包含含有至少一个CXXC基序的多肽和异源抗原的药物组合物及其用途制造技术

本发明专利技术涉及使用包含至少一个CXXC基序的多肽(如贾第虫寄生虫的可变表面蛋白质(VSP)或其片段)以通过口服或粘膜接种而引起对抗所选择的异源抗原如肿瘤抗原、微生物抗原或其它抗原的免疫应答的药物组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及药物组合物，及使用该药物组合物在受试者中产生、改变或调节免疫应答的方法。本专利技术更具体地涉及使用包含至少一个CXXC基序-如贾第虫(Giardia)寄生虫的可变表面蛋白(variable surface protein) (VSP)或其片段(例如，贾第虫VSP或其片段的胞外域)-的多肽通过口服或粘膜接种产生对抗选择的异源抗原-如肿瘤抗原、微生物抗原或其它抗原-的免疫应答的药物组合物。
技术介绍
本领域中已经提出了在受试者中引起免疫应答的各种策略，如抗原的直接施用、体外刺激和免疫细胞(例如，T淋巴细胞或树突状细胞)的扩增、注射遗传修饰或化学修饰的肿瘤细胞、施用灭活的病毒和使用编码特定抗原或细胞因子的核酸的基因治疗。虽然这些不同的方法允许产生对某些类型的抗原或病原体物质的免疫应答，但仍然需要引发、调节或刺激免疫应答的更好方法。特别地，需要产生针对多种抗原(如肿瘤抗原、病毒抗原或源自病原体物质的其它抗原)的有效的免疫应答(如有效的细胞和/或体液免疫应答)的简单方法，最特别地，通过口服施用进行的方法。事实上，如今可得到的大多数商业的疫苗是通过注射递送的，具有安全性、病人的接受程度和致病率的问题，且这使得大规模免疫接种更昂贵和不够安全，特别是在资源贫乏的发展中国家。因此，口服递送比其它施用途径具有许多显着的优势，特别是相比肠胃外疫苗(简单的施用和更高的安全性)。此外，不像全身免疫，口服递送可以诱导粘膜免疫应答。因此，口服递送的疫苗是通过消化道的免疫系统(通常称为肠道相关淋巴组织(GALT))加工和呈递的。GALT是由通过自导系统(homing system)连接的诱导位点(在遇到抗原和启动应答的情况中)和效应位点(在发生局部免疫应答的情况中)组成的复杂系统，从而通过在GALT中的抗原激活的细胞迁移至循环系统，并随后迁移至粘膜(Lavclle等；2006)。结果，口服疫苗可以在肠道中和在远方粘膜位点局部诱导免疫应答，以及全身的体液和细胞免疫应答。口服疫苗通常产生大量的在粘膜防御中发挥了主要作用的分泌型IgA(sIgA)。然而，即使疫苗递送的口服途径代表了递送预防性和治疗性疫苗的理想手段，提供了优于全身递送的显著优势，口服途径也是最困难的，因为胃肠道造成了众多障碍。为了促进肽和蛋白质疫苗的有效免疫，必须保护抗原、增强吸收和激活先天免疫应答。因此，众多的递送系统和佐剂已为用于口服疫苗递送而进行评估，包括活载体、惰性颗粒和细菌毒素。然而，到现在为止口服疫苗的发展仍是令人失望的，因为还没有通过单独使用蛋白质或病毒样颗粒(VLP)获得有效的口服免疫。因此，仍需要通过口服或粘膜施用引发、调节或刺激免疫应答的更好方法，如针对各种抗原如肿瘤抗原、病毒抗原或来自病原体物质的其它抗原的高效率的细胞和/或体液免疫应答。专利技术概要现在本专利技术提供了这样一种新型的、替代的和改进的通过口服或粘膜施用在受试者中引发、调节或刺激免疫应答的方法。本专利技术更特别地基于通过口服或粘膜施用使用含有至少一个CXXC基序(其中C代表半胱氨酸残基和X代表任何氨基酸残基)的多肽，如贾第虫寄生虫的可变表面蛋白(VSP)或其片段(例如，贾第虫VSP或其片段的胞外域)，以引起针对选择的抗原的免疫应答，特别是细胞和/或体液免疫应答的新概念，从而治疗或预防受试者中由这种选择的抗·原引起的疾病。本专利技术还公开了包含载体颗粒和/或融合蛋白的相关药物组合物，其制备方法和用途，其允许通过口服或粘膜施用产生针对抗原的改善的免疫应答。在第一个方面，本专利技术因此涉及药物组合物，该组合物至少包含-包含至少一个CXXC基序的多肽，其中C代表一个半胱氨酸残基和X代表任何氨基酸残基，和-异源抗原。在第二个方面，本专利技术涉及一种融合蛋白，其包含含有至少一个如上所定义的CXXC基序且保持附着于肠道上皮细胞的能力的多肽和异源抗原。在第三个方面，本专利技术涉及与载体颗粒结合的包含至少一个如上所定义的CXXC基序且保持附着于肠道上皮细胞的能力的多肽。在第四个方面，本专利技术涉及用于治疗或预防受试者的疾病、紊乱或生理状况的药物组合物。在第五个方面，本专利技术涉及使用包含至少一个如上所定义的CXXC基序的多肽如贾第虫VSP或其片段作为异源抗原的载体用于呈递和接种、尤其是口服或粘膜接种的用途。专利技术详述本专利技术第一次证明了包含至少一个CXXC基序(其中C代表半胱氨酸残基和X代表任何氨基酸残基)的蛋白质或多肽，如贾第虫可变表面蛋白(VSP)(例如，贾第虫VSP或其片段的胞外域)，可以通过口服途径被用作候选疫苗抗原的载体以诱导保护性免疫。此夕卜，本专利技术证明，这种多肽如VSP的胞外域(其耐受蛋白酶、不同的PH值和能够附着于肠道上皮细胞)可用于形成适合口服施用的病毒样颗粒(VLP)。定义在整个说明书中使用和在下面的段落中定义了几个术语。如本文所使用的术语“免疫原性的”是指引发、导致、刺激或调节免疫应答或反应的产物、组合物或方法。因此，免疫原性的组合物是在受试者中或在体外改变免疫系统活性的任何组合物。这包括保护性免疫应答、细胞免疫应答、抗体应答、中和免疫应答、抗体水平的改变、免疫细胞水平的改变，等等。如本文所使用的术语“抗原”是指当被MHC分子加工和呈递时，能够被抗体或被T细胞受体(TCR)特异性结合的分子。本文所使用的术语“抗原”还包括T-细胞表位。另外，抗原能够被免疫系统识别和/或能够诱导导致B-和/或T-淋巴细胞活化的体液免疫应答和/或细胞免疫应答。然而，至少在某些情况下，这可能需要该抗原包含或连接到Th细胞表位和在佐剂中给出，或需要该抗原按照本专利技术进行呈递。抗原可以具有一个或多个表位或抗原性位点(B-和T-表位)。如本文所使用的术语“特异性结合”意在指出该抗原将通常以高度选择性的方式优先与其对应的抗体或TCR反应，而不与可能被其它抗原诱发的大量的其它抗体或TCR反应。如本文所使用的术语“表位”是指在动物，优选地是哺乳动物，和最优选地人体内具有抗原性或免疫原性活性的多肽或非肽分子的连续的或不连续的部分。表位在MHC分子的环境中通过其T细胞受体由抗体或T细胞识别。如本文所使用的“免疫原性表位”被定义为如通过本领域中已知的任何方法所确定的在 动物中引发抗体应答或诱导T细胞应答的多肽或非肽分子的部分。如本文所使用的术语“抗原性表位”被定义为如通过本领域中已知的任何方法所确定的，抗体可以免疫特异性地结合于其抗原的蛋白质或非肽分子的部分。免疫特异性结合不包括非特异性结合，但不一定排除与其它抗原的交叉反应。抗原性表位不一定是免疫原性的，抗原性的表位也可以是T细胞表位，在这种情况下，它们可以在MHC分子的环境中通过T细胞受体免疫特异性地结合。如本文所使用的术语“异源抗原”是指相对于寄生虫贾第虫(特别是蓝氏贾第虫(Giardia Iamblia))或如本专利技术的上下文中所定义的其它微生物为异源的抗原，且因此这样的异源抗原不是来源于该寄生虫贾第虫或所述的其它微生物。因此在本专利技术的上下文中，术语“异源抗原”包括植物抗原、动物抗原、寄生虫抗原(例如，源自贾第虫的抗原以外的寄生虫抗原)、细菌抗原、病毒抗原、肿瘤抗原、自体抗原或化学分子。然而，应该指出，如果本专利技术的多肽来源于另一微生物，例如，四膜虫属(Tetrahymena)、草履虫本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：D·克拉茨曼，E·皮亚乔，H·卢简，
申请(专利权)人：国家医疗保健研究所，国家科学研究中心，居里巴黎第六大学，巴黎公共救济院，国民议会科学和技术研究，科尔多瓦天主教大学，
类型：
国别省市：