用于检测人类VKORC1与CYP2C9基因多态性的引物、探针、试剂盒及方法技术

本发明专利技术属于基因工程技术领域，公开了一种用于检测人类VKORC1与CYP2C9基因多态性的引物和探针组合、含有该引物和探针组合的试剂盒以及采用该引物和探针组合或试剂盒进行人类VKORC1与CYP2C9基因多态性检测的荧光PCR方法。本发明专利技术基于TaqMan荧光PCR技术，简单、快捷，灵敏度高。此外，本发明专利技术通过合理的引物和探针搭配，有效避免了引物与引物之间、引物与探针之间以及探针与探针之间的相互作用，减少了检测误差。本发明专利技术提供的引物、探针和试剂盒用于检测人类VKORC1与CYP2C9基因多态性具有敏感度高、特异性强、操作简易快速、安全、结果判读简单直观并且可直接使用血液样品或者滤纸干血片样品作为模板等优势。

【技术实现步骤摘要】
用于检测人类VKORC1与CYP2C9基因多态性的引物、探针、试剂盒及方法
本专利技术涉及基因工程
，具体涉及用于检测人类VKORC1与CYP2C9基因多态性的引物、探针、试剂盒及方法。
技术介绍
华法林是临床上常用的抗凝药物，是深静脉血栓、心房纤颤、心脏瓣膜置换术和肺栓塞等疾病的一线用药。但是华法林治疗窗很窄：药剂量小了，不能阻止血栓形成；剂量大了，又会导致出血，患者的最适用药量表现出明显的个体差异。目前已知与华法林药动学和药效学相关基因达30余种，其中维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位1(VitaminKepoxidereductasecomplexsubunit1，VKORC1)和细胞色素P4502C9(CytochromeP4502C9，CYP2C9)基因多态性是华法林个体剂量差异的主要影响因素。CYP2C9基因存在野生型CYP2C9*1和突变型CYP2C9*2～CYP2C9*13，其中与华法林代谢最密切的突变型为CYP2C9*2(rs1799853)和CYP2C9*3(rs1057910)，这2个位点的突变导致CYP2C9活性降低。CYP2C9*2型等位基因在中国人中本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于检测人类VKORC1与CYP2C9基因多态性的引物和探针组合，其中引物序列如序列1‑4所示，探针序列如序列5‑8所示，引物序列1‑2以及探针序列5‑6用于检测VKORC1基因的多态性，引物序列3‑4以及探针序列7‑8用于检测CYP2C9基因的多态性。

【技术特征摘要】
1.一种用于检测人类VKORC1与CYP2C9基因多态性的引物和探针组合，其中引物序列如序列1-4所示，探针序列如序列5-8所示，引物序列1-2以及探针序列5-6用于检测VKORC1基因的多态性，引物序列3-4以及探针序列7-8用于检测CYP2C9基因的多态性。2.根据权利要求1所述的引物和探针组合，其中探针的5’端有FAM或VIC修饰，3’端有NFQ-MGB修饰。3.根据权利要求1或2所述的引物和探针组合，其中每条引物的浓度为300nM，每条探针的浓度为200nM。4.一种用于检测人类VKORC1与CYP2C9基因多态性的试剂盒，其包含权利要求1-3中任一项所述的引物和探针组合。5.根据权利要求4所述的试剂盒，其中还包含阳性对照液和空白对照液，所述阳性对照液为分别含有三种不同VKORC1等位基因和两种不同CYP2C9等位基因的五种细胞系DNA，所述空白对照液为TE缓冲液。6.权利要求1-3中任一项所述的引物和探针组合在制备检测人类VKORC1与CYP2C9基因多态性试剂盒中的应用。7.权利要求1-3中任一项所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑仲征，安琳，芮立，尤开，
申请(专利权)人：深圳荻硕贝肯精准医学有限公司，上海荻硕贝肯医学检验所有限公司，上海荻硕贝肯生物科技有限公司，上海荻硕贝肯生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44