【技术实现步骤摘要】
微环DNA基因载体组合物及其制备方法和应用
本专利技术涉及基因治疗领域，尤其涉及一种微环DNA基因载体组合物及其制备方法和应用。
技术介绍
基因治疗是治疗很多遗传性、获得性疾病最理想方法，目前已经有很多临床前实验成功的报道。然而，临床上成功的例子却鲜有报道。基因治疗的核心是将治疗载体送入靶细胞，但载体的构建和投送方面，还有若干技术问题有待解决。基因治疗载体可分为两类，即病毒载体和非病毒载体。病毒载体感染细胞的效率很高，但由于其免疫原性和插入性突变，容易引起严重的反应，包括致癌、致命，因而难以被临床接受；此外，制造成本高也是其应用的一大障碍。非病毒载体较安全、经济、转基因的大小无限制，相对于病毒载体具有一 定的优势，但目前还缺乏送入体内细胞的有效手段。全球有超过三亿五千万人，中国有超过一亿人，是乙型肝炎病毒(h印atitisBvirus, HBV)携带者。HBV可诱发肝衰竭、肝硬化及肝癌，导致感染者过早死亡。现有的治疗药物，包括核苷酸类药物、干扰素等，疗效不能持久，需经常或每天给药，价格昂贵且副作用大，应用范围有很大限制。疫苗注射可有效预防乙肝病毒感染扩散产生新带毒...
【技术保护点】
一种微环DNA基因载体组合物，其特征在于，包括：第一微环DNA基因载体和第二微环DNA基因载体；所述第一微环DNA基因载体不含标准质粒中能关闭转基因表达的骨架DNA成分，所述第一微环DNA基因载体包括：第一启动子、病毒基因组中负责基因表达和病毒复制的成分以及用于表达治疗性转基因产物的转基因或转基因表达盒子；所述第二微环DNA基因载体不含标准质粒中能关闭转基因表达的骨架DNA成分，所述第二微环DNA基因载体包括：第二启动子和所述病毒基因组中负责表达所述病毒的组装蛋白的基因；所述第一微环DNA基因载体可以在哺乳动物细胞内稳定的、高通量的表达所述病毒的基因成分和所述治疗性转基因产...
【技术特征摘要】
1.一种微环DNA基因载体组合物,其特征在于,包括第一微环DNA基因载体和第二微环DNA基因载体； 所述第一微环DNA基因载体不含标准质粒中能关闭转基因表达的骨架DNA成分，所述第一微环DNA基因载体包括第一启动子、病毒基因组中负责基因表达和病毒复制的成分以及用于表达治疗性转基因产物的转基因或转基因表达盒子； 所述第二微环DNA基因载体不含标准质粒中能关闭转基因表达的骨架DNA成分，所述第二微环DNA基因载体包括第二启动子和所述病毒基因组中负责表达所述病毒的组装蛋白的基因； 所述第一微环DNA基因载体可以在哺乳动物细胞内稳定的、高通量的表达所述病毒的基因成分和所述治疗性转基因产物至少两个星期，所述第二微环DNA基因载体可以在哺乳动物细胞内稳定的、高通量的表达所述病毒的组装蛋白至少两个星期，所述病毒的基因成分和所述病毒的组装蛋白可以在哺乳动物细胞内组装形成可以表达所述治疗性转基因产物并具有侵染性的重组病毒。2.如权利要求I所述的微环DNA基因载体组合物，其特征在于，所述病毒基因组中负责基因表达和病毒复制的成分为乙肝病毒基因组中负责基因表达和病毒复制的成分； 所述病毒基因组中负责表达所述病毒的组装蛋白的基因为乙肝病毒基因组中负责表达多聚酶、核心蛋白、大表面蛋白、中表面蛋白和小表面蛋白的基因。3.如权利要求2所述的微环DNA基因载体组合物，其特征在于，所述乙肝病毒基因组中负责基因表达和病毒复制的成分包括5’包装信号、3’包装信号、第一增强子以及病毒复制调节区域； 所述启动子、所述5’包装信号、所述转基因或转基因表达盒子、所述第一增强子、所述病毒复制调节区域以及所述3’包装信号依次连接。4.如权利要求2所述的微环DNA基因载体组合物，其特征在于，所述乙肝病毒基因组中负责基因表达和病毒复制的成分包括包装信号、第一增强子以及病毒复制调节区域； 所述包装信号、所述转基因或转基因表达盒子、所述第一增强子以及所述病毒复制调节区域依次连接，所述病毒复制调节区域和包装信号连接到一起，形成核心蛋白基因的启动子。5.如权利要求...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈志英，何成宜，
申请(专利权)人：中国科学院深圳先进技术研究院，
类型：发明
国别省市：
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