解脲脲原体UU检测试剂盒制造技术

本发明专利技术提供一种解脲脲原体（UU）检测试剂盒，所述试剂盒中包括核酸释放剂和PCR反应液，所述核酸释放剂包含莎梵婷（surfactin）0.01~0.5mM/L，氯化钾20~300mM/L，十二烷基磺酸钠0.01~2%和乙醇0.05~1%；所述PCR反应液中包含用于靶多核苷酸扩增的上游引物、下游引物和用于靶多核苷酸检测的探针。使用本发明专利技术试剂盒中的核酸释放剂释放核酸的方法与煮沸法的检测结果没有明显差异，而本发明专利技术中提取核酸时采用强烈的蛋白变性剂，快速破坏病原体外壳蛋白结构，释放出病原体核酸，无需加热即可完成DNA的释放和提取；本发明专利技术试剂盒检测UU的灵敏度可达400copies/ml，检测线性范围为400~4.00E+10copies/ml；应用该试剂盒可以对生殖道分泌物等未知样本中的UU-DNA进行快速准确的检测，为诊断解脲脲原体感染提供可靠的实验依据。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术提供一种解脲脲原体(UU)检测试剂盒，具体是一种基于荧光PCR的UU-DNA检测试剂盒。
技术介绍
解脲脲原体又称解脲支原体(UU)，属于柔膜纲支原体目支原体科的脲原体属，是一类介于细菌与病毒之间的最小原核微生物，主要分布于人体泌尿生殖道内，并通过性接触而传播，也可由母体垂直传染给胎儿。男性生殖道最常见的寄生处在尿道口和精液中，女性生殖道最常见的寄生处在阴道。解脲脲原体是非淋菌性尿道炎的主要病原体之一，感染后可导致多种生殖道炎症。在男性可导致非淋菌性尿道炎、急性附睾炎、前列腺炎等的发生；在女性可引起子宫内膜炎、输卵管炎、卵巢炎等，宫内感染可引起流产、死胎、早产等不良后果。近年来，UU作为主要病原体的报道增多，但是许多感染者临床症状不典型，因此，早期、简便、快速，特异地诊断UU，对临床的诊断、疾病的早期治疗和预防其流行等具有重要的意义。目前解脲脲原体的实验室诊断方法主要有分离培养法、免疫学方法、基于核酸检测的分子生物方法等。分离培养法的特异性和敏感性高，但其具有临床检测时间过长(至少需要24tT48h，甚至更长时间)，过程繁琐，需要使用特殊的培养介质以及易受杂菌影响等缺陷，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种核酸释放剂在解脲脲原体UU检测中的应用，所述核酸释放剂包含莎梵婷（surfactin）0.01~0.5mM/L，氯化钾20~300mM/L，十二烷基磺酸钠0.01~2%和乙醇0.05~1%。

【技术特征摘要】
1.一种核酸释放剂在解脲脲原体UU检测中的应用，所述核酸释放剂包含莎梵婷(surfactin)0.θΓθ.5mM/L，氯化钾 2(T300mM/L，十二烷基磺酸钠 0.01 2%和乙醇 0.05 1%。2.一种解脲脲原体UU检测试剂盒，所述试剂盒中包括核酸释放剂和PCR反应液，所述核酸释放剂包含莎梵婷(surfactin) 0.θΓθ.5mM/L,氯化钾2(T300mM/L，十二烷基磺酸钠0.0f 2%和乙醇0.05^1% ;所述PCR反应液中包含用于靶多核苷酸扩增的上游引物、下游引物和用于靶多核苷酸检测的探针。3.根据权利要求2所述的检测试剂盒，其特征在于，用于靶多核苷酸的探针序列为5’-TTTTGCTGACTCACGTATTCGTAGCCAA-3，。4.根据权利要求2所述的检测试剂盒，其特征在于，用于靶多核苷酸的上游引物和下游引物序列分别为:5’ -CACCACTTAAATCCTAAGGTTCCAG-3’ 和 5’ -CTGATGACATAATTGAGATTGCACC-3，。5.根据权利要求2 4中任意一项所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中还包括内标，所述内标序列为 5，-GTGTCTGCGGCGTTTTATCATCTTCCTCTGTCATCCAGTGCAAGTCTTGATCCTGTCGTTGGTTCTTCTGGACTATCAAGGTATG...

【专利技术属性】
技术研发人员：戴立忠，邓中平，李勃，
申请(专利权)人：湖南圣湘生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：