一种CYP2C19基因多态性检测试剂盒及其检测方法技术

本发明专利技术公开了一种CYP2C19基因多态性检测试剂盒及其检测方法，该试剂盒包括超纯水、X溶液、10×PCR缓冲液，PCR引物、25mM氯化镁溶液、DNA聚合酶和阳性对照品，特点是PCR引物包括CYP2C19基因上的3个SNP位点上的不同基因型的正反向扩增引物、DNA内参的正反向扩增引物及反应内参的正反向扩增引物，其基因序列如SEQ?IDNO.1～NO.13所示，其检测包括采集样本并提取核酸的步骤；以患者核酸为模板进行PCR反应的步骤；最后GeXP遗传分析仪毛细电泳分离样品的步骤，优点是特异性强、灵敏度高、通量高、可靠性强、成本低、无假阴性结果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及多重基因检测试剂盒及其检测方法，尤其是涉及一种CYP2C19基因多态性检测试剂盒及其检测方法。
技术介绍
细胞色素P450 (CYP)酶系在药物代谢中占有极其重要地位。CYP2C19 (S-美芬妥英羟化酶)是CYP酶系中占主导地位的酶之一，其遗传多态性影响着许多临床药物的代谢，其活性存在明显的个体差异，对不同个体的药物治疗作用和不良反应及药物的毒性产生重要影响。FDA已将17种药物列入医生需要参考病人的CYP2C19的基因多态性信息用药。临床上CYP2C19基因多态性检测可以为个体化用药提供依据。目前，国内外已有多个CYP2C19基因型检测试剂盒，其主导方法为DNA微阵列芯片法。基因芯片是通过微加工技术，将数以万计、乃至百万计的特定序列的DNA片段(基因探针)，有规律地排列固定于硅片、玻片等支持物上，构成的一个二维DNA探针阵列，利用这类芯片与标记的生物样品进行杂交，可对样品的基因表达谱生物信息进行快速定性和定量分析。DNA芯片:由于高通量等优点在SNP检测中得到大量应用，依靠野生型与突变型基因杂交动力学的差异对突变位点进行检测。其优点是I)高通量并行检测；2)操作简本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种CYP2C19基因多态性检测试剂盒，包括超纯水、X溶液、10×PCR缓冲液，PCR引物、25mM氯化镁溶液、DNA聚合酶和阳性对照品，其特征在于所述的PCR引物包括以下CYP2C19基因上的3个SNP位点上的不同基因型的正反向扩增引物、DNA内参的正反向扩增引物及反应内参的正反向扩增引物，其基因序列如下表所示：其中，2*G/2*A表示该2号SNP位点有两种可能基因型G或A，两条反向引物分别指检测该SNP位点相应基因型G或基因型A的引物，在检测该SNP位点时两条引物要同时加到反应液中，3*G/3*A表示该3号SNP位点有两种可能基因型G或A；17*C/17*T表示该17号SNP位点有两种可能...

【技术特征摘要】
1.一种CYP2C19基因多态性检测试剂盒，包括超纯水、X溶液、IOXPCR缓冲液，PCR引物、25mM氯化镁溶液、DNA聚合酶和阳性对照品，其特征在于所述的PCR引物包括以下CYP2C19基因上的3个SNP位点上的不同基因型的正反向扩增引物、DNA内参的正反向扩增引物及反应内参的正反向扩增引物，其基因序列如下表所示:2.根据权利要求1所述的一种CYP2C19基因多态性检测试剂盒，其特征在于:包括三磷酸脱氧核苷酸和通用引物，所述的通用引物正向扩增弓I物序列为AGGTGACACTATAGAATA ；反向扩增引物序列为GTACGACTCACTATAGGGA，所述的通用引物正向扩增弓I物带荧光标记。3.根据权利要求1所述的一种CYP2C19基因多态性检测试剂盒，其特征在于:所述的阳性对照品为克隆到载体PMD18-T上的7个DNA片段和I个质粒pcDNA3.1 (+)，所述的7个DNA片段分别为包含有SNP位点上rs4244285的G型基因和A型基因、rs4986893的G型基因和A型基因、rsl2248560的C型基因和T型基因及人类基因beta-globin的片段。4.一种利用权利要求1-3中任一项所述的CYP2C19基因多态性检测试剂盒的检测方法，其特征在于具体包括以下步骤: (1)DNA样品的收集和提取 将刮取到口腔上皮细胞的口腔拭子放入300y L DNA裂解缓冲液中，在恒温混匀仪中于95° C，IOOOrpm的条件下，处理5分钟后取出，室温放置至冷却，然后在样品中加入...

【专利技术属性】
技术研发人员：南丽，孙婷婷，吴勇，
申请(专利权)人：海尔施生物医药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：