于:它由权利要求1所述的密码子优化基因序列编码，其单拷贝氨基酸序列如SEQ ID N0.7所示，2次拷贝氨基酸序列如SEQ ID N0.8所示，3次拷贝氨基酸序列如SEQ ID N0.9所示，4次拷贝氨基酸序列如SEQID N0.10所示，5次拷贝氨基酸序列如SEQ ID N0.11所示，6次拷贝氨基酸序列如SEQ IDN0.12所示，ESAT6蛋白串联次数包括但不限于1_6次。3.结核分枝杆菌ESAT6串联重组融合蛋白的表达载体，其特征在于:它是将权利要求1所述的密码子优化基因序列分别插入到质粒pE...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨艳坤，白仲虎，刘晓磊，李昕，朱国珍，林兴兵，曹成，付建军，
申请(专利权)人：郑州博赛生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：