FcγRIIB(CD32B)和CD20特异性抗体的组合应用制造技术

本发明专利技术提供了一种治疗具有表达FcγRIIb的靶细胞的患者的方法，所述方法包括联合施用：(i)特异性结合所述靶细胞的表面抗原的抗体分子，所述抗体分子具有能够结合FcγRIIb的Fc结构域；和(ii)抑制或减少所述抗体分子的Fc结构域和FcγRIIb之间结合的试剂，其特征在于，所述患者是基于其靶细胞的FcγRIIb表达水平升高来选择的。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】FcyRI IB(CD32B)和CD20特异性抗体的组合应用
技术介绍
本专利技术涉及防止抗体Fe结构域和细胞表面Fe Y RIIb之间结合的试剂(agent)。本专利技术还涉及包含所述试剂的组合物，所述组合物用于治疗具有诸如使用基于抗体的组合物治疗的癌细胞的靶细胞的患者。另外，本专利技术还涉及预测靶细胞对于基于抗体的治疗的响应的方法，特别是在抗体配体对Fe y RIIb介导的内化敏感的情况下预测靶细胞对于基于抗体的治疗的响应的方法，特别涉及Fe y RIIb表达水平和/或治疗性抗体通过Fe y RIIb介导的内化作为靶细胞对于所述治疗的响应的预后标志物的用途。单克隆抗体(mAb)可产生治疗效果的机制是通过招募诸如细胞毒性细胞(例如巨噬细胞)和酶(例如补体)的天然效应系统，然后所述效应系统靶向HiAb结合的细胞，而刺激除去癌细胞和其他不 想要的细胞。例如，I型抗⑶20mAb (例如当前的市场主导药利妥昔单抗)通过经mAb的抗原结合结构域结合B细胞表面上的CD20分子并清除这些靶B细胞而发挥作用。它们通过招募和激活通过在效应细胞的表面表达的Fe y受体(Fe Y R)而与mAb的Fe结构域相互作用的这些效应细胞来实现这点。抗⑶20单克隆抗体(mAb)利妥昔单抗改善了患有滤泡(FL)性淋巴瘤和弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的患者的总体存活率(OS) (1-4)。在外套细胞淋巴瘤(MCL)中，仅观察到轻度响应(5)，而在慢性淋巴细胞白血病(CLL)中，起始单剂利妥昔单抗试验所产生的响应没有在其他非何杰金淋巴瘤(NHL)中所产生的响应显著((6)中综述)。一部分淋巴瘤显示对利妥昔单抗具有原发抗性，或者最终对含有利妥昔单抗的联合治疗产生抗性(7)。该治疗抗性及所观察到的不同NHL亚型对利妥昔单抗治疗的敏感性背后的分子基础当前尚未知，但可能包括⑶20表达水平(8-10)、补体防御分子(⑶55和⑶59)的高表达(11、12)、凋亡抗性的形成(13)以及由于低亲和力等位基因表达导致的次佳的Fe Y受体(FcyR)相互作用(14)。非常期望在治疗不佳或抗性明显的情况下提高这些抗体的有效性。通常认为Fe:Fe Y R相互作用对于抗⑶_20mAb的功效至关重要(15_18)。与此相一致，在Fe Y RIIIa中携带较高亲和力的158V等位基因的淋巴瘤患者要比具有低亲和力的158F异型的淋巴瘤患者更好地响应利妥昔单抗(14)，导致许多研究者都集中于提高mAb与Fe y RIIIa的相互作用，例如通过去岩藻糖基化(19)。相比之下，对于抑制性Fe y RIIb则给予较少关注，Fe y RIIb用作诸如B细胞抗原受体(BCR)和激活性Fe Y R的携带ITAM的受体接收的刺激性活动的负调节剂。在B细胞中，该相互作用用于限制免疫复合物结合之后的B细胞增殖，而在巨噬细胞中，FcyRIIb的参与引起细胞毒性活性的抑制(15)。在B细胞恶性肿瘤中，Fe Y RIIb表达于CLL/SLL、MCL以及FL上，后者尤其在转化过程中有表达。在DLBCL中，FyRIIb表达较弱，由此解释了在其表达和对于利妥昔单抗-CHOP (R-CHOP)化疗之间未显示相关性的原因(20，21)。关于激活性Fe Y R，还发现影响Fe y RIIb活性的多形性，2321等位基因比232T等位基因更有效地抑制BCR介导的钙流(22，23)。然而，Weng和Levy未能在FL患者中确定这些多形性和对利妥昔单抗治疗的响应之间的相关性。可用于临床研究的抗⑶_20mAb数量越来越多。根据这些不同抗⑶20mAb在质膜中再分布CD20的能力及其在不同效应细胞测定中的活性将其分类为I型(例如，利妥昔单抗(rituximab)，奥法木单抗(ofatumumab))或 II 型(例如，托西莫单抗(tositumomab) (BI),GAlOl，11B8) (25-27)。专利技术人及其他人已经证明II型mAb在许多模型系统中均更高效地清除B细胞靶(18，19)。例如，在其中II型mAb引发溶酶体细胞死亡的较高能力不明显的人正常B细胞消耗的CD20转基因(Tg)模型(25，27)中，专利技术人证明了该效能与其对内化的抗性相关(28)。这与诸如利妥昔单抗的I型mAb形成对比，I型mAb在具有能量和温度依赖性并涉及肌动蛋白再分布的过程中与CD20—起从细胞表面快速内化(28)。在来自不同来源的细胞上的调变(modulation)速率显著不同(原发肿瘤对细胞系，CLL对FL)，但这点的分子基础仍未得到解释。WO 2008/002933描述了 Fe Y RIIb (CD32B)和CD20特异性抗体及使用这两种抗体的组合来治疗B细胞相关疾病或病症的方法。然而，没有识别和/或治疗患者亚组的教导或暗示，所述患者亚组即靶细胞Fe y RIIb表达水平升高的那些患者，或其抗体类型适于和Fe y RIIb抗体联合治疗的患者。出人意料地，专利技术人证明不管细胞亚型如何调变都与Fe y RIIb表面表达显著相关，过表达能够将Ramos细胞由慢调变细胞转化为快调变细胞。FcyRIIb的内化与⑶20 —起发生，并在其激活之前发生。所有这些数据为先前在不同NHL亚型内和不同NHL亚型之间观察到的调变速率的异质性提供了明确的分子理论。因此，专利技术人证明，决定抗体对诸如CD20的抗原的有效性的关键因素是与同一细胞表面的抑制性 Fe y RIIb (还已知为且包括 CD32、CD32B、CD32B1、CD32B2、FcRI1、Fe y RII或FcRIIB)的相互作用，这令人惊讶。该相互作用导致靶细胞对抗体的内化，由此去除其与效应细胞Fe受体相互作用的能力。专利技术人进一步证明,诸如抗CD32mAb的试剂能够阻断这种内化。专利技术人还证明这样的试剂可与抗体(例如利妥昔单抗)联合用于靶向细胞表面抗原并改善其体内清除正常B细胞或肿瘤细胞的活性。本专利技术提供了一种组合物，所述组合物包含:(i)特异性结合靶细胞的细胞表面抗原的抗体分子，所述抗体分子具有能够结合Fe y RIIb的Fe结构域;和(ii)抑制或减少Fe y RIIb与所述抗体分子的Fe结构域结合的试剂，其特征在于，所述组合物用于治疗具有Fe YRIIb表达水平升高的靶细胞的患者。根据另一方面，本专利技术提供了抑制或减少抗体分子的Fe结构域与靶细胞上的Fe Y RIIb之间结合的试剂的用途，其中所述抗体分子特异性结合靶细胞表面抗原，其特征在于，所述用途为在制备用于治疗具有Fe YRIIb表达水平升高的靶细胞的患者的药物中的用途。根据另一方面，本专利技术提供了一种治疗具有表达Fe Y RIIb的靶细胞的患者的方法，所述方法包括联合施用:(i)特异性结合所述靶细胞的表面抗原的抗体分子，所述抗体分子具有能够结合Fe y RIIb 的Fe结构域；和(ii)抑制或减少所述抗体分子的Fe结构域和Fe y RIIb之间结合的试剂，其特征在于，所述患者是基于靶细胞Fe y RIIb表达水平升高选择的。在本专利技术组合物、用途或方法的某些实施方式中，所述试剂抑制或减少靶细胞上存在的Fe y RIIb与所述抗体分子的Fe结构域的结合。根据另一方面，本专利技术提供靶细胞上的Fe YRIIb表达作为所述靶细胞对于使用特异性结本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.08.20 GB 1013989.71.组合物，所述组合物包含: (i)抗体分子，所述抗体分子特异性结合靶细胞的细胞表面抗原，且具有能够结合Fe y RIIb的Fe结构域;和 (ii)试剂，所述试剂抑制或减少Fey RIIb与所述抗体分子的Fe结构域结合， 其特征在于，所述组合物用于治疗具有FcyRIIb表达水平升高的靶细胞的患者。2.抑制或减少抗体分子Fe的结构域与靶细胞上的Fey RIIb之间结合的试剂的用途，其中所述抗体分子特异性结合所述靶细胞的表面抗原，并且其特征在于，所述用途为在制备用于治疗具有Fe y RIIb表达水平升高的靶细胞的患者的药物中的用途。3.治疗具有表达FeY RIIb的靶细胞的患者的方法，所述方法包括联合施用:(i)特异性结合所述靶细胞的表面抗原的抗体分子，所述抗体分子具有能够结合Fe y RIIb的Fe结构域；和Qi)抑制或减少所述抗体分子的Fe结构域和Fe y RIIb之间结合的试剂,其特征在于，所述患者是基于其靶细胞的Fe YRIIb表达水平升高来选择的。4.靶细胞上的Fey RIIb表达作为所述靶细胞对于使用抗体分子治疗的响应的预后标志物的用途，所述抗体分子特异性结合所述靶细胞的表面抗原，且所述抗体分子具有能够结合Fe y RIIb的Fe结构域，由此Fe y RIIb水平升高表明对使用所述抗体分子治疗的响应减少或不响应。5.用于预测患者靶细胞对于使用抗体分子治疗的响应的方法，所述抗体分子特异性结合靶细胞表面抗原并具有能够结合Fe Y RIIb的Fe结构域，其特征在于，所述方法包括测定所述靶细胞上的Fe y RIIb表达水平，由此Fe y RIIb水平升高预示对使用所述抗体分子治疗的响应减少或不响应。6.根据权利要 求1-3任一项所述的组合物、用途或方法，其中所述试剂抑制或减少所述革G细胞上的Fe y RIIb与所述抗体分子的Fe结构域结合。7.根据前述权利要求任一项所述的组合物、用途或方法，其中特异性结合靶细胞表面抗原且具有能够结合Fe y RIIb的Fe结构域的所述抗体分子能够以Fe y RIIb依赖性方式被内化至所述靶细胞中。8.根据权利要求1-3和6-7任一项所述的组合物、用途或方法，其中所述抑制或减少Fe y RIIb与所述抗体分子Fe结构域的结合的试剂还抑制或减少所述抗体分子内化至所述靶细胞中。9.根据前述权利要求任一项所述的组合物、用途或方法，其中所述靶细胞是癌细胞。10.根据前述权利要求任一项所述的组合物、用途或方法，其中所述靶细胞是B细胞。11.根据前述权利要求任一项所述的组合物、用途或方法，其中待治疗的所述患者为癌症患者，所述治疗为癌症治疗。12.根据权利要求9-11任一项所述的组合物、用途或方法，其中所述癌症选自非何杰金淋巴瘤，例如滤泡性淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、外套细胞淋巴瘤或慢性淋巴细胞性白血病。13.根据前述权利要求任一项所述的组合物、用途或方法，其中所述试剂为下述任一者:多肽；anticalin ;肽；抗体；嵌合抗体；单链抗体；适体；darpin ;Fab、F(ab ' )2、Fv、ScFv或dAb抗体片段；小分子；天然产物；亲和体；拟肽；核酸；肽核酸分子；脂质；碳水化合物；基于模块框架的蛋白，包括锚蛋白重复序列蛋白、犰狳重复序列蛋白、富亮氨酸蛋白、三十四肽重复序列蛋白或设计的锚蛋白重复序列蛋白(DARPins)。14.根据前述权利要求任一项所述的组合物、用途或方法，其中所述试剂为特异性结合Fe y RIIb的一种或多种抗体分子。15.根据权利要求14所述的组合物、用途或方法，其中所述一种或多种抗体分子不包含能够招募效应细胞的结构域。16.根据权利要求15所述的组合物、用途或方法，其中所述一种或多种抗体分子为单克隆抗体分子。17.根据权利要求1-3和6-16任一项所述的组合物、用途或方法，其中所述试剂包含含有下列⑶R的重链可变区(VH):(i)SEQID NO:29 和 SEQ ID NO:30 和 SEQ ID NO:31 ;或 (ii)SEQID NO:35 和 SEQ ID NO:36 和 SEQ ID NO:37;或(iii)SEQID NO:41 和 SEQ ID NO:42 和 SEQ ID NO:43 ;或(iv)SEQID NO:47 和 SEQ ID N0:48 和 SEQ ID N0:49 ;或(v)SEQID NO:53 和 SEQ ID NO:54 和 SEQ ID NO:55;或(vi)SEQID NO:59 和 SEQ ID NO:60 和 SEQ ID NO:61 ;或(vii)SEQID NO:65 和 SEQ ID NO:66 和 SEQ ID NO:67 ;或(viii)SEQID NO:71 和 SEQ ID NO:72 和 SEQ ID NO:73;或(ix)SEQID NO:77 和 SEQ ID NO:78 和 SEQ ID NO:79;或(x)SEQID NO:83 和 SEQ ID NO:84 和 SEQ ID NO:85 ;或(xi)SEQID NO:89 和 SEQ ID NO:90 和 SEQ ID NO:91 ;或(xii)SEQID NO:95 和 SEQ ID NO:96 和 SEQ ID NO:97 ;或(xiii)SEQID NO:101 和 SEQ ID NO:102 和 SEQ ID NO:103。18.根据权利要求1-3和6-17任一项所述的组合物、用途或方法，其中所述试剂包含含有下列CDR的轻链可变区(VL):(i)SEQID NO:32 和 SEQ ID NO:33 和 SEQ ID NO:34;或(ii)SEQID NO:38 和 SEQ ID NO:39 和 SEQ ID NO:40 ;或(iii)SEQID NO:44 和 SEQ ID NO:45 和 SEQ ID NO:46 ;或(iv)SEQ ID NO: 50 和 SEQ ID NO: 51 和 SEQ ID NO: 52;或(v)SEQID NO:56 和 SEQ ID NO:57 和 SEQ ID NO:58;或(vi)SEQID NO:62 和 SEQ ID NO:63 和 SEQ ID NO:64 ;或(vii)SEQID NO:68 和 SEQ ID NO:69 和 SEQ ID NO:70;或(viii)SEQID NO:74 和 SEQ ID NO:75 和 SEQ ID NO:76;或(ix)SEQID NO:80 和 SEQ ID NO:81 和 SEQ ID NO:82 ;或(x)SEQID NO:86 和 SEQ ID NO:87 和 SEQ ID NO:88 ;或(xi)SEQID NO:92 和 SEQ ID NO:93 和 SEQ ID NO:94 ;或(...

【专利技术属性】
技术研发人员：马克·克拉格，M·格兰尼，阿里·鲁加尼安，斯蒂芬·贝尔斯，P·约翰逊，肖恩·林，比约恩·弗伦多斯，英格丽德·泰格，
申请(专利权)人：南安普敦大学，
类型：
国别省市：