本发明专利技术涉及预防和/或治疗急性应激性胃肠道损伤性疾病的细胞生长因子基因药物，HIF-1α和KGF基因在制备用于预防和/或治疗急性应激性胃肠道损伤性疾病的药物中的用途。本发明专利技术还涉及包含所述HIF-1α和KGF的药物组合物。本发明专利技术可以有益地预防和/或治疗急性应激性胃肠道损伤性疾病。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及细胞生长因子基因药物在应激性胃肠损伤防治中的应用，特别涉及低氧诱导因子-1 α (hypoxia-inducible factor-1 α，HIF-I α )和角质细胞生长因子(keratinocyte growth factor, KGF)的联合在预防和/或治疗应激性胃肠损伤疾病中的应用，更特别涉及其在预防和/或治疗急性应激致胃肠损伤疾病中的应用。
技术介绍
胃肠黏膜是营养物质消化、吸收的重要场所，然而多种应激因素，包括病原微生物因素、物理因素、化学因素、机械性因素等多种因素，作为应激源均易引起胃肠道黏膜损伤。同时胃肠黏膜屏障作为应激反应的中心器官之一，參与多种疾病的发生、发展和转归，其损伤的机制包括胃肠黏膜缺血、缺氧及氧自由基的损伤、细胞因子的损伤、肠道免疫功能受损和细胞凋亡。其中缺氧是造成胃肠黏膜损伤的关键，尤其是在高海抜地区，与低海抜地区相比，气候有很大不同，低压、缺氧、寒冷、干燥、辐射强、气候多变，这些因素尤其是缺氧，对进入高海抜地区的人群造成不同程度的胃肠道应激性急性损伤。此外，由于气候环境的影响，高海抜地区疾病的发生、发展具有独特的特征，胃肠黏膜屏障參与多种高原疾病的发生、生发展和转归，其急性应激损伤后，轻者产生急性炎症反应，影响动物营养物质的吸收，胃肠道菌群失调，产生毒素；重者，胃肠道黏膜形成溃疡，甚至穿孔，从而严重影响人们的生活质量，甚至威胁人的生命。另外急性应激性胃肠道损伤常作为其他许多疾病的继发症状出现，其对其他疾病的发展、转归有着重要的决定作用。总之，急性应激性胃肠道损伤对人类的健康造成了极大的威胁。因此胃肠道急性应激性损伤疾病的防治，尤其是高海拔胃肠道急性应激性损伤疾病的防治显得至关重要。当前胃肠黏膜损伤的治疗手段主要有抗生素、微生态制剂、肠外营养、中药，虽然以上各种治疗方法具有一定的治疗效果，但未从源头改变损伤部位缺氧环境；且由于胃肠黏膜屏障的损伤，吸收功能会大大降低，有效的药效浓度很难控制和維持；使胃肠黏膜损伤的修复不尽如意。而对原本缺氧高海拔的环境下的胃肠应激损伤的防治更是显得无力。因此，研究新型的、高效的防治胃肠应激性损伤的药物尤其是防治高海抜胃肠应激性损伤的药物成为当今生命科学亟待解决的问题。
技术实现思路
为了解决上述问题，即预防和/或治疗胃肠道应激性损伤，本专利技术人作了不懈的努力。结果意外地发现，低氧诱导因子-la (HIF-Ia)和角质细胞生长因子(KGF)的联合对于急性应激性胃肠道损伤性疾病具有甚为良好的治疗效果。具体地说，本专利技术人发现，含有同时携带并可在真核细胞中表达HIF-Ia基因和KGF基因的重组载体的重组减毒沙门氏菌制剂在经ロ服之后，可以将HIF-I α基因和KGF基因两者转染到胃肠组织细胞，表达HIF-I α和KGF活性蛋白，从而对急性应激性胃肠道损伤性疾病特别是缺氧应激致胃肠道损伤性疾病及其他急性应激因素致胃肠道损伤性疾病起到良好的防治效果。此外，通过急进高海抜地区建立缺氧应激致胃肠道损伤模型，并通过ロ服含有同时携带并可在真核细胞中表达HIF-I α和KGF基因的重组载体的减毒沙门氏菌制剂进行治疗，取得了良好的治疗防治效果。此外，本专利技术人还发现，HIF-Ια和KGF的联合对其他急性应激因素致胃肠道损伤如急性应激性溃疡性结肠炎、急性应激胃溃疡均具有良好的防治效果。基于以上发现，本专利技术人完成了以下专利技术。概括地说，本专利技术第一方面提供了 HIF-I α和KGF联合用于制备预防和/或治疗急性应激性胃肠道损伤性疾病的药物中的用途。 在一个优选的实施方案中，所述HIF-I α和KGF以携带HIF-I α和KGF基因的重组质粒或重组减毒沙门氏菌的形式提供。本专利技术第二方面提供了ー种重组载体，其同时携带并可在真核细胞中表达HIF-I α基因和KGF基因。在一个优选的实施方案中，所述载体为同时携带并可在真核细胞中表达表达HIF-I α基因和KGF基因的pIRES质粒。本专利技术第三方面提供了ー种重组细菌，其含有本专利技术第二方面所述的重组载体。在一个优选的实施方案中，所述重组细菌为重组减毒沙门氏菌。本专利技术第四方面提供了ー种药物组合物，其包含治疗有效量的HIF-Ia和KGF，或者包含治疗有效量的本专利技术第二方面所述的重组载体，或者包含治疗有效量的本专利技术第三方面所述的重组细菌。在一个优选的实施方案中，所述药物组合物为含有同时携带并可在真核细胞中表达HIF-I α和KGF基因的pIRES质粒或者含有所述质粒的重组减毒沙门氏菌Ty21a。通过采用本专利技术的重组质粒或者重组减毒菌，可以有效地治疗急性应激性胃肠道损伤性疾病，特别是缺氧应激致胃肠道损伤性疾病，如高原应激反应、及其他急性的全身或胃肠道局部缺血缺氧性疾病引起的急性胃肠道损伤。附图说明图I示出KGF基因的PCR扩增产物的电泳結果。图2示出pIRES-HIF-Ι α基因质粒酶切鉴定結果。图中，M为250 bp DNA LadderMarker, I 为 piRES 质粒，2 为 pIRES-HIF-l α，3 为 Nhe I 酶 /Mlu I 酶酶切产物。图3 示出 pIRES-HIF-1 a-KGF 酶切鉴定結果。图中，M 为 250 bp DNA LadderMarker, I 为 piRES 质粒，2 为 pIRES-HIF-l a -KGF, 3 为 Xba I/Not I 酶酶切产物，4 为 Nhel酶/Mlu I酶酶切产物。图4示出用重组减毒沙门氏菌TPHK治疗的溃疡性结肠炎大鼠的结肠的一般形态学观察結果。图5示出用重组减毒沙门氏菌TPHK防治的溃疡性结肠炎大鼠的结肠的组织病理学观察結果。图6示出用重组减毒沙门氏菌TPHK防治的高海拔缺氧肠应激损伤大鼠的小肠的组织病理学观察結果。图7示出用重组减毒沙门氏菌TPHK防治的高海拔缺氧肠应激损伤大鼠的血浆丙ニ醛(MDA)的含量检测結果。图中，舞 vs N(^i，P<0.01;1#vsT(^i，P<0.01;fvsPTPH组，P < O. 01, · vsPTPK 组，P < O. 01 ;O vsTTPH 组，P < O. 05。图8示出用重组减毒沙门氏菌TPHK防治的高海拔缺氧肠应激损伤大鼠的血浆超氧化物歧化酶(SOD)的活力检测結果。图中，来vs NC组，P < O. 01，合vsTC组，P < O. 01 ；ψ vsPTPH 组，P < O. 01, · vsPTPK 组，P < O. 01 ；# vsTTPH 组，P < O. 01, ★ vsTTPK 组，P<O. 01。图9示出用重组减毒沙门氏菌TPHK防治的高海拔缺氧肠应激损伤大鼠的肠组织中丙ニ醛(MDA)的含量检测結果。图中パ灰vs NC组，P < O. 01 ；φ vsTC组，P < O. 01 ；Q vsPTPH 组，P < O. 05, ψ' vsPTPH 组，P < O. 01 vsTTPH 组，P < O. 01, ★ vsTTPK 组，P<O. 01。图10示出用重组减毒沙门氏菌TPHK防治的高海拔缺氧肠应激损伤大鼠的肠组织中超氧化物歧化酶(SOD)的活力检测結果。图中，U vsTT本文档来自技高网...
【技术保护点】
HIF？1α和KGF联合用于制备预防和/或治疗急性应激性胃肠道损伤性疾病的药物中的用途。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：哈小琴，杨志华，彭俊华，邓芝云，董菊子，赵勇，张媛媛，
申请(专利权)人：厚朴生物科技苏州有限公司，
类型：发明
国别省市：
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