提供结合人类Wnt的新颖抗癌剂，包括但不限于抗体。还鉴定了Wnt中适合用作抗癌剂的靶的保守结构域。还提供使用所述药剂或抗体的方法，诸如使用所述药剂或抗体来抑制Wnt信号传导和/或抑制肿瘤生长的方法。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术的领域一般涉及结合人类Wnt的抗体和其它药剂，以及涉及使用该抗体或其它药剂治疗诸如癌症的疾病的方法。
技术介绍
在发达国家中癌症是主要的死亡原因之一，仅在美国每年就有超过100万人被诊断患有癌症并有500，000例死亡。总体来说，据估计超过三分之一的人在其一生中会患上 某种形式的癌症。存在超过200种不同类型的癌症，其中四种-乳癌、肺癌、结肠直肠癌和前列腺癌-占所有新发病例的一半以上(Jemal等，2003, Cancer J. Clin. 53:5-26)。Wnt信号传导途径已被鉴定为用于癌症治疗的潜在靶。Wnt信号传导途径是胚胎模式形成、胚后组织维持和干细胞生物学的若干种关键调节方式之一。更具体地，fct信号传导在细胞极性的产生和细胞命运特化包括被干细胞群自我更新中起重要作用。未经调节的Wnt途径激活与许多人类癌有关，在这些癌中Wnt途径可以改变肿瘤细胞的发育命运，将其维持在未分化的增殖状态。因此，致癌作用可通过夺取经由干细胞控制正常发育和组织修复的体内平衡机制而进行(综述于Reya&Clevers, 2005, Nature, 434:843-50 ；Beachy等，2004，Nature, 432:324-31)。Wnt信号传导途径首先在果蚬发育突变无翅(wingless)基因(wg)中阐述，并来自鼠原-致癌基因 int-Ι,现在称为 Wntl (Nusse&Varmus, 1982，Cell, 31:99-109 ；VanOoyen&Nusse, 1984，Cell，39:233-40 ；Cabrera 等，1987，Cell，50:659-63 ；Rijsewijk等，1987，Cell，50:649-57)。Wnt基因编码分泌型脂质修饰糖蛋白，其中已在哺乳动物中鉴定出19种。这些分泌的配体激活由卷曲(Frizzled, FZD)受体家族成员和低密度脂蛋白(LDL)受体-相关蛋白5或6 (LRP5/6)组成的受体复合物。FZD受体是G-蛋白偶联受体(GPCR)超家族中的七个跨膜域蛋白，包含带有10个保守半胱氨酸的大型胞外N-末端配体结合结构域，称为富含半胱氨酸结构域(CRD)或Fri结构域。存在十种人类FZD受体FZDI、FZD2、FZD3、FZD4、FZD5、FZD6、FZD7、FZD8、FZD9、FZDIO。不同的 FZD CRD 对特定 Wnt具有不同的结合亲和力(Wu&Nusse，2002, J. Biol. Chem.，277:41762-9)，且FZD受体已被分类为激活经典β -连环蛋白途径的FZD受体和下述激活非经典途径的FZD受体(Miller等，1999，Oncogene, 18:7860-72)。为了形成结合FZD配体的受体复合物，FZD受体与LRP5/6相互作用，LRP5/6是具有被六个YWTD氨基酸重复分隔的四个胞外EGF-样结构域的单次跨膜的跨膜蛋白(Johnson 等,2004, J. Bone Mineral Res. , 19:1749)。受体结合时所激活的经典Wnt信号传导途径被与FZD受体直接相互作用的胞质蛋白Dishevelled(Dsh)介导，并且导致β _连环蛋白的胞质稳定和积累。在不存在fct信号时，连环蛋白局限于包括肿瘤抑制蛋白结肠腺瘤样息肉(APC)和轴蛋白(Axin)的胞质破坏复合物。这些蛋白的功能为重要支架，以允许糖原合酶激酶-3 β (GSK-3 β )结合和磷酸化连环蛋白，从而标记其经由泛素/蛋白酶体途径而降解。Dsh的激活导致GSK33的磷酸化和破坏复合物的解离。然后积累的胞质连环蛋白被运输到细胞核中，其在该处与TCF/LEF家族的DNA-结合蛋白相互作用以激活转录。除了经典信号传导途径，Wnt配体还激活β -连环蛋白-非依赖性途径(Veeman等，2003, Dev. Cell，5:367-77)。非经典Wnt信号传导已经牵涉在许多过程中，但最具说服力的是经由类似于果蝇平面细胞极性(PCP)途径的机制而牵涉原肠胚形成移动。非经典fct信号传导的其它可能机制包括钙流、JNK、以及小的和异源三聚体G-蛋白二者。在经典途径与非经典途径之间常观察到拮抗作用，且一些证据表明非经典信号传导可抑制癌症形成(Olson&Gibo, 1998, Exp. Cell Res.，241:134 ;Topol 等，2003，J. CellBiol.，162:899-908)。因此在某些环境中，FZD受体作充当经典Wnt信号传导途径的负调节子。例如，FZD6当与FZDl共表达时经由TAKl-NLK途径抑制Wnt3a_诱导的经典信号传导(Golan 等，2004, JBC. 279:14879-88)。类似地，在 Wnt5a 存在时，FZD2 经由 TAKl-NLK MAPK级联拮抗经典 Wnt 信号传导(Ishitani 等，2003，Mol. Cell. Biol.，23:131-9)。 经典Wnt信号传导途径还在保持小肠和结肠中的干细胞群方面起关键作用，且这一途径的不适当激活在结肠直肠癌中起到突出作用(Reya&Clevers, 2005, Nature, 434:843)。肠的吸收性上皮排列成绒毛和隐窝。干细胞驻留在隐窝中并缓慢分裂以产生快速增殖的细胞，这些速增殖的细胞产生所有分化细胞群，它们移出隐窝以占据肠绒毛。fct信号传导级联在控制沿着隐窝-绒毛轴的细胞命运方面起主要作用，并且对于干细胞群的保持是必需的。通过同源重组遗传丧失Tcf7/2 (Korinek等，1998，Nat. Genet.，19:379)或过表达有效的分泌性 Wnt 拮抗剂 Dickkopf-I (Dkkl) (Pinto 等，2003，Genes Dev. 17:1709-13 ；Kuhnert等，2004, PNAS, 101:266-71)来破坏Wnt信号传导导致耗竭肠干细胞群。随着鉴定Wntl (最初为inti)为在通过在附近插入鼠病毒而转化的乳瘤中的致癌基因，首次揭示了 fct信号传导在癌症中的作用(Nusse&Varmus, 1982，Cell，31:99_109)。此后积累了 fct信号传导在乳癌中的作用的另外证据。例如，乳腺中β_连环蛋白的转基因过表达导致增生和腺癌(Imbert 等,2001, J. CellBiol. , 153:555-68 ；Michaelson&Leder, 2001, Oncogene, 20:5093-9),而Wnt信号传导的丧失破坏正常乳腺发育(Tepera等，2003, J.CellSci. , 116:1137-49 ；Hatsell 等,2003, J. Mammary Gland Biol. Neoplasia,8:145-58)。最近，乳房干细胞已被证实可由Wnt信号传导激活(Liu等，2004, PNAS. 101:4158)。在人类乳癌中，β_连环蛋白积累在多于50%的癌中牵涉激活的Wnt信号传导，尽管还未鉴定具体突变，但已观察到卷曲受体表达的上调(Brennan&Brown, 2004, J. Mammary Glan本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：奥斯丁·L·格尼，
申请(专利权)人：昂考梅德药品有限公司，
类型：发明
国别省市：
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