纤维化疾病的治疗制造技术

本发明专利技术涉及RSPO和LGR拮抗剂，以及使用RSPO和LGR拮抗剂治疗或预防纤维化疾病的方法。本发明专利技术提供了治疗受试者中的纤维化疾病的方法，其中所述方法包括对受试者施用治疗有效量的RSPO和/或LGR拮抗剂，例如抗RSPO抗体、抗LGR抗体或可溶性LGR受体。本发明专利技术还提供了治疗或预防受试者中的纤维化疾病的方法，其包括对受试者施用治疗有效量的LGR结合剂、包括本文所述的那些LGR结合剂中的任一种。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】相关申请的交叉引用本申请要求2014年9月16日提交的美国临时申请第62/051,026号的优先权权益，本文通过援引并入其整体内容。
本专利技术的领域大致涉及RSPO和LGR拮抗剂，包括但不限于结合RSPO(特别是人RSPO1、RSPO2及RSPO3)的抗体和其它试剂，以及使用所述RSPO和/或LGR拮抗剂以治疗纤维化疾病的方法。
技术介绍
据估计在发达国家中，纤维化(fibrosis)直接或间接造成将近45％的死亡。纤维化疾病(fibroticdisease)的特征在于细胞外基质成分的过度累积，该过度累积扰乱生理组织结构，导致受影响器官的功能失调。在一些情况中，纤维化被认为是慢性组织刺激或慢性发炎的结果。在一些情况中，纤维化被认为是体内自体免疫反应的结果。在纤维化疾病诸如硬皮症、肺纤维化及肝硬化中，观察到实质组织逐渐被细胞外基质成分取代。然而，维持纤维化级联的细胞因素及分子因素仍不明。Wnt信号传导与数种人纤维化疾病有关。在一些类型的纤维化疾病中，经活化的Wnt信号传导可通过β-连环蛋白的累积、Wnt途径配体诸如Wnt1及Wnt10B的上调、及Wnt途径负调节子诸如Dkk1的下调加以识别(Akhmetshina等，2012,NatureCommunications,3：735；Guo等，2012,Physiol.Res.,61：337-346)。Wnt信号传导途径是胚胎模式形成、后胚胎组织维持及干细胞生物学的重要调节因子之一。不受调节的Wnt途径活化与多种人类疾病有关，其中致病机制通过篡夺控制正常发育和/或组织修复的稳态机制进行。据显示，Wnt配体及R-脊椎蛋白(RSPO)协同作用以活化典型Wnt途径。已知RSPO蛋白活化与Wnt信号传导类似的β-连环蛋白信号传导，然而RSPO蛋白与Wnt信号传导之间的关系仍在研究当中。据报告RSPO蛋白对Wnt配体具有正调节活性(Nam等，2006,JBC281：13247-57)。此研究亦指出RSPO蛋白可充当Frizzled8及LRP6受体配体并诱导β-连环蛋白信号传导(Nam等，2006,JBC281：13247-57)。最近研究已鉴定出RSPO蛋白与LGR(含有富亮氨酸重复的G蛋白偶合受体)蛋白如LGR5之间的相互作用(美国专利公开号2009/0074782及2009/0191205)，这些数据呈现活化β-连环蛋白信号传导的替代途径。R-脊椎蛋白(RSPO)家族的蛋白在脊椎动物之间具保守性，包含四个成员RSPO1、RSPO2、RSPO3及RSPO4。这些蛋白有许多不同的名称，包括顶板特异性脊椎蛋白(roofplate-specificspondin)、hPWTSR(hRSPO3)、THS2D(RSPO3)、Cristin1-4及Futrin1-4。RSPO为小型分泌蛋白，所有RSPO共享大约40％至60％的序列同源性及结构域组织形式。所有RSPO蛋白包含在N端的两个furin样的富半胱氨酸结构域以及其后的血小板反应素结构域及碱性带电C端尾部(Kim等，2006,CellCycle,5：23-26)。研究显示，RSPO蛋白在脊椎动物发育期间(Kamata等，2004,Biochim.BiophysActa,1676：51-62)与爪蟾(Xenopus)的肌肉发育(Kazanskaya等，2004,Dev.Cell,7：525-534)方面具有功能。研究也显示RSPO1为胃肠上皮细胞的强效丝裂原(Kim等，2005,Science,309：1256-1259)。报告指出RSPO3主要表达于爪蟾及小鼠的内皮细胞及其细胞内前体之中或附近。另外，研究指出RSPO3可能在胚胎发生时充当血管生成因子(Kazanskaya等，2008,Development,135：3655-3664)。经诊断罹患纤维化疾病的患者的药物治疗选择非常有限。需要针对纤维化以及纤维化中涉及的信号传导途径的新颖药剂。因此，扰乱纤维化中涉及的信号传导途径的生物分子诸如RSPO结合剂是新型治疗剂的潜在来源。
技术实现思路
本专利技术提供了治疗或预防受试者中的纤维化疾病的方法，其中该方法包括对受试者施用治疗有效量的RSPO和/或LGR拮抗剂，例如，抗RSPO抗体、抗LGR抗体或可溶性LGR受体。在一些实施方式中，RSPO和LGR拮抗剂包括但不限于与至少一种RSPO或LGR蛋白结合的抗体和其它多肽、结合至少一种RSPO或LGR蛋白的小分子以及可溶性LGR蛋白。RSPO蛋白(例如，人蛋白)可以为RSPO1、RSPO2、RSPO3和RSPO4之一。LGR蛋白可以为LGR4、LGR5或LGR6。在一些实施方式中，RSPO或LGR拮抗剂是RSPO结合剂。在一些实施方式中，RSPO或LGR拮抗剂是LGR结合剂。在一些实施方式中，RSPO或LGR拮抗剂是抗体。在一些实施方式中，RSPO或LGR拮抗剂是抗RSPO抗体。在一些实施方式中，RSPO或LGR拮抗剂是抗LGR抗体。在一些实施方式中，RSPO或LGR拮抗剂是可溶性受体。在一些实施方式中，RSPO或LGR拮抗剂是LGR-Fc可溶性受体。在一些实施方式中，RSPO或LGR拮抗剂是LGR5-Fc可溶性受体。在一些实施方式中，RSPO或LGR拮抗剂是与至少一种RSPO蛋白或其一部分特异性结合的抗体。在一些实施方式中，与至少一种人RSPO蛋白特异性结合的抗体选自由以下组成的组：RSPO1、RSPO2、RSPO3和RSPO4。本专利技术提供了治疗或预防受试者中的纤维化疾病的方法，其中该方法包括对受试者施用治疗有效量的RSPO结合剂，包括本文所述的那些中的任一种。在一些实施方式中，该RSPO结合剂是特异性结合人RSPO蛋白的抗体。在一些实施方式中，该RSPO结合剂是特异性结合人RSPO1的抗体。在一些实施方式中，该RSPO结合剂是特异性结合人RSPO2的抗体。在一些实施方式中，该RSPO结合剂是特异性结合人RSPO3的抗体。在一些实施方式中，该RSPO结合剂是特异性结合人RSPO4的抗体。在一些实施方式中，治疗或预防受试者的纤维化疾病的方法包括对该受试者施用治疗有效量的特异性结合人RSPO1的抗体。在一些实施方式中，治疗或预防受试者的纤维化疾病的方法包括对该受试者施用治疗有效量的特异性结合人RSPO2的抗体。在一些实施方式中，治疗或预防受试者的纤维化疾病的方法包括对该受试者施用治疗有效量的特异性结合人RSPO3的抗体。在一些实施方式中，治疗或预防受试者的纤维化疾病的方法包括对该受试者施用治疗有效量的与人RSPO1特异性结合的抗体以及治疗有效量的特异性结合人RSPO1的抗体和治疗有效量的特异性结合人RSPO2特异性结合的抗体。在一些实施方式中，治疗或预防受试者的纤维化疾病的方法包括对该受试者施用治疗有效量的特异性结合人RSPO1的抗体以及治疗有效量的特异性结合人RSPO3的抗体。在一些实施方式中，治疗或预防受试者的纤维化疾病的方法包括对该受试者施用治疗有效量的特异性结合人RSPO2的抗体以及治疗有效量的特异性结合人RSPO3的抗体。在一些实施方式中，所述RSPO结合剂是特异性结合人RSPO蛋白的可溶性受体。在一些实施方式中，所述RSPO结合剂是特异性结合人RSPO1本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种治疗或预防受试者中的纤维化疾病的方法，其包括对该受试者施用治疗有效量的人R‑脊椎蛋白(RSPO)或LGR拮抗剂。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.09.16 US 62/051,0261.一种治疗或预防受试者中的纤维化疾病的方法，其包括对该受试者施用治疗有效量的人R-脊椎蛋白(RSPO)或LGR拮抗剂。2.如权利要求1所述的方法，其中所述RSPO或LGR拮抗剂是抗体。3.如权利要求1或2所述的方法，其中所述RSPO或LGR拮抗剂是特异性结合至少一种RSPO蛋白或其一部分的抗体。4.如权利要求2或3所述的方法，其中所述抗体特异性结合选自由人RSPO1、人RSPO2、人RSPO3或人RSPO4组成的组中的至少一种RSPO蛋白。5.如权利要求2至4中任一项所述的方法，其中所述抗体特异性结合RSPO1。6.如权利要求2至5中任一项所述的方法，其中所述抗体特异性结合RSPO1且包含：(a)包含TGYTMH(SEQIDNO:5)的重链CDR1、包含GINPNNGGTTYNQNFKG(SEQIDNO:6)的重链CDR2和包含KEFSDGYYFFAY(SEQIDNO:7)的重链CDR3；以及(b)包含KASQDVIFAVA(SEQIDNO:8)的轻链CDR1、包含WASTRHT(SEQIDNO:9)的轻链CDR2和包含QQHYSTPW(SEQIDNO:10)的轻链CDR3。7.如权利要求2至6中任一项所述的方法，其中所述抗体特异性结合RSPO1且包含：(a)与SEQIDNO:11具有至少90％序列同一性的重链可变区和与SEQIDNO:12具有至少90％序列同一性的轻链可变区；或(b)与SEQIDNO:56具有至少90％序列同一性的重链可变区和与SEQIDNO:57具有至少90％序列同一性的轻链可变区。8.如权利要求2至6中任一项所述的方法，其中所述抗体特异性结合RSPO1且包含：(a)SEQIDNO:11的重链可变区和SEQIDNO:12的轻链可变区；或(b)SEQIDNO:56的重链可变区和SEQIDNO:57的轻链可变区。9.如权利要求2至4中任一项所述的方法，其中所述抗体特异性结合RSPO2。10.如权利要求2至4或9中任一项所述的方法，其中所述抗体特异性结合RSPO2且包含：(a)包含SSYAMS(SEQIDNO:21)的重链CDR1、包含SISSGGSTYYPDSVKG(SEQIDNO:22)的重链CDR2和包含RGGDPGVYNGDYEDAMDY(SEQIDNO:23)的重链CDR3；和(b)包含KASQDVSSAVA(SEQIDNO:24)的轻链CDR1、包含WASTRHT(SEQIDNO:25)的轻链CDR2和包含QQHYSTP(SEQIDNO:26)的轻链CDR3。11.如权利要求2至4、9或10中任一项所述的方法，其中所述抗体特异性结合RSPO2且包含与SEQIDNO:27具有至少90％序列同一性的重链可变区及与SEQIDNO:28或SEQIDNO:66具有至少90％序列同一性的轻链可变区。12.如权利要求2至4或9至11中任一项所述的方法，其中所述抗体特异性结合RSPO2且包含SEQIDNO:27的重链可变区及SEQIDNO:28或SEQIDNO:66的轻链可变区。13.如权利要求2至4中任一项所述的方法，其中所述抗体特异性结合RSPO3。14.如权利要求2至4或13中任一项所述的方法，其中所述抗体特异性结合RSPO3且包含：(a)包含DYSIH(SEQIDNO:37)的重链CDR1、包含YIYPSNGDSGYNQKFK(SEQIDNO:38)的重链CDR2和包含TYFANNFD(SEQIDNO:39)的重链CDR3；和(b)包含KASQSVDYDGDSYMN(SEQIDNO:41)的轻链CDR1、包含AASNLES(SEQIDNO:42)的轻链CDR2和包含QQSNEDPLT(SEQIDNO:44)的轻链CDR3。15.如权利要求2至4、13或14中任一项所述的方法，其中所述抗体特异性结合RSPO3且包含与SEQIDNO:46具有至少90％序列同一性的重链可变区及与SEQIDNO:47具有至少90％序列同一性的轻链可变...

【专利技术属性】
技术研发人员：J·A·卡隐，
申请(专利权)人：昂考梅德药品有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US