淋球菌、沙眼衣原体及解脲脲原体检测试剂盒制造技术

技术编号:6931009 阅读:371 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术公开了一种淋球菌、沙眼衣原体及解脲脲原体检测试剂盒,包括:(1)一个基因芯片,其上带有:(i)不同病原体的核苷酸探针,其中探针为SEQ?ID?Nos:1-3或与SEQ?ID?Nos:1-3互补的序列;(ii)标记有生物素点的DNA序列,序列为SEQ?IDNo.4;(iii)带有编码β-球蛋白部分的DNA序列,作为内控点,序列为SEQ?ID?No.5;(2)各种引物,用于扩增临床样本中的DNA序列,引物的DNA序列为SEQ?ID?Nos.6-11。本发明专利技术所述试剂盒能够快速、准确检测出淋球菌、沙眼衣原体、解脲脲原体感染,对于病原体检测具有重大的意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因领域,具体是一种淋球菌、沙眼衣原体及解脲脲原体检测试剂盒
技术介绍
淋球菌、沙眼衣原体和解脲脲原体是一类由性接触为主要传播途径的病原体,也是临床上除梅毒螺旋体外引起各种性传播疾病中的主要病原体,它们可分别引发淋病和非淋球菌性尿道炎(宫颈炎),这些病原体在感染病人的同时,还能引起并发感染,如HIV感染。淋病是目前世界上发病较多的性病之一,每年以20% 30%速度递增,由于滥用抗生素及反复感染,导致淋病的临床表现缺乏特异性,尤其女性,感染初期的60% 70% 呈现无症状过程,如不及时诊断治疗,既可成为传染源传给他人,也可继续发展成为盆腔炎,损伤输卵管及卵巢,引起宫外孕和不育症等,故实验室检查对临床确诊及治疗有重大意义沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis, CT)感染为美国最常见的性传播疾病 (STD),每年有4 5百万病例发生,每年花费可达40亿美元。据世界卫生组织(WHO)估计, 每年有9,200万新的CT感染病例发生。在发展中国家其发生率也呈逐年上升趋势。CT可引起沙眼、泌尿生殖道感染、尿道炎(宫颈炎)、附睾炎及不孕不育等。支原体感染男女泌尿生殖道的发病率成逐年上升趋势,女性下生殖道是支原体感染好发的部位,上行还可以子宫腔和输卵管腔从而引起炎症和并发症。吴志芬等对无锡市 1600例男女生殖道感染者进行支原体检测,其中解脲脲原体的感染率为42. 3%,表明支原体的感染率高,已构成流行。淋病奈瑟菌的实验室诊断主要依靠细菌培养,该法准确可靠,但往往需要2 3天才能得到结果,且常因标本采集方法和运送方式不正确,而使淋病奈瑟菌死亡造成培养失败,使培养阳性率偏低。涂片法操作简单,但缺乏特异性,而且受采集、涂片、染色、镜检等操作过程中的主观因素影响造成漏检。核酸检测法快速、灵敏度和特异度高,是近年来发展的有效方法,但成本较高。衣原体的实验室诊断主要有细胞培养技术、直接涂片镜检技术、抗原抗体免疫技术、聚合酶链反应、连接酶链反应和糖元试验。直接涂片镜检、免疫胶体金法为临床常用的方法;自动酶联免疫法(VIDAQ,仪器昂贵,检测成本较高;PCR通过方法学及试剂的改进, 有望成为临床首选使用方法;LCR为目前已知较理想的方法,但其仪器昂贵,难以在基层推广;细胞培养技术为衣原体实验室诊断的黄金标准,但在医院由于费时等原因难以推广。支原体的实验室诊断包括分离培养法、免疫学方法和分子生物学方法。在标本中分离培养出支原体对支原体感染的诊断有决定性的意义。但该法灵敏度低,时间长,不利于早期快速诊断。ELISA法敏感性和特异性高,重复性好,简便、快速,可以测定抗体或抗原,有广阔的应用前景。PCR法存在假阳性和假阴性,但此法快速、简便、特异且敏感,众多的优点使其在临床上可能得到广泛应用。杂交法能提升DNA分析的特异性,但是大多数杂交方法耗时耗力,无法达到临床快速检测的要求。将PCR检测灵敏性高的特点配合特异性极高的反斑点杂交技术以一种简单、快速且省钱的方式结合起来,利用导流杂交技术(美国专利5,741,647和6,020,187 ; 中国专利02102795. 1)可大大提高杂交的效率,且操作方便。因此,研制和开发一种可利用导流杂交技术快速、简便、特异、敏感检测淋球菌、沙眼衣原体和解脲脲原体的产品具有重要的意义。
技术实现思路
本专利技术的目的是为了解决上述问题,提供一种淋球菌、沙眼衣原体及解脲脲原体检测试剂盒,包括(1) 一个基因芯片,其上带有⑴不同病原体的核苷酸探针,其中探针为SEQ ID Nos :1_3或与SEQ ID Nos :1_3 互补的序列,探针序列如下权利要求1.一种淋球菌、沙眼衣原体及解脲脲原体检测试剂盒,包括 (1) 一个基因芯片,其上带有(1)不同病原体的核苷酸探针,其中探针为SEQID Nos :1_3或与SEQ ID Nos :1_3互补的序列;(ii)标记有生物素点的DNA序列,序列为SEQID No. 4 ;(iii)带有编码β-球蛋白部分的DNA序列,作为内控点,序列为SEQID No. 5 ;(2)各种引物,用于扩增临床样本中的DNA序列,引物的DNA序列为SEQID Nos. 6-1102.权利要求1所述试剂盒,其特征在于,所述探针5'或3'端经过胺基化处理。3.权利要求1所述试剂盒,其特征在于,所述基因芯片包括用于定位探针的位置标记。4.权利要求1所述试剂盒,其特征在于,所述基因芯片的探针是固定在尼龙膜上。5.权利要求1所述试剂盒,其特征在于,所述引物的5'端标记有生物素。全文摘要本专利技术公开了一种淋球菌、沙眼衣原体及解脲脲原体检测试剂盒,包括(1)一个基因芯片,其上带有(i)不同病原体的核苷酸探针,其中探针为SEQ ID Nos1-3或与SEQ ID Nos1-3互补的序列;(ii)标记有生物素点的DNA序列,序列为SEQ IDNo.4;(iii)带有编码β-球蛋白部分的DNA序列,作为内控点,序列为SEQ ID No.5;(2)各种引物,用于扩增临床样本中的DNA序列,引物的DNA序列为SEQ ID Nos.6-11。本专利技术所述试剂盒能够快速、准确检测出淋球菌、沙眼衣原体、解脲脲原体感染,对于病原体检测具有重大的意义。文档编号C12Q1/04GK102277429SQ20111021462公开日2011年12月14日 申请日期2011年7月22日 优先权日2011年7月22日专利技术者朱娟娟, 邱美兰 申请人:广东凯普生物科技股份有限公司本文档来自技高网
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【技术保护点】
1.一种淋球菌、沙眼衣原体及解脲脲原体检测试剂盒,包括:(1)一个基因芯片,其上带有:(i)不同病原体的核苷酸探针,其中探针为SEQ ID Nos:1-3或与SEQ ID Nos:1-3互补的序列;(ii)标记有生物素点的DNA序列,序列为SEQ ID No.4;(iii)带有编码β-球蛋白部分的DNA序列,作为内控点,序列为SEQ ID No.5;(2)各种引物,用于扩增临床样本中的DNA序列,引物的DNA序列为SEQ ID Nos.6-11。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:邱美兰朱娟娟
申请(专利权)人:广东凯普生物科技股份有限公司
类型:发明
国别省市:44

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