疫苗组合物制造技术

本发明专利技术涉及奈瑟球菌免疫原性组合物和疫苗领域、它们的生产和这样的组合物在药物中的用途。所述的嵌合fHbp(因子H结合蛋白)蛋白和包含所述蛋白的组合物会克服针对fHbp的免疫应答的问题，所述免疫应答对衍生出所述fHbp的脑膜炎球菌菌株是特异性的。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】疫苗组合物
本公开内容涉及奈瑟球菌免疫原性组合物和疫苗、它们的生产和这样的组合物在药物中的用途的领域。
技术介绍
细菌中的奈瑟球菌菌株是很多人类病变的致病因子，需要研制出可抗这些致病因子的有效疫苗。特别是，淋病奈瑟球菌OVeisseria和脑膜炎奈瑟球菌 {Neisseria meningitidis)所引起的病变可通过接种疫苗而治疗。脑膜炎奈瑟球菌是一种重要的病原体，特别是在儿童和年轻人中。败血症和脑膜炎是侵入性脑膜炎球菌病(MD)的最严重威胁生命的形式。这种疾病由于其较高的发病率和死亡率已经成为全世界的健康问题。根据荚膜多糖的抗原差异，已经鉴定出了 13种脑膜炎奈瑟球菌血清群，最普遍的是A、B和C，它们导致全世界90%的该疾病。血清群B是欧洲、美国和拉丁美洲几个国家中脑膜炎球菌病的最普遍原因。已经研制出了基于血清群A、C、W和Y的荚膜多糖的疫苗，它们表现出可控制脑膜炎球菌病的暴发(Peltola等人，1985 Pediatrics 76 ;91_96)。然而，血清群B的免疫原性较差，且仅主要诱导IgM同种型的短暂抗体应答(Ala’Aldeen D和Cartwright K 1996, J.1nfect. 33 ; 153-157)。因此，目前还没有能够抗导致绝大多数温带国家中大多数该疾病的血清群B脑膜炎球菌的广泛有效的疫苗。尤为严重的是，血清型B疾病在欧洲、澳洲和美洲的发生率日益增加，主要是在5岁以下的儿童中 。抗血清群B脑膜炎球菌的疫苗的研制提出了一个特有的困难，即由于多糖荚膜与人神经细胞粘着分子的免疫学相似性导致其免疫原性较差。因此，已经将疫苗生产的方案集中于脑膜炎球菌外膜的表面暴露结构，但却已经被这些抗原在菌株之间的显著变异所阻碍。一种测试中的抗原是fHbp。但是，已经再次发现针对fHbp的免疫应答对衍生出所述fHbp的脑膜炎球菌菌株是特异性的。Lewis等人公开了 fHbp作为疫苗候选物的状态。Expert Reviews Vaccines 8(6) 第 729 页，(2009)。Beernink和 Granoff (“Bactericidal antibody induced by meningococcal recombinant chimeric 因子 H 结合 protein vaccines” Inf. & I mm. 第 76 卷， 第 2568-2575页，2008)公开了工程设计含有fhbp的不同结构域的嵌合fHbp分子的可能性， 这基于所述蛋白的3个结构域模型，也基于所述蛋白分类成3个主要抗原组。最近的尝试还已经提示，抗-fH MAb杀菌活性的模型需要针对非重叠表位的2种 MAb的结合,这会活化经典的补体途径以及抑制fH结合(P. T. Beernink , 2008“Fine antigenic specificity and cooperative bactericidal activity of monoclonal antibodies directed at the meningococcal vaccine candidate Factor H—binding protein” Inf. & I mm.第 76 卷，第 4232-4240 页)。W0/2009/114485公开了含有异源b结构域的嵌合因子H结合蛋白(fHbp)和使用方法。
技术实现思路
本文提供了嵌合fHbp蛋白和包含所述蛋白的组合物。本公开内容涉及包含氨基酸序列Fl和F2的融合蛋白，其中Fl是第一个fHbp氨基酸序列的N-端片段；F2是第二个fHbp氨基酸序列的C-端片段；所述第一个和第二个fHbp 氨基酸序列来自不同的fHbp家族，其中片段Fl和F2的长度都是至少10个氨基酸；其中所述融合蛋白能够引发针对两个fHbp家族的抗体。在另一个方面，本公开内容涉及编码本公开内容的融合蛋白的多核苷酸。在另一个方面，本公开内容涉及重组宿主细胞，其含有本公开内容的多核酸。在另一个方面，本公开内容涉及分离的外膜囊泡，其包含本文公开的融合蛋白。在另一个方面，本公开内容涉及生产融合蛋白的方法，所述方法包括在外膜囊泡中表达本文公开的融合蛋白。在另一个方面，本公开内容涉及生产融合蛋白的方法，所述方法包括在适合表达 嵌合fHBP的条件下，培养含有本公开内容的多核酸的重组宿主细胞；和分离所述嵌合 fHBPo在另一个方面，本公开内容涉及药物组合物，其包含本公开内容的融合蛋白和药学上可接受的赋形剂。在另一个方面，本公开内容涉及疫苗，其包含本公开内容的融合蛋白和药学上可接受的赋形剂。在另一个方面，本公开内容涉及治疗或预防脑膜炎奈瑟球菌感染或疾病的方法， 所述方法包括给有此需要的宿主施用保护剂量的本公开内容的疫苗。在另一个方面，本公开内容涉及用于治疗或预防脑膜炎奈瑟球菌感染或疾病的本公开内容的融合蛋白，和本公开内容的融合蛋白在药物生产中的用途，所述药物用于治疗或预防脑膜炎奈瑟球菌感染或疾病。附图说明图1 -使用fHbp (菌株MC58 -全长序列的氨基酸残基1-202)、LVL491、LVL511、 LVL512.LVL513和LVL514进行的蛋白序列比对。图2 -使用fHbp (菌株8047 -全长序列的氨基酸残基157-274)、LVL491、 LVL511、LVL512、LVL513和LVL514进行的蛋白序列比对。图3 -显示了融合体A的潜在结构。图例白色-来自菌株MC58 (fHbp家族B) 的蛋白序列；黑色-来自菌株8047 (fHbp家族A)的蛋白序列；灰色(箭头)-Glu217和 Thr238向丙氨酸的2点突变。图4 -显示了融合体B的潜在结构。图例白色-来自菌株MC58 (fHbp家族B) 的蛋白序列；黑色-来自菌株8047 (fHbp家族A)的蛋白序列；灰色(箭头)-Glu217向 Ala的点突变。图5 -显示了融合体C的潜在结构。图例白色-来自菌株MC58 (fHbp家族B)的蛋白序列；黑色-来自菌株8047 (fHbp家族A)的蛋白序列；灰色-Glu218和Thr239 向丙氨酸的2点突变;灰色(+箭头)-Aspl46、Lysl48和Ser204分别向Glul46、Argl49 和Arg204的3点突变；添加Gly 148。图6 -显示了融合体E的潜在结构。图例白色-来自菌株MC58 (fHbp家族B) 的蛋白序列；黑色-来自菌株8047 (fHbp家族A)的蛋白序列；灰色-Glu218和Thr239 向丙氨酸的2点突变；灰色-Aspl46、Lysl48和Ser204分别向Glul46、Argl49和Arg204 的2点突变；添加Glyl48 ;灰色+箭头-Arg230向Lys230的突变。图7 -显示了 TdfI结构。图8 -显示了表达不同水平的fHBP的完整细胞的蛋白印迹高(线I)、中等(线 7)、低(线5)和不可检测(线2、3、4、6)。序列标识符在序列表中包括下述序列标识符，并在说明书提及SEQIDNO:1-SEQIDNO:2 -SEQIDNO:3 -SEQIDNO:4-SEQIDNO:5 -SEQIDNO:6 -SEQIDNO:7 -SEQIDNO:8 -SEQI本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：C卡斯塔多，NI德沃斯，J普尔曼，V韦南茨，
申请(专利权)人：葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司，
类型：
国别省市：