一种细胞因子突变体融合抗体的制备及其应用制造技术

本发明专利技术属基因工程抗体技术领域，具体地公开了一种靶向人血管内皮生长因子(VEGFR2，亦称KDR)的抗体JZB00与一种干扰素α(IFNα)突变体的融合抗体JZA02、其制备方法及用途。本发明专利技术还公开了JZA02的重链和轻链免疫球蛋白分子的氨基酸序列。本发明专利技术还提供了JZA02重链及轻链基因的构建方法，转染CHO细胞，有限稀释法挑取单克隆，后通过真核细胞分泌表达、亲和层析纯化获得融合抗体。本发明专利技术的融合抗体可特异性结合于VEGFR2，可以抑制肿瘤新生血管的生成，偶联的突变干扰素部分还可以发挥直接的肿瘤杀伤作用和免疫调节作用，同时不产生毒副作用，从而更好地抑制肿瘤的生长。该融合抗体在体外可以抑制人静脉内皮细胞(HUVEC)及部分肿瘤细胞的增殖，且抑制程度高于野生型IFNα与JZB00的融合抗体JZA01。

【技术实现步骤摘要】
一种细胞因子突变体融合抗体的制备及其应用本专利技术属于生物工程领域，具体涉及一种可与人VEGFR2特异结合的高亲和力全人源融合抗体，该抗体以JZA01为基础，通过突变干扰素，提高其与干扰素受体IFNAR1和IFNAR2的亲和力，从而发挥更好的抗肿瘤效果。该抗体不仅能抑制人血管内皮生长因子受体2的活化，从而抑制肿瘤新生血管的生成，而且通过靶向作用使IFN富集于肿瘤及肿瘤新生血管部位，且不产生毒副作用；更重要的是，通过对干扰素进行突变，在保证其活性不发生改变的前提下，其与干扰素受体IFNAR1和IFNAR2的亲和力大大提高，发挥更强的肿瘤杀伤作用和免疫调节作用，是一种具有抗血管生成活性和抗肿瘤活性的基因工程抗体。
技术介绍
肿瘤细胞的发生发展离不开新生血管的营养供给，而新生血管的生长离不开各种细胞因子及其受体的相互作用。现有研究表明，血管内皮生长因子/血管内皮生长因子受体(VEGF/VEGFR)信号通路对于新生血管的生成具有关键性的调节作用。VEGFR2作为VEGF的主要受体，调节血管内皮细胞的增殖、存活、迁移和通透性的改变。人血管内皮生长因子受体2(vascularendothelialgr本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种全人源的抗人血管内皮生长因子受体2的融合抗体，其特征在于：以抗VEGFR2抗体‑干扰素融合蛋白JZA01(专利申请号为：201610159826.1)为基础，通过突变干扰素，提高其与干扰素受体IFNAR1和IFNAR2的亲和力，从而发挥更好的抗肿瘤作用。

【技术特征摘要】
1.一种全人源的抗人血管内皮生长因子受体2的融合抗体，其特征在于：以抗VEGFR2抗体-干扰素融合蛋白JZA01(专利申请号为：201610159826.1)为基础，通过突变干扰素，提高其与干扰素受体IFNAR1和IFNAR2的亲和力，从而发挥更好的抗肿瘤作用。2.根据权利要求1所述的一种全人源的抗人血管内皮生长因子受体2的融合抗体，其特征在于：其中一条链由抗VEGFR2的全长抗体的重链与IFNα突变体蛋白以柔性肽连接组成，其氨基酸序列为SEQNO.1；另一条链为抗VEGFR2的全长抗体的轻链，其氨基酸序列为SEQNO.2。3.一种分离的核酸，其特征在于，该核酸编码权利要求1的一种...

【专利技术属性】
技术研发人员：张娟，朱怡佳，李晨晨，雪莉·莫里森，王旻，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32