程序性死亡-1(PD-1)的人单克隆抗体及使用抗PD-1抗体来治疗癌症的方法技术

技术编号：40416691 阅读：9 留言：0更新日期：2024-02-20 22:34

本发明专利技术提供了以高亲和力与PD‑1特异性结合的分离的单克隆抗体，特别是人单克隆抗体。还提供了编码本发明专利技术抗体的核酸分子、用于表达本发明专利技术抗体的表达载体、宿主细胞和方法。还提供了包含本发明专利技术抗体的免疫偶联物、双特异性分子和药用组合物。本发明专利技术还提供了使用抗PD‑1抗体来检测PD‑1的方法，以及治疗各种疾病，包括癌症和传染病的方法。本发明专利技术进一步提供了使用联合免疫疗法，诸如抗CTLA‑4抗体和抗PD‑1抗体的组合来治疗过度增殖性疾病，诸如癌症的方法。本发明专利技术还提供了改变与单独使用此类抗体进行的治疗有关的不良事件的方法。

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【技术实现步骤摘要】

一般而言，本专利技术涉及治疗人类疾病和减少相关不良事件的免疫疗法。更具体的说，本专利技术涉及使用抗pd-1抗体和使用包括抗ctla-4抗体与抗pd-1抗体组合的联合免疫疗法来治疗癌症和/或减少与单独使用此类抗体进行的治疗有关的不良事件的发生率或程度。

技术介绍

0、专利技术背景

1、蛋白质程序性死亡1(pd-1)是cd28受体家族的抑制性成员，该家族还包括cd28、ctla-4、icos和btla。pd-1在活化的b细胞、t细胞和髓样细胞上表达(agata等人，同下；okazaki等人(2002)curr.opin.immunol.14:391779-82；bennett等人(2003)j immunol170:711-8)。根据加入单克隆抗体后对提升t细胞增殖的功能性影响发现了家族最初的成员，cd28和icos(hutloff等人(1999)nature 397:263-266；hansen等人(1980)immunogenics 10:247-260)。通过在凋亡细胞中筛选差异表达发现了pd-1(ishida等人(1992)embo j 11:3887-95)。通过分别在细胞毒性t淋巴细胞和th1细胞中筛选差异表达发现了家族的其它成员，ctla-4和btla。cd28、icos和ctla-4都具有能够同型二聚化的不成对半胱氨酸残基。相反，认为pd-1以单体形式存在，其缺少其它cd28家族成员中特有的不成对半胱氨酸残基。

2、pd-1基因是55kda的i型跨膜蛋白，其为ig基因超家族的一部分(agata

3、pd-1是在活化的b细胞、t细胞和髓样细胞上表达的cd28家族的抑制性成员(agata等人，同上；okazaki等人(2002)curr opin immunol 14:391779-82；bennett等人(2003)jimmunol 170:711-8)。pd-1缺陷型动物形成多种自身免疫表型，包括自身免疫性心肌病及伴有关节炎和肾炎的狼疮样综合征(nishimura等人(1999)immunity 11:141-51；nishimura等人(2001)science 291:319-22)。此外，发现pd-1在自身免疫性脑脊髓炎、系统性红斑狼疮、移植物抗宿主病(gvhd)、i型糖尿病和类风湿性关节炎中起作用(salama等人(2003)j exp med 198:71-78；prokunina和alarcon-riquelme(2004)hum mol genet 13:r143；nielsen等人(2004)lupus 13:510)。在鼠b细胞肿瘤系中，pd-1的itsm显示出是阻断bcr介导的ca2+流通和下游效应器分子的酪氨酸磷酸化所必需的(okazaki等人(2001)pnas98:13866-71)。

4、因此，需要识别pd-1的试剂和使用此类试剂的方法。

技术实现思路

0、专利技术概述

1、本专利技术提供了分离的单克隆抗体，特别是人单克隆抗体，其与pd-1结合并表现出许多优良特性。这些特性包括例如与人pd-1高亲和力结合，但缺少与人cd28、ctla-4或icos的基本的交叉反应性。此外，本专利技术的抗体显示出可调控免疫应答。因此，本专利技术的另一方面涉及使用抗pd-1抗体调控免疫应答的方法。具体而言，本专利技术提供了使用抗pd-1抗体在体内抑制肿瘤细胞生长的方法。

2、在一方面，本专利技术涉及分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其中所述抗体表现出至少一项下列性质：

3、(a)以1x10-7m或更小的kd与人pd-1结合；

4、(b)不显著与cd28、ctla-4或icos结合；

5、(c)在混合淋巴细胞反应(mlr)测定法中增加t细胞增殖；

6、(d)在mlr测定法中增加干扰素γ的产量；

7、(e)在mlr测定法中增加il-2的分泌；

8、(f)与人pd-1和猕猴pd-1结合；

9、(g)抑制pd-l1和/或pd-l2与pd-1的结合；

10、(h)刺激抗原特异性记忆应答；

11、(i)刺激抗体应答；

12、(j)抑制体内肿瘤细胞生长。

13、所述抗体优选为人抗体，虽然在可选的实施方式中抗体可以为例如鼠抗体、嵌合抗体或人源化抗体。

14、在更优选的实施方式中，抗体以5x10-8或更小的kd与人pd-1结合，以1x10-8m或更小的kd与人pd-1结合，以5x10-9m或更小的kd与人pd-1结合，或以1x10-8m和1x10-10m之间的kd与人pd-1结合。

15、在另一实施方式中，本专利技术提供了分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其中所述抗体与参照抗体交叉竞争与pd-1的结合，该参照抗体包含：

16、(a)人重链可变区，其包含选自seq id nos:1、2、3、4、5、6和7的氨基酸序列；和

17、(b)人轻链可变区，其包含选自seq id nos:8、9、10、11、12、13和14的氨基酸序列。

18、在本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.分离的人单克隆抗体或其抗原结合部分，其中所述抗体与PD-1结合且其中所述抗体展现出至少一种下述性质：

2.权利要求1的抗体，其为IgG1或IgG4同种型的全长抗体。

3.权利要求1的抗体，其为抗体片段或单链抗体。

4.权利要求1的抗体，其中所述抗体以5x10-8 M或更小的KD与人PD-1结合。

5.权利要求1的抗体，其中所述抗体以1x10-8 M或更小的KD与人PD-1结合。

6.权利要求1的抗体，其中所述抗体以5x10-9 M或更小的KD与人PD-1结合。

7.权利要求1的抗体，其中所述抗体以1x10-8 M至1x10-10 M的KD与人PD-1结合。

8.分离的人单克隆抗体或其抗原结合部分，其中所述抗体与参照抗体交叉竞争与PD-1的结合，该参照抗体包含：

9.权利要求8的抗体，其中所述人重链可变区包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列，所述人轻链可变区包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列。

10.权利要求8的抗体，其中所述人重链可变区包含SEQ ID NO:2的

...

【技术特征摘要】

1.分离的人单克隆抗体或其抗原结合部分，其中所述抗体与pd-1结合且其中所述抗体展现出至少一种下述性质：

2.权利要求1的抗体，其为igg1或igg4同种型的全长抗体。

3.权利要求1的抗体，其为抗体片段或单链抗体。

4.权利要求1的抗体，其中所述抗体以5x10-8 m或更小的kd与人pd-1结合。

5.权利要求1的抗体，其中所述抗体以1x10-8 m或更小的kd与人pd-1结合。

6.权利要求1的抗体，其中所述抗体以5x10-9 m或更小的kd与人pd-1结合。

【专利技术属性】
技术研发人员：艾伦·J·科曼，莫汉·斯里尼瓦森，王常玉，马克·J·塞尔比，陈炳良，约瑟芬·M·卡达雷里，黄海春，
申请(专利权)人：小野药品工业株式会社，
类型：发明
国别省市：

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