一种减弱反馈抑制菌株生产谷胱甘肽的方法技术

本发明专利技术提供了一种谷胱甘肽合成酶系重组质粒及其构建方法和应用、一种谷胱甘肽合成酶系的重组质粒及其构建方法和应用、一种累积谷胱甘肽方法。本发明专利技术提供的谷胱甘肽合成酶系重组质粒包括GSH1和GSH2序列和两段合适的载体片段；这种方法的原理在于，GSH1与GSH2连接在启动子不同的载体上，通过在不同时间添加诱导剂实现GSH1与GSH2的分步表达而减少反馈抑制；使用本发明专利技术提供的方法可以明显的减弱反馈抑制，提高了谷胱甘肽生产量，提高原料利用率，可为进一步研究生物法合成谷胱甘肽建立一个基础模型。除此之外，该方法及思路可以用于其他因反馈抑制限制产量提高的目的产物，为生产有价值的产品提供了新的思路。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物工程
，具体地说，是关于一株用减弱了反馈抑制的菌株提高谷胱甘肽累积量的方法。
技术介绍
谷胱甘肽(Y-L-glutamyl-cysteiny 1-glycine, GSH),是由 L-谷氨酸、L-半胱氨酸和甘氨酸组成的生物活性三肽化合物，是细胞内重要的抗氧化剂和主要的非蛋白巯基化合物(> 90% )。在生物组织中，谷胱甘肽通过谷胱甘肽还原酶保持氧化型和还原型的动态平衡并发挥细胞保护、物质代谢、信息调控、调节细胞及组织的发育、对抗或诱发疾病等作用，因此，大量应用于医药保健、护肤美容、食品添加等行业。对于谷胱甘肽的生产，经历了萃取法、化学合成法、酶催化法和发酵法，其中发酵法已成为生产谷胱甘肽的主要方法。基于发酵法的菌株选育和条件优化等生产方法的应用也使谷胱甘肽的生产得到了提高并广 泛在实验室规模上加以实验，但应用于实践的却不多，究其原因，主要是谷胱甘肽合成过程中的限速酶，Y -谷氨酰半胱氨酸合成酶容易受到终产物谷胱甘肽的反馈抑制，当终产物浓度达到一定程度后就会反馈抑制Y -谷氨酰半胱氨酸合成酶的活性，使产量维持在较低的水平。多年来，科研工作者们用了很多方法本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种谷胱甘肽合成酶系重组质粒，其特征在于，重组质粒包括两个，分别由GSH1和GSH2序列和一段合适的载体片段连接而成，所述GSH1和GSH2序列分别如NCBI上Gene？ID为242378250和253978924的序列所示，载体片段为pET28a和pBAD24。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：许激扬，卞筱泓，赵玉成，邵飞，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：