疫苗组合物和方法技术

本发明专利技术涉及包含至少一种疫苗抗原以及活的免疫细胞的药物疫苗组合物。这些免疫细胞包括至少一部分活化的Ｔ细胞并且作为佐剂。也包括使用这些药物组合物预防或治疗疾病，如癌症、传染病和自身免疫病的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及疫苗领域，更具体地，涉及佐剂化的疫苗组合物。
技术介绍
利用免疫系统的力量来治疗慢性传染病或者癌症是免疫疗法的主要目标。疫苗 接种(aka，主动免疫疗法)被设计成激活免疫系统以特异识别和防御入侵病原体。在过去 200年里，主动免疫疗法已经用于预防多种传染病，如天花、狂犬病、伤寒、霍乱、瘟疫、麻疹、 水痘、腮腺炎、脊髓灰质炎、乙型肝炎和破伤风和白喉毒素。主动免疫疗法概念现在被用于开发治疗性癌症疫苗，目的是治疗现有的肿瘤或者 预防肿瘤复发，以及被用于治疗和预防慢性病毒感染。然而，现有的主动免疫疗法技术在防 御许多现代疫苗靶标如HIV/AIDS、乙型肝炎和癌症中还没有成功。这部分是由于当前的疫 苗接种技术不能引起正确类型的免疫应答。针对感染或其他抗原性攻击所产生的免疫应答类型一般可以通过参与该应答的T 辅助(Th)细胞亚类来区分。可将免疫应答粗略地分为两类Thl和Th2。Thl免疫活化最 适宜细胞内感染，如病毒，并且涉及自然杀伤(NK)细胞和可以裂解受感染细胞的溶细胞性 T细胞(CTL)的活化，而Th2免疫应答最适宜体液(抗体)应答。Thl免疫活化最佳地希望 用于癌症治疗，Th2免疫应答更多地针对特异抗体的分泌并且对于肿瘤治疗的重要性相对 较低。现有技术疫苗组合物擅长于引起Th2或者体液免疫应答，其对于癌症和多数病毒疾 病是无效的。使用佐剂是影响对疫苗组合物中的抗原的免疫应答的一种策略。铝盐和鲨烯的水 包油乳液(MF59)是人类疫苗中最广泛使用的佐剂。这些佐剂显著促进针对抗原的Th2体 液(抗体)应答并且有效升高血清抗体效价，但是不引起显著的Thl应答或者CTL。然而， 针对慢性感染(例如，人免疫缺陷病毒(HIV)、丙型肝炎病毒(HCV)、结核病、单纯疱疹病毒 (HSV)和癌细胞的疫苗需要产生Thl细胞免疫应答以发挥预防和治疗效果。已经证明现有技术中的一些实验性主动免疫疗法技术和方案在所选的患者中成 功引起针对肿瘤抗原的Thl应答，导致循环系统中CTL免疫细胞的频率增加，所述细胞能够 特异杀死肿瘤或病原体感染的细胞。然而，尽管能够引起Thl应答，但是肿瘤逃避机制可以 打败该免疫应答，导致最终肿瘤的发展。病毒也已经发展了许多对策来避免免疫攻击和保 持移动免疫系统的靶标。附图简述图Ia是施用所述组合物后小鼠的存活图。图Ib是施用所述组合物后小鼠的存活图。图加是施用所指出的组合物后小鼠的存活图。图2b是施用所指出的组合物后小鼠的存活图。专利技术概述一方面，本专利技术包括药物组合物。该组合物包含佐剂和一种或多种抗原，其中佐剂 包含活的免疫细胞，其中至少一部分是活化的T细胞。对宿主施用该组合物产生了 Thl应答。另一方面，本专利技术包括包含活的免疫细胞的佐剂组合物，其中至少一部分免疫细 胞是活化的T细胞。对宿主施用该佐剂组合物引起了 Thl免疫应答。再一方面，本专利技术包括制备药物组合物的方法。该方法包括制备包含活的免疫细 胞的佐剂，其中免疫细胞包含至少一部分T细胞，并且将一种或多种抗原与佐剂组合，其中 该药物组合物当施用于宿主时在宿主中刺激免疫应答。另一方面，本专利技术包括减少宿主中与疾病相关或引起疾病的抗原的方法。该方法 包括施用包含佐剂和一种或多种抗原的药物组合物。该佐剂包括活的免疫细胞，其中免疫 细胞包含至少一部分T细胞，并且其中该药物组合物当施用于宿主时在宿主中刺激免疫应答。在再一方面，本专利技术包括治疗患者疾病的方法。该方法包括施用包含佐剂和一种 或多种抗原的药物组合物。该佐剂包括活的免疫细胞，其中免疫细胞包含至少一部分T细 胞，并且其中该药物组合物当施用于患者时在宿主中刺激免疫应答。优选实施方案详述本专利技术提供了药物疫苗组合物和主动免疫疗法的方法，其能够在患者中引起针对 疾病的预防性和治疗性Thl免疫，同时也提供克服疾病病原体和肿瘤的免疫逃避机制的手 段。本专利技术的药物组合物一般包括(1) 一种或多种抗原来源；和( 活的活化的免疫细胞， 其中至少一部分是T细胞。在本专利技术中，描述了用于患者的一种新的疫苗佐剂。该佐剂可以与一种或多种疫 苗抗原混合在一起形成药物组合物。在一些实施方案中，佐剂可以单独用作免疫刺激剂。 该新的佐剂包含活的免疫细胞，其中至少一部分是T细胞。T细胞优选为Thl表型(产生 IFN- γ并且不产生IL-4的CD4+T细胞)的记忆T细胞(CD45R0+，CD62LLo)。该记忆Thl细 胞在配制和引入患者时活化。优选的活化方法是通过在T细胞上交联CD3和CD^表面分 子。其他活化方法也在本专利技术范围内。活化的记忆T细胞优选当被活化时表达CD40L，并且 产生大量的炎性细胞因子(如IFN- γ，GM-CSF和TNF- α )。这些活化的Thl记忆细胞优选 对患者是异源的(allogeneic)。药物疫苗组合物一般含有与佐剂混合的至少一种抗原。根据现有技术，公知的实 践是通过佐剂增强存在于疫苗中的抗原诱导的免疫应答。本文引用的佐剂是可以增加抗原 的内在免疫原性的化合物。术语“佐剂)也通常用作“免疫刺激剂”的同义词。用于新的疫苗靶标如癌症和传染病的佐剂不仅是增加对疫苗抗原的免疫原性所 需的，而且也通常是针对疫苗抗原的现有的免疫应答从Th2偏向Thl所需的。此外，疫苗的 功效通常需要放大该偏离的免疫应答。本专利技术的疫苗佐剂组合物提供了这些免疫调节和免 疫加强性质。已知一些佐剂促进针对抗原的Thl免疫，包括皂苷、BCG、脂质体和微粒、多聚I:C、抗_CD40mAb、共刺激分子、IC31、TLR9配体、KLH、CpG、α -半乳糖神经酰胺、TLR4激动剂、 霍乱毒素、细胞因子、趋化因子、免疫刺激复合体(ISCOMs)、LPS、分子激动剂(例如，NAIP, CIITA、HET-E、TP-1-富含亮氨酸的重复单位途径受体)、TNF受体超家族(TNFRSF)激动剂、 alarmins和免疫抑制细胞因子和Tregs的阻断剂。这些佐剂各自具有在免疫调节或免疫刺 激必需或者失去免疫逃避能力必需的免疫学事件级联的一个水平上起作用的能力。然而， 这些佐剂都没有具有所有这些效应必需的性质。本专利技术涉及如下发现活化的免疫细胞，优选通过交联⑶3和⑶观抗原活化的产 生炎性细胞因子并表达CD40L的异源Thl记忆细胞可以引起作为有效免疫调节剂和免疫刺 激剂必要的免疫级联中的所有组分。此外，这些活化的免疫细胞能够干扰抑制性调节机理 以便克服病理生物和癌症逃避免疫攻击的能力。这使得这些细胞是理想的佐剂。一种或多种疫苗抗原与活化的T细胞的药物组合物可以用于预防目的或治疗目 的或者两者。通过所有常规使用的或推荐用于疫苗的途径施用该组合物，所述途径包括肠 胃外、皮内、肌内、皮下或粘膜途径。在一些实施方案中，也可以结节内或者肿瘤内施用该组 合物。药物组合物的抗原组分包括一种或多种抗原。如果在药物组合物中包括一种以上 的抗原，那么抗原可以来自相同抗原来源或不同的抗原来源。任何抗原来源可用于制剂中， 例如，这些抗原可以来自活细胞或生物，来源材料可以是冻融裂解物、放射失活的(或者其 他失活方法)、用作完整细胞或生物或其裂解物。在一些优选实施方案中，肿瘤细胞或肿瘤 细胞裂解物可以作为抗原的细胞来源材料。细胞来源材料可以来自自体或者异源细胞来源 或者来本文档来自技高网...

【技术保护点】
包含佐剂和一种或多种抗原的药物组合物，其中所述佐剂包含活的免疫细胞，其中至少一部分是活化的Ｔ细胞，并且对宿主施用所述组合物产生Ｔｈ－１应答。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】US61/049,9902008年5月2日1.包含佐剂和一种或多种抗原的药物组合物，其中所述佐剂包含活的免疫细胞，其中 至少一部分是活化的T细胞，并且对宿主施用所述组合物产生Th-I应答。2.权利要求1的组合物，其中所述T细胞是Th-I表型的记忆T细胞。3.权利要求1的组合物，其中所述T细胞通过在T细胞上交联⑶3和⑶观表面分子被活化。4.权利要求1的组合物，其中所述活化的T细胞表达⑶40L。5.权利要求1的组合物，其中所述T细胞对宿主是异源的。6.权利要求1的组合物，其中至少两种抗原与所述佐剂组合。7.权利要求1的组合物，其中所述一种或多种抗原来自选自完整细胞、生物、完整细胞 或生物的裂解物、裸DNA或RNA、细胞核材料、肽或蛋白质、抗体、抗原脉冲的或转染的树突 细胞的抗原来源。8.权利要求1的组合物，其中所述一种或多种抗原包括一种或多种肿瘤相关抗原。9.权利要求1的组合物，其中所述一种或多种抗原包括一种或多种热休克蛋白。10.权利要求1的组合物，其中所述一种或多种抗原的来源是恶性肿瘤。11.权利要求1的组合物，其中所述一种或多种抗原的来源来自病原体。12.包含活的免疫细胞的佐剂组合物，其中至少一部分所述免疫细胞是活化的T细胞 并且其中向宿主施用该佐剂组合物引起Th-I免疫应答。13.权利要求12的组合物，其中所述T细胞通过在T细胞上交联⑶3和⑶观表面分子 被活化。14.权利要求12的组合物，其中所述T细胞表达⑶40L。15.制备药物组合物的方法，包括制备包含活的免疫细胞的佐剂，其中免疫细胞包含至少一部分T细胞；和 组合一种或多种抗原与所述佐剂，其中该药物组合物当施用于宿主时在宿主中刺激免 疫应答。16.权利要求15的方法，其中所述佐剂和所述一种或多种抗原在施用于宿主前组合。17.权利要求15的方法，其中所产生的免疫应答是Thl应答。18.权利要求15的方法，其中所述T细胞是Th-I表型的记忆T细胞。19.权利要求15的方法，其中所述T细胞是活化的T细胞。20.权利要求15的方法，其中所述T细胞通过在T细胞上交联⑶3和⑶观表面分子被活化。21.权利要求15的方法，其中所述活化的T细胞表达⑶40L。22.权利要求15的方法，其中所述T细胞对宿主是异源的。23.权利要求15的方法，其中至少...

【专利技术属性】
技术研发人员：迈克尔·哈诺伊，
申请(专利权)人：免疫创新治疗有限公司，
类型：发明
国别省市：IL