一种抗血管内皮生长因子受体2的单链抗体制造技术

本发明专利技术公开了一种经过体外亲和力成熟的全人源的抗KDR3单链抗体AK-11，具体为AK-11的重链可变区和轻链可变区免疫球蛋白分子的氨基酸序列，以及包含重链可变区和轻链可变区免疫球蛋白分子的氨基酸序列，包括对应于互补决定区CDR1、CDR2和CDR3的序列。本发明专利技术还提供产生和表达AK-11的方法，用错配PCR建库和噬菌体筛选的方法筛选获得了一株亲和力较高的全人源的抗VEGFR2单链抗体AK-11，后通过原核细胞分泌表达、亲和层析纯化获得单链抗体。本发明专利技术的单链抗体可特异性结合于血管内皮生长因子受体2，可以抑制VEGF诱导的HUVEC的生长，可应用于制备治疗剂。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物工程领域，具体涉及一种全新的可与血管内皮生长因子受体2 (vascular endothelial growth factorreceptor, VEGFR)特异结合的高亲和力全人源单链抗体，能抑制VEGF诱导的血管内皮细胞(human umbilical vascularendothelial cell,HUVEC)的增殖，是一种具有抗血管生成活性的基因工程抗体。
技术介绍
癌细胞在生长因子受体的激活下增殖，癌细胞生长时会促进自身促血管生长因子如血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)等的表达上调，刺激内皮细胞活化，分泌出其他血管生成所需要的蛋白酶，引起一系列的级联反应，通过抗凋亡等机制调节内皮细胞的存活，促进新生血管形成并维持其完整性。内皮细胞在VEGF等刺激因子作用下增殖，大量增殖的内皮细胞重新排列形成条索状，刺激成纤维细胞分泌细胞外基质，形成新的血管。人VEGF受体2(VEGFR-2)，又称为KDR(kinase insertdomain-containing receptor, KDR)是VEG本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗血管内皮生长因子受体2的单链抗体，所述单链抗体包括重链可变区域和轻链可变区域，并且重链可变域和轻链可变区域通过柔性肽连接，柔性肽的氨基酸序列为SEQ?ID?NO：9，其特征在于：其中所述的抗体含有重链CDR3域，该域包含SEQ?ID?NO：5的氨基酸序列，或通过氨基酸置换或者修饰得到的氨基酸序列；轻链CDR3域，该域包含SEQ?ID?NO：8的氨基酸序列，或通过氨基酸置换或者修饰得到的氨基酸序列。

【技术特征摘要】
1.一种抗血管内皮生长因子受体2的单链抗体，所述单链抗体包括重链可变区域和轻链可变区域，并且重链可变域和轻链可变区域通过柔性肽连接，柔性肽的氨基酸序列为SEQID NO:9，其特征在于:其中所述的抗体含有重链⑶R3域，该域包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列，或通过氨基酸置换或者修饰得到的氨基...

【专利技术属性】
技术研发人员：张娟，王旻，齐海迪，曹婉璐，李致科，王泽根，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：