本发明专利技术涉及程序性死亡-1(PD-1)的人单克隆抗体及单独使用或与其它免疫治疗剂联合使用抗PD-1抗体来治疗癌症的方法。本发明专利技术提供了以高亲和力与PD-1特异性结合的分离的单克隆抗体，特别是人单克隆抗体。还提供了编码本发明专利技术抗体的核酸分子、用于表达本发明专利技术抗体的表达载体、宿主细胞和方法。还提供了包含本发明专利技术抗体的免疫偶联物、双特异性分子和药用组合物。本发明专利技术还提供了使用抗PD-1抗体来检测PD-1的方法，以及治疗各种疾病，包括癌症和传染病的方法。本发明专利技术进一步提供了使用联合免疫疗法，诸如抗CTLA-4抗体和抗PD-1抗体的组合来治疗过度增殖性疾病，诸如癌症的方法。本发明专利技术还提供了改变与单独使用此类抗体进行的治疗有关的不良事件的方法。
【技术实现步骤摘要】
一般而言，本专利技术涉及治疗人类疾病和减少相关不良事件的免疫疗法。更具体的说，本专利技术涉及使用抗ro-1抗体和使用包括抗CTLA-4抗体与抗ro-1抗体组合的联合免疫疗法来治疗癌症和/或减少与单独使用此类抗体进行的治疗有关的不良事件的发生率或程度。本申请是申请日为2006年05月02日、中国申请号为200680023860. O、专利技术名称为“程序性死亡-1 (PD-1)的人单克隆抗体及单独使用或与其它免疫治疗剂联合使用抗ro-1抗体来治疗癌症的方法”的专利技术申请的分案申请。
技术介绍
蛋白质程序性死亡I(PD-1)是⑶28受体家族的抑制性成员，该家族还包括⑶28、CTLA-4、ICOS和BTLA。PD-1在活化的B细胞、T细胞和髓样细胞上表达(Agata等人，同下；0kazaki 等人(2002) Curr. Opin. Tmmuno1. 14:391779-82; Bennett 等人(2003) JImmunol 170:711-8)o根据加入单克隆抗体后对提升T细胞增殖的功能性影响发现了家族最初的成员，CD28 和 ICOS (Hutloff 等人(1999)Nature397:263-266;Hansen 等人(1980)ImmunogenicslO:247-260)。通过在凋亡细胞中筛选差异表达发现了 PD-1 (Ishida等人(1992)EMBOJl1:3887-95)。通过分别在细胞毒性T淋巴细胞和THl细胞中筛选差异表达发现了家族的其它成员，CTLA-4和BTLA。⑶28、ICOS和CTLA-4都具有能够同型二聚化的不成对半胱氨酸残基。相反，认为I3D-1以单体形式存在，其缺少其它CD28家族成员中特有的不成对半胱氨酸残基。 I3D-1基因是55kDa的I型跨膜蛋白，其为Ig基因超家族的一部分(Agata等人(1996) Int Immuno18:765-72) JD-1含有接近膜的免疫受体酪氨酸抑制基序(IHM)和远离膜的基于酪氨酸的转换基序(ITSM) (Thomas,M. L. (1995) J Exp Medl81:1953-6; Vivier, E和 Daeron, M (1997) Immunol Todayl8:286-91 )。虽然与 CTLA-4 结构类似，但 PD-1 缺少结合B7-1和B7-2所必需的MYPPPY基序。现已鉴定了 PD-1的两种配体，PD-Ll和PD-L2，其显示出在结合 F1D-1 后下调 T 细胞活化(Freeman 等人(2000)J Exp Medl92:1027-34; Latchman等人(2001) Nat Immunol2:261-8; Carter 等人(2002) Eur J Immuno132:634-43)。PD-Ll和H)-L2都是B7同源物，其与TO-1结合，但不与其它⑶28家族成员结合。I3D-1的一种配体，PD-Ll在多种人癌瘤中都很丰富(Dong等人(2002)Nat. MecL 8:787-9)。PD-1和PD-LI之间的相互作用导致渗入肿瘤的淋巴细胞减少、T细胞受体介导的增殖减少、及癌性细胞的免疫逃避(Dong 等人(2003) J. Mol. Med. 81:281-7; Blank 等人(2005) Cancer Tmmuno1.1mmunother. 54:307-314; Konishi 等人(2004) Cl in. Cancer Res. 10:5094-100)。可以通过抑制ro-1与ro-Li的局部相互作用来逆转免疫抑制，而且当ro-1与ro-L2的相互作用也被阻断时效果累加(Iwai 等人(2002) Proc. Nat，1. Acad. Sc1. USA99:12293-7; Brown 等人(2003)J.1mmunol. 170:1257—66)。PD-1是在活化的B细胞、T细胞和髓样细胞上表达的⑶28家族的抑制性成员(Agata 等人，同上；0kazaki 等人(2002)Curr Opin Immunol 14:391779-82;Bennett等人(2003) J Immunoll70:711-8)o I3D-1缺陷型动物形成多种自身免疫表型，包括自身免疫性心肌病及伴有关节炎和肾炎的狼疮样综合征(Nishimura等人(1999)Immunityll: 141-51; Nishimura 等人(2001) Science291:319-22)。此外，发现 F1D-1在自身免疫性脑脊髓炎、系统性红斑狼疮、移植物抗宿主病(GVHD)、I型糖尿病和类风湿性关节炎中起作用(Salama等人(2003) J Exp Medl98:71-78; Prokunina和Alarcon-Riquelme (2004) Hum Mol Genetl3: R143; Nielsen 等人(2004) Lupusl3:510)。在鼠B细胞肿瘤系中，H)-l的ITSM显示出是阻断BCR介导的Ca2+流通和下游效应器分子的酪氨酸磷酸化所必需的(Okazaki等人(2001) PNAS98:13866-71)。因此，需要识别ro-1的试剂和使用此类试剂的方法。专利技术概述本专利技术提供了分离的单克隆抗体，特别是人单克隆抗体，其与ro-1结合并表现出许多优良特性。这些特性包括例如与人I3D-1高亲和力结合，但缺少与人⑶28、CTLA-4或ICOS的基本的交叉反应性。此外，本专利技术的抗体显示出可调控免疫应答。因此,本专利技术的另一方面涉及使用抗ro-1抗体调控免疫应答的方法。具体而言，本专利技术提供了使用抗ro-1抗体在体内抑制肿瘤细胞生长的方法。在一方面，本专利技术涉及分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其中所述抗体表现出至少一项下列性质(a)以IxKT7M或更小的Kd与人PD-1结合；(b)不 显著与 CD28、CTLA-4 或 ICOS 结合；(c)在混合淋巴细胞反应(MLR)测定法中增加T细胞增殖；(d)在MLR测定法中增加干扰素Y的产量；(e)在MLR测定法中增加IL-2的分泌；(f)与人ro-1和猕猴ro-1结合；(g)抑制 PD-Ll 和 / 或 PD-L2 与 PD-1 的结合；(h)刺激抗原特异性记忆应答；(i)刺激抗体应答；(j)抑制体内肿瘤细胞生长。所述抗体优选为人抗体，虽然在可选的实施方式中抗体可以为例如鼠抗体、嵌合抗体或人源化抗体。在更优选的实施方式中，抗体以5xl(T8或更小的Kd与人I3D-1结合，以IxKT8M或更小的Kd与人PD-1结合，以5x1 O^9M或更小的Kd与人PD-1结合，或以IxKT8M和IxIO^1OM之间的Kd与人ro-1结合。在另一实施方式中，本专利技术提供了分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其中所述抗体与参照抗体交叉竞争与ro-1的结合，该参照抗体包含(a)人重链可变区，其包含选自SEQ ID NOs: 1、2、3、4、5、6和7的氨基酸序列；和(b)人轻链可变区，其包含选自SEQ ID N0s:8、9、10、ll、12、13和14的氨基酸序列。在多种实施方式中，所述参照抗体包含(a)重链可变区，其包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列；和(b)轻链可变区，其包含SEQ I本文档来自技高网...
【技术保护点】
分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其包含：a)包含选自SEQ?ID?NO:15、16、17、18、19、20和21的氨基酸序列的重链可变区CDR1；b)包含选自SEQ?ID?NO:22、23、24、25、26、27和28的氨基酸序列的重链可变区CDR2；c)包含选自SEQ?ID?NO:29、30、31、32、33、34和35的氨基酸序列的重链可变区CDR3；d)包含选自SEQ?ID?NO:36、37、38、39、40、41和42的氨基酸序列的轻链可变区CDR1；e)包含选自SEQ?ID?NO:43、44、45、46、47、48和49的氨基酸序列的轻链可变区CDR2；和f)包含选自SEQ?ID?NO:50、51、52、53、54、55和56的氨基酸序列的轻链可变区CDR3；其中所述抗体与PD?1特异性结合。
【技术特征摘要】
2005.05.09 US 60/679,466;2005.11.21 US 60/738,4341.分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其包含 a)包含选自SEQID N0:15、16、17、18、19、20和21的氨基酸序列的重链可变区CDRl ； b)包含选自SEQID N0:22、23、24、25、26、27和28的氨基酸序列的重链可变区CDR2 ； c)包含选自SEQID NO:29、30、31、32、33、34和35的氨基酸序列的重链可变区CDR3 ； d)包含选自SEQID N0:36、37、38、39、40、41和42的氨基酸序列的轻链可变区CDRl ； e)包含选自SEQID NO:43、44、45、46、47、48和49的氨基酸序列的轻链可变区CDR2 ；和 f)包含选自SEQID N0:50、51、52、53、54、55和56的氨基酸序列的轻链可变区CDR3 ； 其中所述抗体与ro-1特异性结合。2.分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其包含 a)包含选自SEQID NO:l、2、3、4、5、6和7的氨基酸序列的重链可变区;和 b)包含选自SEQID N0:8、9、10、ll、...
【专利技术属性】
技术研发人员：艾伦J科曼，莫汉斯里尼瓦森，王常玉，马克J塞尔比，陈炳良，约瑟芬M卡达雷里，黄海春，
申请(专利权)人：小野药品工业株式会社，梅达雷克斯股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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